主要功能和细节
小鼠单克隆[3E9]至KPNB1 适用于:Flow Cyt、IP、WB、ICC/IF 反应:小鼠、大鼠、人类 同位素:IgG2a
概述
-
产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [3E9]至KPNB1 -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 与奶牛KPNB1相对应的全长天然蛋白质(纯化)。 从牛红细胞中提纯。 数据库链接: E1BFV0型 -
阳性对照 WB:HeLa、Caco-2、NIH/3T3、U251 MG、HepG2和C6全细胞裂解物。 ICC:HMVEC细胞、PTK细胞。 流式细胞术:PC-12、Jurkat和NIH 3T3细胞。
-
常规说明 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
一级抗体 蛋白质在细胞核中的积累是由称为核定位序列(NLS)的碱性氨基酸短序列介导的。 这些序列对于将蛋白质或惰性载体导向核内部是必要的和足够的。 核蛋白导入是通过两个连续的、依赖能量的事件来完成的。 第一步,在核孔复合体对接,需要一个54/56 kDa的核定位信号受体(a-核球蛋白,导入蛋白-a,SRP-a)和核转运因子p97(NTF 97,b-核球素,导入蛋白-b)。 第二步,跨核膜易位(NE),需要GTP结合蛋白Ran/TC4。 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 第3页第9页 -
同种型 IgG2a -
研究领域
相关产品
-
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
偶联试剂盒 -
同位素控制
应用
靶标
-
功能 核蛋白导入中的功能,要么与适配器蛋白相关,如与货物基质中的核定位信号(NLS)结合的重要α亚基,要么作为自主核转运受体。 自主行动,充当NLS受体。 重要蛋白/底物复合物与核孔复合物(NPC)的对接是由KPNB1通过与核孔蛋白FxFG重复序列的结合介导的,随后复合物通过需要能量的Ran依赖机制通过孔转运。 在NPC的核质侧,Ran与进口β结合,分离的三种成分和进口α和β从细胞核重新输出到细胞质,GTP水解从进口蛋白释放Ran。 核导入的方向性被认为是由GTP和GDP结合形式的Ran在细胞质和细胞核之间的不对称分布所赋予的。 自主调节核糖体蛋白RPL23A、RPS7和RPL5的核导入。 结合到RPL23A的类β导入受体结合(BIB)域。 与IPO7联合介导H1组蛋白的核导入。 在体外,介导H2A、H2B、H3和H4组蛋白的核导入。 在HIV-1感染的情况下,结合并介导HIV-1的核导入。将PRKCI导入细胞核。 -
序列相似性 属于importin beta家族。 包含8次HEAT重复。 包含1个导入N端域。 -
细胞定位 细胞质。 细胞核包络。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 3837 人类 Entrez基因: 16211 鼠标 Entrez基因: 24917 老鼠 Omim公司: 602738 人类 瑞士保护银行: 问题14974 人类 瑞士保护银行: 第70168页 鼠标 瑞士保护银行: 第52296页 老鼠 尤尼金: 532793 人类
查看所有内容 -
别名 IMB 1抗体 IMB1抗体 IMB1_HUMAN抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 1/5000稀释度的抗KPNB1抗体[3E9](ab2811) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: Caco-2(人大肠腺癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 车道4: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗鼠IgG H+L(HRP)1/4000稀释 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 97千帕 -
使用ab2811对KPNB1染色的HMVEC(人肺微血管内皮细胞)细胞进行免疫荧光分析。 -
NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)细胞在PHEM/1%triton中培养4分钟,在1x PHEM中洗涤2分钟,并在室温下在含有30mM蔗糖的3.7%PFA中固定10分钟。 在PBS中洗涤后,将细胞在-20°C的100%甲醇中培养2分钟,然后在PBS内洗涤3次。然后在室温下用ab2811(1/200)培养细胞1小时。 图像面板显示细胞核DAPI染色(蓝色),核膜和细胞质ab2811染色(绿色)。 放大100倍。 -
Importinβ在HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞中的免疫沉淀,使用ab2811。 将考马斯染色的8%SDS-page凝胶与2 mg预先清除的HeLa全细胞提取物与4μg ab2811或4μg IgG(对照)孵育获得的IP组分装载。 从凝胶中切下Importin带(见箭头),并通过质谱法确认其身份。 请参阅协议选项卡了解更多实验细节。 -
