主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆[EPR16572]至ATG4B 适用于:WB、IP 敲除已验证 反应对象:大鼠、人
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR16572]至ATG4B -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:293T、Ramos、HeLa、Jurkat和PC-12全细胞裂解物; 大鼠脑裂解物。 IP:Jurkat和Ramos全细胞裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR16572型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物
应用
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靶标
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功能 自噬所需的半胱氨酸蛋白酶,可裂解MAP1LC3、GABARAPL2或GABARAP的C末端部分,从而释放I型。I型亚群随后转化为较小的形式(II型)。 具有C末端甘氨酸的形式II被认为是磷脂酰乙醇胺(PE)共轭形式,具有与自噬体结合的能力。 -
组织特异性 主要表达于骨骼肌,其次为脑、心脏、肝脏和胰腺。 -
序列相似性 属于肽酶C54家族。 -
细胞定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 APG4自噬4同源B抗体 APG4B抗体 ATG4自噬相关4同源物B(酿酒酵母)抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-ATG4B抗体[EPR16572](ab199537) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: ATG4B敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 47千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在47 kDa下观察到ab199537。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 Western blot显示ab199537与野生型HeLa细胞中的ATG4B反应,在ATG4B敲除细胞系中观察到信号丢失 约265814 (ATG4B敲除细胞裂解物 ab257364号 ). 对野生型和ATG4B敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在与ab199537和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2: ATG4B敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa细胞裂解物(20µg) 4号车道 :Jurkat细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在44 kDa下观察到ab199537。 红色-装载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 当使用ATG4B敲除样品时,ab199537显示与ATG4B特异性反应。 野生型和ATG4B敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab199537和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-ATG4B抗体[EPR16572](ab199537) 车道1: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: Ramos(人Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解物 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: Jurkat(来自外周血的人T细胞白血病细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 44千帕 暴露时间: 1分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-ATG4B抗体[EPR16572](ab199537) 车道1: 大鼠脑组织裂解物 车道2: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 44千帕 暴露时间: 1分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
从1mg Jurkat(人外周血T细胞白血病细胞)全细胞裂解液中用ab199537以1/50的稀释度免疫沉淀ATG4B。 用抗体199537在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行蛋白质印迹。 抗抗体IgG(HRP)是针对非还原型IgG的,以1/1500稀释度作为二级抗体。 通道1:Jurkat全细胞裂解液10ug(输入)。 通道2:ab199537 IP in Jurkat全细胞裂解液。 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是在Jurkat全细胞裂解液中的ab199537。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3分钟。 -
从1mg Ramos(人Burkitt淋巴瘤细胞系)全细胞裂解液中用ab199537以1/60的稀释度免疫沉淀ATG4B。 使用ab199537在1/500稀释度下对免疫沉淀物进行Western blot(A组)或 约154843 在1/500稀释度下(面板B)。 抗抗体IgG(HRP)是针对非还原型IgG的,以1/1500稀释度作为二级抗体。 通道1:Ramos全细胞裂解液10ug(输入)。 通道2:ab199537 IP在Ramos全细胞裂解液中。 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是在Ramos中的ab199537全细胞裂解液。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:面板A和B 30秒。
实验方案
数据表及文件
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