图4
GemC1与Geminin异二聚。(一)His-tagged dGemC1（29-240）和未标记dGeminin（29-209）在大肠杆菌GemC1是总细胞裂解物（lane T）和上清液（lane S）中最好的过表达蛋白。然而，镍净化2+亲和性仅产生近似化学计量比的GemC1–Geminin复合物（车道E）。车道M包含分子量标记（标记单位为kDa）。(b条)显示归一化UV的tGemC1–tGeminin异二聚体的尺寸排除色谱280纳米洗脱曲线（蓝线）。(c（c）)HA-标记的GemC1在U2OS细胞中过度表达，并且能够共同沉淀内源性Geminin，这表明这两种蛋白也在人类细胞中相互作用；在下面板中，灰色星形标记了抗HA免疫沉淀物中存在的IgG大链；上面板中的白色星号标志着一条与双生抗体交叉反应的带。(d日)HA-标记的GemC1在U2OS细胞中过度表达，存在GFP标记的Geminin或缺乏螺旋线圈结构域Geminin的Gemini结构体（1-72），表明Geminin螺旋线圈是U2OS与GemC1相互作用所必需的；灰色的星标志着抗HA中存在的IgG的大链；Geminin（1-72）-GFP下面的未标记带很可能是降解产物。 |
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![[图4]](dw5145fig4.jpg)