流式细胞术分析Jurkat(外周血人类T细胞白血病细胞系)细胞(绿色)与同型对照(蓝色)中KPNB1的比较。 收集细胞,调整至1-5x10^6个细胞/ml的浓度,用2%多聚甲醛固定,并用PBS洗涤。细胞在室温下用2%的BSA-PBS溶液封闭30分钟,并在室温下与ab2811(1ug/test)孵育40分钟。 然后使用Dylight 488缀合的第二抗体在室温下在黑暗中孵育细胞40分钟,并将其重新悬浮在PBS中用于FACS分析。 -
所有车道: 1/50稀释度的抗KPNB1抗体[3E9](ab2811) 车道1: U-251 MG(人脑胶质瘤细胞系)全细胞裂解物 车道2: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道25µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP结合二级抗体 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
所有车道: 1/2000稀释度的抗KPNB1抗体[3E9](ab2811) 车道1: 小鼠肺全组织裂解物 车道2: 小鼠肾脏全组织裂解物 3号车道: 小鼠脾脏全组织裂解物 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗鼠IgG多克隆1/5000稀释 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 97千帕 暴露时间: 3分钟
-
1/5000稀释的抗KPNB1抗体[3E9](ab2811)+HeLa全细胞提取物 次要 HRP-结合抗鼠IgG,1/5000稀释 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 在10%SDS-PAGE上运行HeLa全细胞提取物,并将其转移到PVDF膜上。 膜在TBS/0.1%吐温/5%牛奶中堵塞30分钟; ab2811(1/5000)在TBS/0.1%吐温/5%牛奶中培养1小时,然后在TBS/0.1%吐温中清洗3次(3 x 7分钟)。 二级抗体在TBS/0.1%吐温溶液中培养30分钟。 然后用TBST溶液清洗3次(3x7分钟),在TBS中清洗一次。使用ECL plus(Amersham)开发Western blot。 -
使用ab2811对KPNB1在PTK(长剂量potoroo上皮肾细胞系)细胞中的免疫定位。 -
对PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)细胞(绿色)和同型对照(蓝色)中KPNB1进行流式细胞术分析。 收集细胞,调整至1-5x10^6个细胞/ml的浓度,用2%多聚甲醛固定,并用PBS洗涤。细胞在室温下用2%的BSA-PBS溶液封闭30分钟,并在室温下与ab2811(1ug/test)孵育40分钟。 然后使用Dylight 488-共轭二级抗体在室温黑暗中培养细胞40分钟,并在PBS中重新悬浮以进行FACS分析。 -
3T3细胞(绿色)与同型对照(蓝色)中KPNB1的流式细胞术分析。 收集细胞,调整至1-5x10^6个细胞/ml的浓度,用2%多聚甲醛固定,并用PBS洗涤。细胞在室温下用2%的BSA-PBS溶液封闭30分钟,并在室温下与ab2811(1ug/test)孵育40分钟。 然后使用Dylight 488-共轭二级抗体在室温黑暗中培养细胞40分钟,并在PBS中重新悬浮以进行FACS分析。 -
显示用ab2811染色的Jurkat细胞的叠加直方图(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab2811,1/100稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约96879 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG2a[ICIGG2A]( ab91361号 ,2微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用甲醇固定(5分钟)/在相同条件下使用0.1%PBS-Tween渗透的Jurkat细胞中发出阳性信号。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (62)
余M 等。 现场可视化混乱的核运输机械。 自然 617:162-169 (2023). 公共医学:37100914 曼恩JR 等。 ALS-相关NEK1激酶功能丧失会破坏微管内环境稳定和细胞核导入。 科技进步 9:eadi5548(2023年)。 公共医学:37585529 宫本茂Y 等。 SARS-CoV-2 ORF6干扰核质转运以促进病毒复制。 公共生物 5:483 (2022). 公共医学:35590097 安德烈一世 等。 对细胞核施加机械力调节核质转运。 Nat细胞生物学 24:896-905 (2022). 公共医学:35681009 马托拉S 等。 G2/M检查点调控和凋亡促进细小病毒衣壳的核出口。 前电池开发生物 10:1070599 (2022). 公共医学:36568985