主要功能和细节
分析类型:定量 检测方法:荧光法 平台:缩微板阅读器 测定时间:30分钟 样品类型:细胞裂解液、血浆、血清、组织提取物、尿液 灵敏度:10 nM
概述
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产品名称 -
检测方法 荧光 -
样品类型 尿液、血清、血浆、组织提取物、细胞裂解液 -
检测类型 定量 -
灵敏度 10毫微米 -
检测时间 0小时 3000万 -
产品概述 GSH/GSSG比值检测试剂盒(荧光-绿色)(ab138881)提供了一种超灵敏的分析方法,用于定量哺乳动物样品中的谷胱甘肽。
注: 我们建议使用替代试剂盒 GSH/GSSG比值检测试剂盒II(荧光-绿色)(ab205811) ,而不是此套件。 约205811 是该试剂盒的重新配方版本,具有类似的性能。 它使用水溶性探针,比该试剂盒中使用的DMSO-可溶性染料更稳定。
GSH/GSSG分析协议使用专有的非荧光染料,该染料与GSH反应后会产生强荧光。 使用一步荧光法,该分析可以在100µL分析体积中检测到低至1皮摩尔的GSH或GSSG。
该分析可在方便的96孔或384孔微点镀膜形式下进行,并且易于适应自动化,无需分离步骤。 在Ex/Em=490/520 nm时,荧光微孔板阅读器可以很容易地读取其信号。
GSH/GSSG分析方案总结: -向井中添加样品(脱蛋白)和标准品 -对于GSH分析,在分析缓冲液中添加硫醇绿,或者对于总谷胱甘肽(GSH+GSSG)分析,也添加GSSG探针 -在室温下孵育10-60分钟 -用微孔板阅读器分析 GSSG水平可以通过从谷胱甘肽总水平中减去GSH来计算。 -
说明 注:仅用于测量GSH标准,提供的试剂足以进行200次测试。 谷胱甘肽(GSH)是一种含有L-半胱氨酸、L-谷氨酸和甘氨酸的三肽。 它是细胞内最小的细胞内蛋白巯基分子,可防止自由基和过氧化物等活性氧物种对细胞造成损伤。 谷胱甘肽以还原(GSH)和氧化(GSSG)状态存在。 还原型谷胱甘肽(GSH)是一种主要的组织抗氧化剂,为谷胱甘苷过氧化物酶(GPx)催化的脂质氢过氧化物还原为相应的醇和过氧化氢还原为水提供了还原当量。 在GPx催化的反应中,两个GSH分子之间形成二硫键,生成氧化谷胱甘肽(GSSG)。 谷胱甘肽还原酶(GR)通过同时氧化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(β-NADPH2)将GSSG再循环为GSH。 在健康细胞中,>90%的谷胱甘肽总库为还原型(GSH)。 当细胞暴露于氧化应激水平增加时,GSSG积累,GSSG/GSH的比率增加。 GSSG与GSH的比例增加是氧化应激的指示。 -
平台 微孔板阅读器
性能
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存放说明 储存于-20°C。 请参阅协议。 -
组件 100次测试 分析缓冲液 1 x 25毫升 二甲基亚砜 1 x 400微升 GSH标准 1 x 62微克 GSSG探头 1瓶 GSSG标准 1 x 124微克 硫醇绿指示灯 1瓶 -
研究领域 -
相关性 谷胱甘肽是一种由三种氨基酸组成的小肽:半胱氨酸、谷氨酸和甘氨酸,在组织中的浓度高达1毫摩尔。 谷胱甘肽是主要的细胞内低分子量硫醇,在哺乳动物细胞抵抗氧化和亚硝化应激的细胞防御中起着关键作用。 在细胞凋亡的早期阶段已经观察到谷胱甘肽水平下降。 -
别名 谷胱甘肽 GSSG公司
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图片
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测量用150µM TBHP处理1 h(n=6)的肌管中谷胱甘肽的还原(GSH)和氧化(GSSG)形式。 -
在细胞裂解物中测量的还原状态下的谷胱甘肽,显示每1 mln细胞的数量(umol)。 使用浓度为1e7-1e8细胞/mL的样品。 样品稀释10-1000倍。 -
细胞裂解物中测得的总谷胱甘肽,显示每1 mln细胞的数量(umol)。 使用浓度为1e7-1e8细胞/mL的样品。 样品稀释10-1000倍。 -
组织裂解物中测定的还原态谷胱甘肽,显示每毫克测试样品提取蛋白的量(umol)。 样品的蛋白质浓度从6 mg/mL到16 mg/mL不等。样品稀释10-100倍。 -
组织裂解物中测定的总谷胱甘肽,显示每毫克测试样品提取蛋白的数量(umol)。 样品的蛋白质浓度从6 mg/mL到16 mg/mL不等。样品稀释10-100倍。 -
在生物流体中测量的还原态谷胱甘肽,显示测试样品中的浓度(uM)。 人体样本被稀释10倍。 将大鼠样品稀释10-1000倍。 -
生物液中测得的总谷胱甘肽,显示测试样品中的浓度(uM)。 样品稀释10-100倍。 -
用ab138881在96 well黑板上用荧光微孔板阅读器测量GSH总剂量反应。 将50µl GSSG标准品(0.01至5µM)、含有GSH的样品或空白对照品添加到每个孔中,然后添加50µl总GSH反应混合物。 培养30分钟后,在Ex/Em=490/520 nm时测量荧光强度。 -
使用荧光微孔板阅读器在带有ab138881的黑色96 well板中测量降低的GSH剂量反应。 将50µl GSH标准品(0.01至5µM)或空白对照品添加到每个孔中,然后添加50µl GSH含量测定混合物。 培养30分钟后,在Ex/Em=490/520 nm时测量荧光强度。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (120)
林毅(Lin Y) 等。 黄芪甲苷IV通过SIRT1/P53和Akt/GSK3/Nrf2信号通路改善链脲佐菌素诱导的胰腺细胞凋亡和功能障碍。 糖尿病代谢综合征肥胖 15:131-140 (2022). 公共医学:35046684 卢埃林SV 等。 推断金和银工程纳米颗粒对体外不同肺上皮细胞系潜在遗传毒性影响相关的细胞机制。 纳米毒理学 16:52-72 (2022). 公共医学:35085458 吴杰 等。 在胶原诱导的关节炎小鼠模型中,TNF拮抗剂使滑膜成纤维细胞对铁中毒细胞死亡敏感。 国家公社 13:676 (2022). 公共医学:35115492 科尔尼克S 等。 维生素E降低新生低氧血症雪貂器官型脑片模型的细胞毒性并减轻炎症和氧化应激反应。 Dev神经科学 44:233-245 (2022). 公共医学:35134797 王杰 等。 线粒体功能障碍和氧化应激导致FOXP1综合征的认知和运动损伤。 美国国家科学院程序 119:不适用(2022)。 公共医学:35165191