主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR28410-45]抗β-连环蛋白(磷酸化S675) 适用于:IP、IHC-P、IHC-Fr、Dot-blot、WB 反应对象:小鼠、大鼠、人类
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR28410-45]转β-连环蛋白(磷酸化S675) -
宿主 兔子 -
特异性 在western blot中,我们在一些正常结肠组织样本中观察到约55KDa的低Mw带。 我们欢迎在组织中使用这种抗体的客户的任何反馈。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 该产品由以下免疫原制成: 合成肽。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 合成肽。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 -
阳性对照 WB:未处理的SK-N-MC、用100µM forskolin处理30分钟的SK-N-MC、小鼠结肠(未处理的膜)、大鼠肝脏(未处理膜)、小鼠大脑、小鼠肝脏和小鼠睾丸裂解物。 IHC-P:人类结肠、人类乳腺癌、小鼠结肠、小鼠乳腺癌和大鼠结肠组织。 IHC-Fr:小鼠结肠组织。 IP:SK-N-MC和小鼠脑细胞。 斑点印迹法:β-连环蛋白(磷酸化S675)肽a,β-连环素(磷酸化S675)肽b。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油、甘油)、59%PBS、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR28410-45型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 典型Wnt信号通路的关键下游成分。 在缺乏Wnt的情况下,与AXIN1、AXIN2、APC、CSNK1A1和GSK3B形成复合物,促进N末端Ser和Thr残基的磷酸化,并通过BTRC泛素化CTNNB1,随后被蛋白酶体降解。 在Wnt配体的存在下,CTNNB1不是泛素化的,而是聚集在细胞核中,在细胞核中充当TCF/LEF家族转录因子的辅激活剂,从而激活Wnt应答基因。 参与细胞粘附的调节。 大多数β-catenin定位于细胞膜,是E-cadherin/catenin粘附复合物的一部分,拟将钙粘蛋白偶联到肌动蛋白细胞骨架。 -
组织特异性 表达于几种毛囊细胞类型:基底和外周基质细胞,以及内外根鞘细胞。 以冒号表示。 -
疾病相关 CTNNB1缺陷与结直肠癌(CRC)相关[MIM:114500]。 注:CTNNB1的激活突变具有致癌活性,导致肿瘤发展。 体细胞突变存在于各种肿瘤类型中,包括结肠癌、卵巢癌和前列腺癌、肝母细胞瘤(HB)、肝细胞癌(HCC)。 乙肝是一种恶性胚胎性肿瘤,主要影响生命最初三年的幼儿。 CTNNB1缺陷是毛瘤(PTR)的原因[MIM:132600]; 一种常见的良性皮肤肿瘤。 CTNNB1缺陷是髓母细胞瘤(MDB)的原因[MIM:155255]。 MDB是一种恶性的、侵袭性的小脑胚胎性肿瘤,在儿童中最常见。 CTNNB1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常无症状,即使是晚期疾病,其公认的症状和体征也是模糊的。 因此,大多数患者被诊断患有晚期疾病。 注=涉及CTNNB1的染色体畸变见于涎腺多形性腺瘤,这是涎腺最常见的良性上皮肿瘤。 用PLAG1易位t(3;8)(p21;q12)。 -
序列相似性 属于beta-catenin家族。 包含12个ARM重复。 -
翻译后修饰 GSK3B的磷酸化需要另一激酶预先磷酸化Ser-45。 然后,磷酸化从Thr-41进行到Ser-37和Ser-33。 EGF刺激酪氨酸磷酸化。 Tyr-654上的磷酸化降低CDH1结合并增强TBP结合。 当GSK3B磷酸化时,SCF(BTRC)E3连接酶复合物泛素化,导致其降解。 被包含UBE2D1、SIAH1、CACYBP/SIP、SKP1、APC和TBL1X的E3泛素连接酶复合物泛素化,导致其随后的蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞质>细胞骨架。 细胞连接>粘附连接。 细胞连接。 细胞膜。 当其不稳定(高水平磷酸化)或与CDH1结合时为细胞质。 当其稳定时转移到细胞核(低水平磷酸化)。 与GLIS2和MUC1的相互作用促进核移位。 与EMD的相互作用抑制核定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1499 人类 Entrez基因: 12387 鼠标 Entrez基因: 84353 老鼠 Omim公司: 116806 人类 瑞士保护银行: 第35222页 人类 瑞士保护银行: 企02248 鼠标 瑞士保护银行: Q9WU82号机组 老鼠 尤尼金: 476018 人类
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姓名 b-连环蛋白抗体 β连环蛋白抗体 β-连环蛋白抗体
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图片
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所有车道: 抗β-连环蛋白(磷酸化S675)抗体[EPR28410-45](ab314450),稀释度为1/1000 车道1: 未处理的SK-N-MC(人脑上皮细胞)全细胞裂解物(未处理的膜) 车道2: SK-N-MC用100μM毛喉素处理30分钟全细胞裂解物(未处理的膜) 3号车道: 未处理的SK-N-MC(人脑上皮细胞)全细胞裂解物(碱性磷酸酶处理膜) 车道4: 用100 uM forskolin处理SK-N-MC 30分钟的全细胞裂解液(碱性磷酸酶处理膜) 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 观察到的频带大小: 85,90千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 36 kDa(可能的负载控制) 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID:30806153)。 在Western blot中,抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )1/200000稀释液染色。 在Western blot中,抗β-连环蛋白抗体-总蛋白对照( 约32572 )1/1000稀释液染色。 -
