跳到主页面内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2021年4月13日；7(1):24.
doi:10.1038/s41421-021-00258-1。

M1和M2肺泡巨噬细胞对SARS-CoV-2的不同摄取、扩增和释放

吕嘉迪 # 1, 王振峰 # 1, 亚金区 # 2, 华珠 2, 朱强强 1, 魏彤（Wei Tong） 2, 林林宝 2, 齐鲁 2, 纪聪 2, 李丹（Dan Li） 2, 魏登 2, 余斌（Pin Yu） 2, 宋江平 三, 魏敏通 4, 刘江宁 5, 刘玉英 6 7, 秦川 8, 黄波（Bo Huang） 9 10 11
附属公司

M1和M2肺泡巨噬细胞对SARS-CoV-2的不同摄取、扩增和释放

吕嘉迪等。 细胞发现. .

摘要

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型（SARS-CoV-2）侵入肺泡，肺泡巨噬细胞（AM）丰富。AM如何应对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型的侵袭仍然难以捉摸。在这里，我们表明经典活化的M1-AMs促进病毒传播；然而，替代激活的M2 AM限制了传播。M1 AM利用细胞柔软性有效吸收SARS-CoV-2。随后，入侵的病毒接管了溶酶体内系统进行逃逸。M1-AMs具有较低的内体pH值，有利于膜融合，并允许病毒RNA从内体进入细胞质，在细胞质中病毒实现复制并被包装以释放。相反，M2 AM具有较高的内体pH值但较低的溶酶体pH值，从而将病毒传递到溶酶体进行降解。在hACE2转基因小鼠模型中，发现M1 AM促进SARS-CoV-2肺部感染。这些发现揭示了AM在SARS-CoV-2感染过程中的复杂作用，以及潜在的治疗靶点。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1。M1肺泡巨噬细胞能有效摄取SARS-CoV-2。
一通过IFN-γ（20 纳克/毫升）和LPS（100 ng/mL）或M2（通过IL-4）（20 纳克/毫升） h、 然后以1:1的比例感染SARS-CoV-2（TCID50：单元格）用于2 h.用SARS-CoV-2特异性探针固定细胞进行RNAscope分析。探针1以病毒阳性序列为目标来评估病毒分布（绿色）。比例尺，5 微米。b条M1或M2 AM感染SARS-CoV-2 30 min用抗NP和抗Rab5抗体染色，并在共焦显微镜下观察。比例尺，5 微米。c（c）从hACE2小鼠分离的M0、M1或M2 AM和原代肺泡上皮（AT2）细胞感染SARS-CoV-2 5 最小值或30 min，然后固定用于RNAscope分析。比例尺，5 微米。d日等同于c（c）除细胞被抗NP抗体染色外。比例尺，5 微米。数据代表平均值 ± 3个独立实验的SD*P（P） < 0.05, ***P（P） < 0.001，通过单因素方差分析(一,c（c）,d日).
图2
图2。严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型易于在M1型AM中复制。
一,b条M0、M1和M2 AM感染SARS-CoV-2达30 分钟后，去除病毒，用无病毒培养基培养细胞30分钟 最小值，1 h、 或4 h.固定细胞进行RNAscope分析。探针1以病毒阳性序列为目标来评估病毒分布（绿色）。探针2以病毒负序序列为靶点，指示病毒复制（红色）。比例尺，5 微米。c（c）等同于一，除了细胞与另一种无病毒培养基一起培养1 h，并用抗NP抗体染色。比例尺，5 微米。d、 e（电子）等同于一，除了细胞被抗NP抗体染色(d日)或通过qPCR测定上清液中的病毒载量(e（电子）). 比例尺，5 微米。（f）M0、M1和M2 AM感染SARS-CoV-2达30 min。收集上清液感染Vero E6细胞48 h.用抗NP抗体对细胞进行染色，并通过共聚焦显微镜进行观察。比例尺，100 微米。数据代表平均值 ± 3个独立实验的SD*P（P） < 0.05, **P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，通过单因素方差分析(一–（f）).
图3
图3。柔软有助于M1 AM吸收病毒。
