主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR23043-5]至EED-ChIP级 适用于:ChIP、ChIP定序、WB、IP 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
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相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR23043-5]至EED-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
特异性 ab240650在细胞质中检测到靠近靶带的未知带。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1、K562、293T、NIH/3T3和C2C12裂解物。 IP:K562细胞。 ChIP:由NT2/D1细胞制备的染色质。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59.94%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR23043-5型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
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应用
靶标
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功能 多梳组(PcG)蛋白。 PRC2/EED-EZH2复合物的成分,使组蛋白H3的“Lys-9”和“Lys-27”甲基化,导致受影响的靶基因的转录抑制。 PRC2/EED-EZH2复合物也可作为DNA甲基转移酶的招募平台,从而连接两个表观遗传抑制系统。 PRC2/EED-EZH2复合物抑制的基因包括HOXC8、HOXA9、MYT1和CDKN2A。 -
组织特异性 在脑、结肠、心脏、肾脏、肝脏、肺、肌肉、卵巢、外周血白细胞、胰腺、胎盘、前列腺、脾脏、小肠、睾丸、胸腺和子宫中表达。 乳腺癌和结肠癌似乎过度表达。 -
序列相似性 属于WD重复ESC系列。 包含7个WD重复。 -
发展阶段 在G1/S相界处出现峰值。 -
细胞定位 核心。 染色体。 在不活跃的X染色体上与XIST暂时共定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 eed抗体 EED蛋白抗体 EED,小鼠,抗体同源物
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图片
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所有车道: 抗-EED抗体[EPR23043-5]-ChIP等级(ab240650),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: EED敲除HAP1全细胞裂解物 车道3: 野生型HAP1核部分裂解物 车道4: EED敲除HAP1核部分裂解物 车道5: 野生型HAP1细胞质裂解物 车道6: EED敲除HAP1细胞质裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 50-70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3秒 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST ab240650在细胞质中检测到靠近靶带的未知带。 -
所有车道: 抗-EED抗体[EPR23043-5]-ChIP等级(ab240650),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: EED敲除HAP1全细胞裂解物 车道3: K562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞),全细胞裂解物 车道4: 293T(人胚胎肾上皮细胞),全细胞裂解物 车道5: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞),全细胞裂解物 车道6: C2C12(小鼠成肌细胞成肌细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 50-70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻断和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST ab240650在野生型HAP1细胞中显示出与EED特异性反应,因为EED敲除细胞中的信号丢失。 对野生型和EED基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab240650和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在室温下以1/1000稀释度和1/200000稀释度孵育1小时。 用山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶偶联物开发印迹( ab97051型 )二级抗体在成像前在室温下以1/100000稀释1小时。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID:275788669584199)。 EED cDNA编码441-aa长蛋白和535-aa长蛋白质。 曝光时间:1-3车道:15秒4-6车道:37秒 -
EED从0.35 mg K562(人类慢性粒细胞白血病淋巴母细胞)全细胞裂解液中用ab240650以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)进行免疫沉淀。 用ab240650在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 车道1:K562(人类慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解液10µg 泳道2:K562全细胞裂解物中的ab240650 IP 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )代替K562全细胞裂解液中的ab240650 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:1分钟 -
根据Abcam Dual-X-ChIP协议*,从NT2/D1细胞制备染色质。 细胞用1.5 mM EGS固定30分钟,然后用甲醛固定10分钟。 使用25微克染色质、5微克ab240650(红色)或5微克兔正常IgG进行ChIP 约172730 (灰色)和20µl蛋白质A/G sepharose珠。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Taqman方法用于活性和非活性位点,Sybr green方法用于异色位点)进行定量。 引物和探针是Millipore(产品目录号:17-10034)和CST(85322S)的商用引物 -
用0.1µL/µg染色质ab240650对小鼠胚胎干细胞的染色质进行ChIP测序分析。 用1%PFA交联10分钟。 在pH8、1.1mM EDTA、1.1%triton和167mM NaCl的含有20mM Tris的稀释缓冲液中,在4°C的温度下进行16小时的初步培养。 -
所有车道: 抗-EED抗体[EPR23043-5]-ChIP等级(ab240650),稀释度为1/1000 车道1: 野生型小鼠胚胎干细胞(mESC)细胞质提取物 车道2: EED敲除(KO1)mESC细胞质提取物 车道3: EED敲除(KO2)mESC细胞质提取物 车道4: 野生型mESC核质提取物 车道5: EED敲除(KO1)mESC核质提取物 车道6: EED敲除(KO2)mESC核质提取物 7号车道: 野生型mESC染色质提取物 第8车道: EED敲除(KO1)mESC染色质提取物 9号车道: EED敲除(KO2)mESC染色质提取物 次要 所有车道: 与HRP结合的羊抗兔抗体1/5000稀释度 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 40,47,55,60,65千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 其他波段位于: 细胞质组分中的100kDa、70kDa和55kDa(所有可能的非特异性结合) 该印迹是使用4-12%Bis-tris凝胶在还原变性条件下产生的。 转移后,使用5%牛奶在室温下封闭膜30分钟,然后在4°C下与ab240650孵育16小时。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (1)
魏格特R 等。 关键抑制通路之间的动态拮抗维持胎盘表观基因组。 Nat细胞生物学 25:579-591(2023年)。 公共医学:37024684