概述
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产品名称 人 H1F0敲除A-431细胞系 -
亲代细胞系 A431型 -
有机体 人类 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 下一代测序(NGS),Western Blot(WB) -
经测试应用 -
生物安全等级 1 -
常规说明 建议控制: 人野生型A-431细胞系( ab263975年 ). 请注意,野生型细胞系不会自动包含在敲除细胞系订单中,如果需要,请使用代码WILDTYPE-TMTK1添加推荐的野生型细胞系,无需额外费用。 低温保存细胞培养基: 细胞冷冻介质-DMSO无血清培养基,在补充甲基纤维素的MEM中含有8.7%的DMSO。 培养基: DMEM(高糖)+10%FBS 初始处理指南: 到达后,小瓶应储存在液氮气相中,而不是-80°C。 在-80°C下储存可能会导致生存能力丧失。 1.在37°C水浴中解冻小瓶约1-2分钟。 2.将细胞悬液(0.8 mL)转移到含有8.4 mL预热培养基的15 mL/50 mL锥形无菌聚丙烯离心管中,用额外的0.8 mL培养基(总体积10 mL)清洗小瓶以收集剩余细胞,并在室温下以201 x g(rcf)离心5分钟。 10 mL代表建议的最小稀释度。 20 mL代表建议的最大稀释度。 3.将细胞颗粒重新悬浮在5 mL预热培养基中,并使用血细胞仪或其他细胞计数方法进行计数。 根据细胞计数,将种子细胞置于密度为2x10的适当细胞培养瓶中 4 细胞/厘米 2 。播种密度仅供参考,应根据各个实验室的时间表进行调整。 4.在37°C培养箱中用5%CO培养 2 。应每天监测培养物。 亚文化指南: 所有播种密度应基于通过既定方法获得的细胞计数。 引导播种密度为2x10 4 细胞/厘米 2 建议使用。 如果需要,在继代培养前24小时更换部分培养基可能有助于促进生长。 当细胞达到80-90%的汇合时,应进行传代。
本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . 我们将提供复苏时增殖的活细胞。
性能
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单元格数量 1 x 10 6 细胞/小瓶,1 mL -
粘附/悬浮 粘附剂 -
组织 皮肤 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 表皮样癌 -
性别 女性 -
无支原体 是的 -
存放说明 采用干冰运输。 储存在液氮中。 -
存储溶液 成分:8.7%二甲基亚砜、2%纤维素、甲醚 -
研究领域
靶标
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功能 组蛋白H1是核小体链凝聚成高阶结构所必需的。 H1F0组蛋白存在于处于分化末期或细胞分裂率低的细胞中。 -
序列相似性 属于组蛋白H1/H5家族。 包含1个H15(连接蛋白组蛋白H1/H5球状)结构域。 -
翻译后修饰 RNA编辑版本中Ser-17磷酸化。 -
细胞定位 核心。 染色体。 RNA编辑的版本已经局限于核斑点。 在有丝分裂期间,它出现在浓缩染色体附近。 -
UniProt提供的信息
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KO细胞裂解物 -
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应用
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图片
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所有车道: 抗-Histone H1.0抗体[27]( ab11080磅 )稀释1/500 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: H1F0敲除A431细胞裂解物 3号车道: MCF7(人乳腺癌细胞系)全细胞裂解物 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab11080磅 在30 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])。 ab11080磅 Western blot显示与野生型A-431细胞中的组蛋白H1反应,在H1F0敲除细胞系ab262478(敲除细胞裂解物 约263919 ). 对野生型A-431和H1F0敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 ab11080磅 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])分别以1/500和1/20000稀释度在4°C下过夜。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-Histone H1.0抗体[34]( 约11079 )稀释1/500 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: H1F0敲除A431细胞裂解物 3号车道: MCF7(人乳腺癌细胞系)全细胞裂解物 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约11079 在30 kDa时观察到。 红色-加载控制 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])。 约11079 在野生型A-431细胞中与组蛋白H1反应,在H1F0敲除细胞系ab262478中观察到信号丢失(敲除细胞裂解物 约263919 ). 对野生型A-431和H1F0敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 约11079 和 约52866 (兔抗α-管蛋白抗体[EP1332Y])分别以1/500和1/20000稀释度在4°C下过夜。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-Histone H1.0抗体[EPR6536]( 约134914 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: H1F0敲除A431细胞裂解物 3号车道: HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约134914 在30 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 约134914 Western blot显示与野生型A-431细胞中的组蛋白H1.0反应。 当H1F0敲除细胞株ab262478(敲除细胞裂解物 约263919 )已使用。 对野生型和H1F0 A-431敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 约134914 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。 -
所有车道: 抗-Histone H1.0抗体[EPR6537]( ab125027号 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 车道2: H1F0敲除物A431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- ab125027号 在33 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-管蛋白[DM1A]。 ab125027号 Western blot显示与野生型A-431细胞中的H1F0反应。当H1F0敲除细胞系ab262478(敲除细胞裂解物 约263919 )已使用。 对野生型A-431和H1F0敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )孵育前 ab125027号 和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )在成像前在室温下以1/2000稀释1小时的二次抗体。
数据表及文件
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