主要功能和细节
小鼠单克隆[9C8]到DDIT3 适用人群:WB、ICC/IF 淘汰验证 反应对象:老鼠、人类 同种型:IgG2b
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [9C8]至DDIT3 -
完 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 老鼠 -
完 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
表位 已证明ab11419能够识别DDIT3 N末端区域的一个表位。 -
阳性对照 WB:SW480细胞裂解液、用2 ug/ml衣霉素处理HeLa细胞4小时、NIH3T3细胞裂解物、野生型HeLa处理衣霉素细胞裂解物 ICC/IF:HeLa(未经治疗和衣霉素治疗)。
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常规说明 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS,6.97%L-精氨酸 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化的G蛋白 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 9C8号机组 -
同种型 IgG2b -
轻链类型 卡帕 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
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应用
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靶标
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功能 通过形成不能结合DNA的异二聚体来抑制C/EBP和LAP的DNA结合活性。 -
疾病相关 注:恶性黏液样脂肪肉瘤患者中发现DDIT3染色体畸变。 用FUS易位t(12;16)(q13;p11)。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 包含1个bZIP域。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1649 人类 Entrez基因: 13198 鼠标 Entrez基因: 29467 老鼠 Omim公司: 126337 人类 瑞士保护银行: 第35638页 人类 瑞士保护银行: 第35639页 鼠标 瑞士保护银行: Q62857问题 老鼠 尤尼金: 505777 人类
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别名 C/EBP同源蛋白抗体 C/EBP同源蛋白抗体 C/EBPζ抗体
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图片
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0.1%TritonX-100在PBS中渗透的甲醛固定HT29细胞的免疫细胞化学分析,以1/500的ab11419染色10分钟。 二级抗体为ImmPRESS®HRP山羊抗鼠IgG聚合物检测。 样品在4°C下用免疫荧光抗体稀释缓冲液与一级抗体孵育18小时。 使用过氧化物酶封闭溶液BLOXALL在20°C下封闭20分钟。 -
所有车道: 抗-DDIT3抗体[9C8](ab11419) 车道1: 野生型HeLa车辆控制土霉素细胞裂解物 车道2: 野生型HeLa处理的土霉素细胞裂解物 3号车道: DDIT3敲除HeLa车辆控制土霉素细胞裂解物 车道4: DDIT3敲除HeLa处理的土霉素细胞裂解物 每车道20µg/ml的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 19千Da 观察到的频带大小: 25千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:5µg/ml抗-DDIT3抗体[9C8]染色,以绿色显示; 兔抗α-微管蛋白抗体[EP1332Y]( 约52866 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab11419显示与DDIT3特异结合。 在野生型y细胞裂解物中观察到25kDa的条带,在DDIT3敲除细胞系中没有观察到该大小的信号 约265760 (敲除细胞裂解物 约256889 ). 为了生成该图像,分析了野生型和DDIT3敲除的y细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )稀释1/20000。 -
所有车道: 5µg/ml时的抗-DDIT3抗体[9C8](ab11419) 车道1: 野生型SW480细胞裂解物 车道2: DDIT3敲除SW480细胞裂解物 3号车道: 未经处理的HeLa细胞裂解物 车道4: HeLa+DMSO对照细胞裂解物 车道5: HeLa+衣霉素(20ug/mL,4小时)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 19千Da 观察到的频带大小: 26千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-5车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在26 kDa下观察到ab11419。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])在55kDa下观察到。 western blot显示ab11419与野生型SW480细胞中的DDIT3反应,在DDIT3敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型和DDIT3敲除SW480细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab11419和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])分别在4°C、5µg/ml和1:20000稀释液中过夜。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab11419在HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞+/-衣霉素1.5μM中染色DDIT3,6小时( 约120296 ). 用4%PFA固定细胞(10分钟),用0.1%Triton-X透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在+4°C下用ab11419以5μg/ml和 约6046 ,兔β-微管蛋白多克隆-负载对照,1/1000稀释。 然后将细胞与 ab150117号 、山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 488),稀释度为1/1000(以绿色显示) ab150084年 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 594),稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 5µg/ml时的抗-DDIT3抗体[9C8](ab11419) 车道1: 40µg的HeLa w/c对照细胞裂解液 车道2: 用2 ug/ml衣霉素处理HeLa细胞4小时,全细胞裂解物细胞裂解物为40µg 3号车道: 用20ug/ml衣霉素处理HeLa细胞4小时,全细胞裂解物细胞裂解物为40µg 车道4: 20µg的HepG2细胞裂解液 车道5: 20µg NIH3T3细胞裂解液 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 19千Da 1-5车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在27 kDa下观察到ab11419。 红负荷对照,兔抗肌动蛋白在42kDa下观察。 western blot显示ab11419与DDIT3反应。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )分别以5µg/ml和1:20000稀释液在4°C下与ab11419和兔抗肌动蛋白孵育过夜。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-DDIT3抗体[9C8](ab11419) 所有车道: 小鼠肝细胞全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗鼠IgG多克隆(1/10000稀释) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 19千Da 观察到的频带大小: 27千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5分钟 用20µg/ml聚(I:C)处理。 -
所有车道: 1/500稀释的抗-DDIT3抗体[9C8](ab11419)(在TBST+2.5%牛奶中,在4°C下保存16小时) 车道1: 小鼠3T3细胞的全细胞裂解状态 车道2: 用膜霉素处理24小时的小鼠3T3细胞的全细胞裂解物 每车道50µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗鼠IgG单克隆抗体的1/2000稀释度 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 19千Da 观察到的频带大小: 31千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 2分钟 阻塞步骤: 22°C下5%牛奶2小时 -
溴氰菊酯处理SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞系)细胞中DDIT3的ab11419染色( 约141019 )如文献所述,DDIT3表达增加与溴氰菊酯浓度增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养48小时,培养基中含有不同浓度的 约141019 (溴氰菊酯)在DMSO中,用100%甲醇在-20°C下固定5分钟,用含有10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%BSA和0.1%吐温的PBS在室温下封闭2小时。 用ab11419(10μg/ml)对处理过的细胞进行染色,在4°C的含1%BSA和0.1%吐温的PBS中过夜。 DyLight公司 ® 488抗小鼠多克隆抗体( 约96879 )以1/250稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI复染,显示为蓝色。
数据表及文件
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数据表下载
文献 (220)
胺PH 等。 RNA干环与上游开放阅读框架共同作用,以指导整合应激反应中的优先翻译。 生物化学杂志 299:102864 (2023). 公共医学:36596357 孟S 等。 CircAXL敲除通过释放miR-1306-5p抑制PDE4A减轻Aβ1-42诱导的阿尔茨海默病神经毒性。 神经化学研究 47:1707-1720 (2022). 公共医学:35229272 费Z 等。 孟鲁司特通过减轻内质网(ER)应激和核苷酸寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)活化,改善培美曲塞诱导的肝细胞毒性。 生物工程 13:7894-7903 (2022). 公共医学:35291928 采煤机RF 等。 K27连接的泛素化促进p97底物处理,对细胞增殖至关重要。 欧洲工商管理硕士J 41:e110145(2022)。 公共医学:35349166 曹J 等。 Glauocalyxin A通过抑制STAT3信号传导,减轻脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞炎症和凋亡以及通透性损伤。 实验治疗学 23:313(2022)。 公共医学:35369532