主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 AMPKβ1单克隆兔[Y367] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、IP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
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相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [Y367]至AMPKβ1 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 人AMPKβ1 aa 150-250内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: Q9Y478号 -
阳性对照 HEK293全细胞裂解物( 约7902 )可作为WB中的阳性对照。 NIH 3T3、HeLa、A431和PC12、MCF-7细胞裂解物。 人肺癌组织。
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常规说明 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 Y367年 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 AMP-activated protein kinase(AMPK)的非催化亚单位,是一种在调节细胞能量代谢中起关键作用的能量传感器蛋白激酶。 为了应对细胞内ATP水平的降低,AMPK激活能量生成途径并抑制能量消耗过程:抑制蛋白质、碳水化合物和脂质的生物合成以及细胞生长和增殖。 AMPK通过代谢酶的直接磷酸化发挥作用,通过转录调节物的磷酸化发挥长期作用。 还通过重塑肌动蛋白细胞骨架来调节细胞极性; 可能是通过间接激活肌球蛋白。 β-非催化亚单位作为AMPK复合物组装的支架,通过连接α(PRKAA1或PRKAA2)和γ亚单位(PRKAG1、PRKAG2或PRKAG3)的C末端。 -
序列相似性 属于5'-AMP活化蛋白激酶β亚单位家族。 -
结构域 糖原结合域可能将AMPK靶向糖原,因此其他因素如糖原结合脱支酶或蛋白磷酸酶可以直接影响AMPK活性。 -
翻译后修饰 与催化亚单位(PRKAA1或PRKAA2)相关时发生磷酸化。 ULK1磷酸化; 导致对AMPK活性的负调节,并表明ULK1和AMPK之间存在调节反馈回路。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5564 人类 Entrez基因: 19079 鼠标 Entrez基因: 83803 老鼠 Omim公司: 602740 人类 瑞士保护银行: Q9Y478号 人类 瑞士保护银行: Q9R078型 鼠标 瑞士保护银行: 第80386页 老鼠 尤尼金: 726001 人类
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别名 1300015D22Rik抗体 5’’-AMP活化蛋白激酶亚单位β-1抗体 5'-AMP活化蛋白激酶β-1亚单位抗体
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图片
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用1:1000稀释(0.85μg/ml)的纯化ab32112标记AMPKβ1的人膀胱癌组织切片进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 以PBS代替一抗作为阴性对照。 -
所有车道: 抗AMPKβ1抗体[Y367](ab32112),1/5000稀释(纯化) 车道1: 小鼠脑裂解物 车道2: 大鼠脑裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 30千Da 观察到的频带大小: 38千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
用纯化的ab32112在1/800稀释度(1 ug/ml)(红色)下标记AMPKβ1的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析。 用80%甲醇固定细胞。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)二级抗体以1/2000稀释度使用。 同种型对照-0.1%吐温-20。 未标记对照-兔单克隆IgG(黑色)。 -
1/20000稀释(纯化)的抗AMPKβ1抗体[Y367](ab32112)+20µg的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 30千Da 观察到的频带大小: 38千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗AMPKβ1抗体[Y367](ab32112),1/5000稀释(纯化) 车道1: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 车道2: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 30千Da 观察到的频带大小: 38千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
车道1: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2: AMPKβ1敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 车道4: A431细胞裂解物 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在38 kDa下观察到未净化的ab32112。 红色-装载控制, 约18058 ,在124 kDa时观察到。 当使用AMPKβ1敲除样品时,未纯化的ab32112被证明与AMPK beta 1特异性反应。 对野生型和AMPKβ1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32112和 约18058 (文丘林负荷控制)均稀释1/10000并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )在成像前在室温下以1/10000稀释1小时的二次抗体。 -
用1:1000稀释(0.85μg/ml)的纯化ab32112标记AMPKβ1的人结肠组织切片进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 以PBS代替一抗作为阴性对照。 -
所有车道: 抗AMPKβ1抗体[Y367](ab32112),1/5000稀释(未净化) 车道1: (A) :NIH 3T3。 车道2: (B) :希拉。 3号车道: (C) :A431。 车道4: (D) :PC-12。 预测的带宽大小: 30千Da 观察到的频带大小: 38千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
MCF-7细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析,用1/500纯化的ab32112标记AMPKβ1。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%tritonX-100渗透。 Alexa Fluor®488-共轭山羊抗兔IgG( 约150077 )以1/1000稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 仅二级对照:用PBS代替一级抗体作为阴性对照。 -
使用免疫组织化学石蜡包埋组织对人类肺癌中未纯化的ab32112进行1:100稀释染色AMPKβ1。 -
重叠直方图显示HeLa细胞被未净化的32112(红线)染色。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32112,1/100稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%多聚甲醛(10分钟)固定/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的HeLa细胞中发出阳性信号。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (10)
Yu F公司 等。 SQSTM1/p62通过调节AKT/AMPK/mTOR信号通路促进乳头状甲状腺癌细胞生长并触发自噬。 前Oncol 11:638701 (2021). 公共医学:33937040 马尔多纳多M 等。 在小鼠模型中,热量限制前高热量饮食背景对骨骼肌的影响。 老龄化(纽约州奥尔巴尼市) 13:16834-16858 (2021). 公共医学:34166224 李浩 等。 以circ-CUX1/EWSR1/MAZ轴为治疗靶点抑制糖酵解和神经母细胞瘤进展。 EMBO分子医学 11:e10835(2019)。 公共医学:31709724 西科尔斯基K 等。 用于抗体验证的高通量管道。 Nat方法 15:909-912 (2018). 公共医学:30377371 尼奥佩克K 等。 肝脏GAbp-AMPK轴将炎症信号与系统性血管损伤联系起来。 单元格代表 20:1422-1434 (2017). 公共医学:28793265 阿拉斯加州马迪拉朱 等。 精氨酸琥珀酸合成酶调节肝脏AMPK,将蛋白质分解代谢和尿素生成与肝脏脂质代谢联系起来。 美国国家科学院程序 113:E3423-30(2016)。 公共医学:27247419 扎姆科N 等。 AMPKβ1缺失降低食欲,防止肥胖和肝胰岛素抵抗。 生物化学杂志 285:115-22 (2010). 公共医学:19892703 本达扬M 等。 免疫电子显微镜原位显示AMP活化蛋白激酶亚基与糖原颗粒的关联。 组织化学与细胞化学杂志 57:963-71 (2009). 公共医学:19581628 Lessard SJ公司 等。 骨骼肌β-肾上腺素能激活和脂解受损与低内在运动能力大鼠的全身胰岛素抵抗有关。 内分泌学 150:4883-91 (2009). 公共医学:19819977 安德森KA 等。 下丘脑CaMK2有助于调节能量平衡。 单元格元 7:377-88 (2008). 公共医学:18460329