概述
-
产品名称 -
亲代细胞系 A549型 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现基因敲除,第5外显子16 bp缺失,第5内显子2 bp缺失,以及第5外隐子5 5 bp缺失和第5外显子7 bp插入 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
经测试应用 -
生物安全水平 1 -
常规说明 建议控制: 人野生型A549细胞系( 约255450 ). 请注意,剔除细胞株订单中不会自动包含野生型细胞株,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1免费添加推荐的野生型细胞系。 冷冻保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: F-12K+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬浮液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)洗涤小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 三 -1x10个 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞数。 引导播种密度为6x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。 不要超过7x10 4 细胞/厘米 2 .
本产品受The Broad Institute、ERS Genomics limited和Sigma-Aldrich Co.LLC的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关许可证和专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
-
单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 肺 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 癌 -
性别 男性 -
STR分析 Amelogenin X、Y D5S818:11 D13S317:11号文件 D7S820:8、11 D16S539:11、12 vWA:14个 TH01:8、9.3 TPOX:8、11 CSF1PO:10、12 -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶标
-
功能 在淋巴细胞的细胞毒性颗粒胞吐中起作用。 免疫突触的颗粒成熟、颗粒对接和启动都需要。 -
组织特异性 除大脑外,在所有被检查的组织中都有发现。 胸腺、肾脏、肌肉和胎盘低表达。 在黑素细胞和大多数检测的肿瘤细胞系中检测到。 在细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和肥大细胞中表达。 -
疾病相关 RAB27A缺陷是2型格里斯切利综合征(GS2)的病因[MIM:607624]。 Griscelli综合征是一种罕见的常染色体隐性遗传病,可导致皮肤和头发的色素稀释,发干中出现大量色素团,黑素细胞中积聚黑素体。 GS2患者还出现了一种失控的T淋巴细胞和巨噬细胞激活综合征,称为噬血细胞综合征,在没有骨髓移植的情况下导致死亡。 一些患者存在神经损伤,可能是噬血细胞综合征的结果。 -
序列相似性 属于小GTPase超家族。 拉布家族。 -
细胞定位 膜。 褪黑激素组。 晚期内体。 溶酶体。 通过质谱鉴定第一阶段至第四阶段的黑素体部分。定位于胞内外囊泡。 -
UniProt提供的信息
相关产品
-
KO细胞裂解物
应用
|
|
图片
-
等位基因1:第5外显子16 bp缺失 -
所有车道: 稀释1/1000的抗RAB27A抗体 所有车道: RAB27A敲除A549细胞裂解物 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 25千Da 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 25 kDa时观察到绿色抗RAB27A抗体。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 Western blot显示,抗RAB27A抗体在野生型A549细胞中与RAB27A反应,在RAB27A-敲除细胞系ab266921(RAB27A-敲除的细胞裂解物)中观察到信号丢失 约258618 ). 对野生型A549和RAB27A敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在与抗RAB27A抗体和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。 -
等位基因2:第5外显子5 bp缺失。 -
等位基因3:第5外显子2 bp缺失。
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载