(美国)
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产品名称 -
亲代细胞系 A431型 -
有机体 人类 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 西部印迹(WB) -
经测试应用 -
生物安全水平 1 -
常规说明 建议控制: 人野生型A-431细胞系( 约275462 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表最低推荐稀释度。 20 mL表示建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞计数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 皮肤 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 表皮样癌 -
性别 女性 -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
中国 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶标
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功能 促进GTP交换Ras-bound GDP。 -
组织特异性 在牙龈组织中表达。 -
疾病相关 SOS1缺陷是牙龈纤维瘤病1(GGF1)的病因[MIM:135300]; 也称为GINGF1。 牙龈纤维瘤病是一种罕见的过度生长疾病,其特征是上颌和下颌角化牙龈的良性、缓慢进行、非出血性纤维增大。 GGF1通常以常染色体显性性状传播,尽管散发病例很常见。 SOS1缺陷是努南综合征4型(NS4)的病因[MIM:610733]。 NS4是一种常染色体显性遗传疾病,其特征是面部特征畸形、身材矮小、肥大、心脏异常、耳聋、运动迟缓和出血素质。 这是一种遗传异质性和相对常见的综合征,估计每1000-2500名活产婴儿中就有1例发生。 NS4很少与青少年粒单细胞白血病(JMML)相关。 SOS1突变导致肺动脉瓣疾病的高发病率; 房间隔缺损不太常见。 -
序列相似性 包含1个DH(DBL同源)域。 包含1个N端Ras-GEF域。 包含1个PH域。 包含1个Ras-GEF域。 -
UniProt提供的信息
应用
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图片
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所有车道: 抗-SOS1抗体[EPR7480]( ab140621型 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: SOS1敲除A431细胞裂解物 3号车道: HEK-293细胞裂解物 车道4: SK-OV-3细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 171千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:稀释1/1000的抗-SOS1抗体[EPR7480]染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, ab140621型 显示与SOS1特异性结合。 在野生型A431细胞裂解液中171kDa处观察到一条带,在SOS1敲除细胞系ab276087(敲除细胞裂解液 ab283833号 ). 为了生成此图像,分析了野生型和SOS1敲除A431细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗-SOS1抗体( 约245645 )稀释1/2000 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: SOS1敲除A431细胞裂解物 3号车道: HEK-293细胞裂解物 车道4: SK-OV-3细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的频带大小: 171千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:稀释1/2000的抗-SOS1抗体染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约245645 显示与SOS1特异结合。 在野生型A431细胞裂解液中171kDa处观察到一条带,在SOS1敲除细胞系ab276087(敲除细胞裂解液 ab283833号 ). 为了生成此图像,分析了野生型和SOS1敲除A431细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。
数据表及文件
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