跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2021年6月；25(12):5691-5706.
doi:10.1111/jcmm.16583。 Epub 2021年5月4日。

Krϋppel-like factor 15通过增强P53 SUMO1结合抑制肾小球系膜细胞增殖

吴玲玲 1, 欧利 1, 诸凤阁 1, 徐旺 1, 蒲晨 1, 蔡广彦（Guangyan Cai） 1, 陈香梅 1, 全红 1
附属公司

Krϋppel-like factor 15通过增强P53 SUMO1结合抑制肾小球系膜细胞增殖

吴玲玲等。 细胞与分子医学杂志. 2021年6月.

摘要

系膜细胞（MC）增殖是许多常见人类肾脏疾病的主要病理特征，包括系膜增生性肾炎和糖尿病肾病。了解MC对病理刺激的反应对于理解这些疾病过程至关重要。我们之前确定，抑制MC增殖需要Krϋppel-like factor 15（KLF15），一种富含肾脏的锌指转录因子。在本研究中，我们研究了KLF15调节系膜增殖的直接靶基因及其潜在机制。首先，我们筛选了小泛素相关修饰物1（SUMO1）作为KLF15的直接转录靶点，并通过ChIP-PCR和荧光素酶分析验证了这一发现。此外，我们证明过表达KLF15或SUMO1可增强P53的稳定性，从而阻断人肾MC（HRMC）的细胞周期，从而抑制细胞增殖。相反，敲除HRMC中的SUMO1，即使是那些用KLF15过度表达的细胞，也不能抑制HRMC的增殖率并增加P53的SUMO化。最后，结果表明，在增殖期，抗Thy 1模型大鼠肾皮质SUMOylated P53的水平降低。这些发现揭示了KLF15靶向SUMO1介导MC增殖的关键机制。

关键词：KLF15；系膜细胞增殖；P53；SUMO1。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人确认，不存在利益冲突。

数字

图1
图1
HRMC中KLF15 ChIP‐Seq数据的注释A‐B，2478个筛选基因的GO分析。C、 1315个细胞过程相关基因的GO分析。D、 细胞周期过程相关基因分析结果。E、 生长过程相关基因分析结果
图2
图2
KLF15结合基因的生物信息学分析A、DAVID分析和IPA用于获取1357个SILAC‐LC/MS筛选蛋白的GO结构域。B、 SILAC‐LC/MS数据的IPA确定的前30条信号通路。C、 通过对ChIP‐Seq数据和SILAC‐LC/MS数据的生物信息学分析确定52个基因。D、 HG处理的HRMC中KLF15和SUMO1 mRNA的表达。E、 PDGF-BB处理的HRMC中KLF15和SUMO1 mRNA的表达。HG处理的HRMC中F‐G、KLF15和SUMO1蛋白的表达。PDGF-BB处理的HRMC中的H‐I、KLF15和SUMO1蛋白表达*P（P）＜0.05***P（P）<.01，n=3
图3
图3
KLF15结合位点的基序分析和验证.A，WebLogo使用MEME程序在KLF15 ChIP‐Seq数据中确定的共识KLF15‐绑定主题。B、 KLF15结合的SUMO1启动子的靶区。C、 SUMO1的ChIP‐PCR结果，n=5。D、 双荧光素酶报告分析结果，n=5***P（P） < .01
图4
图4
SUMO1下游信号分子的IPA和验证.A‐C，与SUMO1关联的IPA网络。D、 不同物种的不同P53序列的比对（如图所示）。SUMO酸化共识位点以红色显示。SUMO1过度表达或SUMO1缺失HRMC中的E‐J、SUMO1‐P53、KLF15和SUMO1表达*P（P） < .05, **P（P）<.01，n=3
图5
图5
KLF15过表达和SUMO1过表达均抑制PDGF‐BB诱导的细胞增殖A‐C、HRMC转染对照质粒（VECTOR）或KLF15过表达质粒（KLF15），并与PDGF‐BB孵育。A、 通过IP分析评估SUMO1‐P53和输入（P53）的表达。B、 通过Western blot分析评估KLF15和SUMO1的表达。C、 定量数据。用空载体（vector）或SUMO1过表达质粒（SUMO1）转染D‐F、HRMC，并用PDGF‐BB孵育。D、 通过IP分析评估SUMO1‐P53和输入（P53）的表达。E、 通过Western blot分析评估KLF15和SUMO1的表达。F、 定量数据。G‐H，细胞增殖试验结果。KLF15或SUMO1过度表达抑制PDGF‐BB诱导的细胞增殖*P（P）<0.05，n=3
图6
图6
KLF15通过以下途径抑制MC增殖 增强p53 SUMO1结合A‐C、HRMC转染阴性对照siRNA（SI CON）或SUMO1 siRNA（SISUMO1），并与PDGF‐BB孵育。A、 通过IP分析评估SUMO1‐P53和输入（P53）的表达。B、 通过Western blot分析评估KLF15和SUMO1的表达。C、 定量数据。D‐F，HRMC转染有对照质粒和阴性对照siRNA（VECTOR+SI CON）或SUMO1 siRNA（VECTOR+SI-SUMO1），以及KLF15过表达质粒和阴性控制siRNA（KLF15+SI-CON）或SUMO1 siRNA，并与PDGF-BB孵育。D、 通过IP分析评估SUMO1‐P53和输入（P53）的表达。E、 通过Western blot分析评估KLF15和SUMO1的表达。F、 定量数据。G‐H，细胞增殖试验结果*P（P）<0.05，n=3
图7
图7
SUMO1和P53在抗Thy1大鼠肾小球中的表达.A，定期酸-希夫（PAS）染色结果和PCNA免疫组织化学染色结果。B、 肾小球中PCNA阳性细胞比例的统计结果。肾小球蛋白提取物中C‐D、P53、KLF15和SUMO1的表达。E-F，通过免疫组织化学染色评估肾小球中KLF15和SUMO1的表达*P（P） < .05, ▲P（P） < .01, #P（P）<.01，n=5
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

工具书类

    1. 阿伯德·H。系膜细胞生物学。实验细胞研究2012；318(9):979‐985. 10.1016/j.yexcr.2012.025。-内政部-公共医学
    1. 王杰，张强，李S，等。低分子量褐藻糖胶通过结合纤维连接蛋白和抑制人肾系膜细胞中ECM受体的相互作用缓解糖尿病肾病。国际生物大分子杂志。2020;150:304‐314. 2016年10月10日/j.ijbioc.2020.02.087。-内政部-公共医学
    1. Wright RD、Dimou P、Northey SJ、Beresford MW。系膜细胞是狼疮性肾炎肾小球纤维化损伤的关键因素。《炎症杂志》（伦敦）。2019;16:22. 10.1186/s12950-019-0227-x。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Migliorini A、Ebid R、Scherbaum CR、Anders HJ。肾脏疾病中的危险控制概念：系膜细胞。《肾病杂志》。2013;26(3):437‐449. 10.5301/jn.5000247。-内政部-公共医学
    1. Floege J、Johnson RJ、Gordon K等。系膜增生性肾炎中细胞外基质合成增加。《肾脏国际》1991；40(3):477‐488. 10.1038/ki.1991.235。-内政部-公共医学

出版物类型

MeSH术语