概述
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产品名称 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9,外显子2中1 bp缺失和外显子2中插入选择盒实现敲除 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
经测试应用 -
生物安全等级 2 -
常规说明 建议控制: 人野生型HeLa细胞系( 约255448 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬浮液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)洗涤小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 子宫颈 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10 -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
新冠肺炎疫苗
靶标
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功能 通过结合和拮抗凋亡抑制因子BCL2或其腺病毒同源物E1B 19k蛋白,加速程序性细胞死亡。 在应激条件下,发生构象变化,导致线粒体膜移位,导致细胞色素c释放,进而触发细胞凋亡。 促进CASP3的激活,从而促进细胞凋亡。 -
组织特异性 在多种组织中表达。 在胶质瘤中发现了等形Psi。 同工酶α在脾脏、乳房、卵巢、睾丸、结肠和大脑中表达,在皮肤和肺中表达水平较低。 同构西格玛在脾脏、乳房、卵巢、睾丸、肺、结肠、大脑中表达,在皮肤中表达水平较低。 在原粒细胞白血病、组织细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、淋巴母细胞白血病、乳腺癌、卵巢腺癌、前列腺癌、前列腺腺癌、肺癌、表皮样癌、小细胞肺癌和结肠腺癌细胞系中表达同构型α和同构型西格玛。 -
序列相似性 属于Bcl-2家族。 -
结构域 完整的BH3基序是BIK、BID、BAK、BAD和BAX促凋亡活性及其与Bcl-2家族抗凋亡成员的相互作用所必需的。 -
细胞定位 细胞质和线粒体膜。 细胞质。 细胞质中含有14-3-3蛋白。 在应激条件下,发生构象变化,导致JNK-磷酸化14-3-3蛋白释放并移位到线粒体膜。 -
UniProt提供的信息
应用
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图片
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所有车道: 抗-Bax抗体[EPR18284]( 约182734 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: BAX敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约182734 在21 kDa时观察到。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 约182734 western blot显示与野生型HeLa细胞中的BAX反应。 敲除细胞系ab255363(敲除细胞裂解物 约263841 )已使用。 对野生型HeLa和BAX敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约182734 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-Bax抗体[E63]( ab32503标准 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: BAX敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab32503标准 在21 kDa时观察到。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 ab32503标准 western blot显示与野生型HeLa细胞中的BAX反应。 敲除细胞系ab255363(敲除细胞裂解物 约263841 )已使用。 对野生型HeLa和BAX敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab32503标准 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
等位基因1:第2外显子1 bp缺失。 -
等位基因-2:在外显子2中插入选择盒。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载