所有车道: 抗β-连环蛋白(磷酸化S675)抗体[EPR28410-45](ab314450),稀释度为1/1000 车道1: 小鼠结肠组织裂解物(未经处理的膜) 车道2: 大鼠肝组织裂解物(未处理的膜) 3号车道: 小鼠结肠组织裂解物(碱性磷酸酶处理膜) 车道4: 大鼠肝组织裂解物(碱性磷酸酶处理膜) 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 观察到的频带大小: 85,90千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 36 kDa(可能的负载控制) 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 在Western blot中,抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )1/200000稀释液染色。 在Western blot中,抗β-连环蛋白抗体-总蛋白对照( 约32572 )1/1000稀释液染色。 -
所有车道: 抗β-连环蛋白(磷酸化S675)抗体[EPR28410-45](ab314450),稀释度为1/1000 车道1: 小鼠脑组织裂解物 车道2: 小鼠肝组织裂解物 3号车道: 小鼠睾丸组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 观察到的频带大小: 90千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 36 kDa(可能的负载控制) 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 新鲜制备裂解液并立即用于蛋白质印迹,以尽量减少蛋白质降解。 泳道2中约37kDa的较低MW波段的身份是未知的。 在Western blot中,抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )1/200000稀释液染色。 -
用ab314450在1/2000(0.249 ug/ml)稀释度下对石蜡包埋的小鼠乳腺癌组织标记β-连环蛋白(磷酸化S675)进行免疫组织化学分析,然后使用现成的兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 ). 不经碱性磷酸酶处理的(A)小鼠乳腺癌的膜染色; 碱性磷酸酶处理的(B)小鼠乳腺癌无染色。 该切片在室温下与ab314450孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种现成的兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 ). 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
4%PFA固定、0.2%Triton X-100渗透冷冻小鼠结肠(新鲜冷冻)组织标记β-连环蛋白(磷酸化S675)的免疫组织化学分析,在1/500(0.994 ug/ml)稀释条件下使用ab314450,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000 2 ug/mL稀释液(绿色)预吸附。 共聚焦图像显示小鼠结肠呈阳性染色,而磷酸酶处理后小鼠结肠几乎没有染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 将切片与ab314450在室温下孵育60分钟。 然后使用Fluoromount®安装节段。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 核染色为DAPI(蓝色)。 二级抗体控制:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000 2 ug/mL稀释液预吸附。 -
β-连环蛋白(磷酸化S675)从0.35 mg SK-N-MC(人脑上皮细胞)中免疫沉淀,用100µM forskolin处理30分钟,用ab314450以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)的全细胞裂解液。 使用ab314450在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000的稀释度使用。 通道1:SK-N-MC(人脑上皮细胞)用100µM forskolin处理30分钟全细胞裂解液 通道2:SK-N-MC(人脑上皮细胞)中的ab314450 IP用100µM forskolin处理30分钟全细胞裂解液 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )用100µM forskolin处理30分钟的SK-N-MC中的ab314450代替全细胞裂解液 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:15秒。 -
采用1:1000(0.497 ug/ml)的ab314450和山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合物进行β-连环蛋白(磷酸化S675)的斑点杂交分析( ab97051型 )以1:1000(0.497微克/毫升)稀释。 曝光时间:180秒。 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
使用ab314450以1:1000(0.497 ug/ml)进行β-儿茶素(磷酸化S675)的斑点印迹分析,然后使用山羊抗兔IgG(H+L),过氧化物酶偶联( ab97051型 )1:1000(0.497 ug/ml)稀释。 曝光时间:180秒。 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 该抗体不会与γ-连环蛋白(磷酸化S665)发生交叉反应。
实验方案
数据表及文件
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