概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 治疗: 人IL-6敲除A549细胞裂解物-布雷费尔丁A(5µg/ml,6h) 人类野生型A549细胞裂解物-布雷费尔丁A(5µg/ml,6h) 人IL-6敲除A549细胞裂解物-IL-1(20 ng/ml,24h)和Brefeldin A(5µg/ml,在IL-1治疗的最后6h) 人类野生型A549细胞裂解物-IL-1(20 ng/ml,24小时)和Brefeldin A(5µg/ml,在IL-1治疗的最后6小时内) -
亲代细胞系 A549型 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:外显子3 97 bp缺失 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算为客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品申请REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 该产品受布罗德研究所和ERS基因组学有限公司的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab277306-人IL6敲除A549细胞裂解物-布雷费尔丁A治疗 1 x 100微克 ab277307-人IL6敲除A549细胞裂解物-IL-1β+布雷费尔丁A治疗 1 x 100微克 ab277309-人类野生型A549细胞裂解物-IL-1β+布雷费尔丁A治疗 1 x 100微克 ab277308-人类野生型A549细胞裂解物-Brefeldin A处理 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 癌症 -
性别 男性
靶标
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功能 具有多种生物功能的细胞因子。 它是急性期反应的有效诱导剂。 在B细胞最终分化为参与淋巴细胞和单核细胞分化的Ig分泌细胞中发挥重要作用。 它诱导骨髓瘤和浆细胞瘤生长,并诱导神经细胞分化作用于B细胞、T细胞、肝细胞、造血祖细胞和CNS细胞。 也可作为肌细胞因子。 它在肌肉收缩后排入血液,并起到增加脂肪分解和改善胰岛素抵抗的作用。 -
疾病相关 IL6的遗传变异与幼年型类风湿关节炎(RASJ)易感性相关[MIM:604302]。 一种炎症性关节病,在16岁之前开始全身发作。 它代表与严重关节外特征和偶尔致命并发症相关的青少年关节炎亚组。 在疾病活跃期,患者表现出典型的每日高烧、消逝性黄斑疹、淋巴结病、肝脾肿大、浆膜炎、肌痛和关节炎。 注:IL6启动子多态性与HIV感染男性发生卡波西肉瘤的终生风险相关。 -
序列相似性 属于IL-6超家族。 -
翻译后修饰 N-和O-糖基化。 -
细胞定位 保密。 -
UniProt提供的信息 -
别名 白细胞介素BSF 2 B细胞分化因子 B细胞刺激因子2
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应用
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图片
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车道1: 野生型A549载体控制IL-1b(0 ng/mL,24 h),布雷费尔丁A(5μg/mL,最后6 h)细胞裂解物30μg 车道2: 野生型A549处理的IL-1b(20 ng/mL,24 h),布雷费尔丁A(5μg/mL,最后6 h)细胞裂解液30μg 3号车道: IL-6敲除物A549车辆控制IL-1b(0 ng/mL,24 h),布雷费尔丁A(5μg/mL,最后6 h)细胞裂解物30μg 车道4: IL-6敲除A549处理的IL-1b(20 ng/mL,24 h),布雷费尔丁A(5μg/mL,最后6 h)细胞裂解液30μg 蛋白质印迹的假彩色图像:1/1000稀释的抗IL-6抗体[EPR22565-204]染色,显示为绿色; 小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 第233551页 显示与IL-6特异性结合。 在野生型A549细胞裂解液中25 kDa处观察到一条带,在IL6敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约273751 (敲除细胞裂解物ab275501)。 为了生成此图像,分析了野生型和IL6敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4℃与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜 ° C.在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
车道1: 野生型A549 Brefeldin A( 约120299 )-处理过的(5ug/ml,4h)细胞裂解物30 ug 车道2: 野生型A549 IL-1β( ab259387号 )(20 ng/ml,24小时)和Brefeldin A( 约120299 )-处理(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解物30 ug 3号车道: IL-6基因敲除物A549 Brefeldin A( 约120299 )-处理过的(5ug/ml,4h)细胞裂解物30 ug 车道4: IL-6敲除物A549 IL-1β( ab259387号 )(20 ng/ml,24小时)和Brefeldin A( 约120299 )-处理(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab233706型 在25 kDa时观察到,在40 kDa可能存在非特异性结合。 红色-加载控制 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 ab233706型 western blot显示与野生型A549细胞中的IL-6反应,在IL-6敲除细胞系中观察到信号丢失 约273751 (敲除细胞裂解物ab275501)。 对野生型和IL-6敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在与孵育之前,将膜封闭在荧光蛋白质印迹(基于TBS)封闭溶液中 ab233706型 和 约7291 (小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释度分别为1/1000和1/2000。将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型A549 Brefeldin A( 约120299 )-处理过的(5ug/ml,4h)细胞裂解物30 ug 车道2: 野生型A549 IL-1β( ab259387号 )(20 ng/ml,24小时)和Brefeldin A( 约120299 )-处理(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解物30 ug 3号车道: IL-6基因敲除物A549 Brefeldin A( 约120299 )-处理过的(5ug/ml,4h)细胞裂解物30 ug 车道4: IL-6敲除物A549 IL-1β( ab259387号 )(20 ng/ml,24小时)和Brefeldin A( 约120299 )-处理(最后4h为5 ug/ml)细胞裂解物30 ug 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约214429 在25 kDa时观察到,在35 kDa可能存在非特异性结合。 红色-加载控制 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 约214429 western blot显示与野生型A549细胞中的IL-6反应,在IL-6敲除细胞系中观察到信号丢失 约273751 (敲除细胞裂解物ab275501)。 对野生型A549和IL-6敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 用荧光蛋白印迹(TBS)封闭溶液封闭膜,然后用 约214429 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因-1:97bp外显子3缺失。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
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