概述
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产品名称 -
生产商 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲本细胞系 赫拉 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9、外显子2 1 bp缺失和外显子2中插入选择盒实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab255469-人类BAX敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255552-人类野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
靶标
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功能 通过结合和拮抗凋亡抑制因子BCL2或其腺病毒同源物E1B 19k蛋白,加速程序性细胞死亡。 在应激条件下,发生构象变化,导致线粒体膜移位,导致细胞色素c释放,进而触发细胞凋亡。 促进CASP3的激活,从而促进细胞凋亡。 -
组织特异性 在多种组织中表达。 在胶质瘤中发现了等形Psi。 同工酶α在脾脏、乳房、卵巢、睾丸、结肠和大脑中表达,在皮肤和肺中表达水平较低。 同构西格玛在脾脏、乳房、卵巢、睾丸、肺、结肠、大脑中表达,在皮肤中表达水平较低。 在原粒细胞白血病、组织细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、淋巴母细胞白血病、乳腺癌、卵巢腺癌、前列腺癌、前列腺腺癌、肺癌、表皮样癌、小细胞肺癌和结肠腺癌细胞系中表达同构型α和同构型西格玛。 -
美国 属于Bcl-2家族。 -
结构域 完整的BH3基序是BIK、BID、BAK、BAD和BAX促凋亡活性及其与Bcl-2家族抗凋亡成员的相互作用所必需的。 -
细胞定位 细胞质和线粒体膜。 细胞质。 细胞质中含有14-3-3蛋白。 在应激条件下,它发生构象变化,导致JNK磷酸化的14-3-3蛋白释放并易位到线粒体膜。 -
UniProt提供的信息 -
别名 凋亡调节剂BAX 行李 Bax蛋白
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应用
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图片
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车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: BAX敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约182734 在21 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 约182734 western blot显示重组抗-Bax抗体[EPR18284与野生型HeLa细胞中的Bax特异性反应。敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255363型 使用敲除细胞裂解物ab263841。 对野生型和BAX基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约182734 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° C分别为1000稀释度和20000稀释度的1。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: BAX敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab32503标准 在21 kDa时观察到。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 ab32503标准 western blot显示重组抗-Bax抗体[E63]与野生型HeLa细胞中的Bax特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255363型 使用敲除细胞裂解物ab263841。 对野生型和BAX基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab32503标准 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° C分别为1000稀释度和20000稀释度的1。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:第2外显子1 bp缺失 -
等位基因2:选择盒插入外显子2
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载