一从WT或hACE2小鼠分离的AM感染SARS-CoV-2 2 2 h.通过qPCR分析病毒载量。b条病毒加载自ACE2公司-用qPCR检测siRNAs-AMs。c（c）用原子力显微镜测量M0、M1和M2 AM的刚度。d日M1或M2 AMs用茉莉糖苷治疗（Jas，50 nM）或细胞松弛素D（细胞，1 μM）用于12 h或4 h、 分别是。然后，AM被SARS-CoV-2感染2次 h，qPCR检测病毒载量。数据代表平均值 ± 3个独立实验的SD**P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，通过单因素方差分析(一,b条和d日)或Kruskal–Wallis测试(c（c）).
图4
图4。内体或溶酶体中的pH值影响AM中的病毒复制。
一M0、M1和M2 AMs用pHrodo™红右旋糖酐染色，荧光强度通过流式细胞仪测定。b、 d日AM感染SARS-CoV-2达30 最小值(b条)或1 小时(d日)，然后用抗NP、抗Rab7和抗lamp2抗体染色。比例尺，5 微米。c（c）M0、M1和M2 AM用LysoSensor™黄色/蓝色DND-160染色，pH值由微孔板阅读器检测。数据代表平均值 ± 3个独立实验的SD*P（P） < 0.05, **P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，通过单因素方差分析(一–d日).
图5
图5。CQ通过将M0巨噬细胞极化为M1巨噬细胞来增强SARS-CoV-2感染。
一用CQ（10）预处理的AM μM）24 h用LysoSensor™黄色/蓝色DND-160染色，pH值由微孔板阅读器检测。b条用CQ（10）预处理的AM μM）24 h用pHrodo™红右旋糖酐染色，并通过共焦显微镜观察。比例尺，5 微米。c（c）用CQ（10）预处理的AM μM）24 h感染SARS-CoV-2 30 min，然后用无病毒培养基培养细胞30分钟 最小值，1 h、 或4 h.用探针1（绿色）和探针2（红色）固定细胞进行RNAscope。比例尺，5 微米。d日–（f）实验设计示意图(d日). 用SARS-CoV-2感染hACE2转基因小鼠，然后用CQ（i.p.，35 mg/kg），每天一次，持续5天。对照组（CTRL）接受溶媒（水）作为安慰剂。固定肺组织，用探针1（绿色）和探针2（红色）进行RNAscope分析(e（电子）,n个 = 4只小鼠）和H&E染色(（f）,n个 = 4只小鼠）。对每只小鼠左肺的三个肺切片进行评估。代表性图像反映了受损肺组织的分布。比例尺，20 μm用于e（电子）, 50 μm用于（f）数据代表平均值 ± 标准偏差输入一–c（c）,n个 = 3个独立实验**P（P） < 0.01, ***P（P） < 0.001，由双尾学生t吨-测试(一–c（c）)或单向方差分析(e（电子）,（f）).
图6
图6。巨噬细胞耗竭可减轻SARS-CoV-2在体内引起的肺损伤。
一–d日hACE2转基因小鼠感染严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型30天 min，然后用对照脂质体（CTRL）或氯吡脲-a（鼻内给药，50 μL和静脉注射100 μL）一次。给出了实验设计的示意图(一). 肺组织进行H&E染色(b条)用探针1（绿色，靶向阳性序列）和探针2（红色，靶向阴性序列）进行RNAscope分析(c（c）)或PAS染色(d日). 对每只小鼠左肺的三个肺切片进行评估。代表性图像反映了受损肺组织的分布。比例尺，20 μm用于c（c）, 50 μm用于b条,d日数据代表平均值 ± 标准偏差。n个 = 4. ***P（P） < 0.001，通过单因素方差分析(b条,c（c）).
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • 间质巨噬细胞是人肺中新冠肺炎启动过程中病毒接管和炎症的焦点。
    Wu TT、Travaglini KJ、Rustagi A、Xu D、Zhang Y、Andronov L、Jang S、Gillich A、Dehghannasiri R、Martínez-Colon GJ、Beck A、Liu DD、Wilk AJ、Morri M、Trope WL、Bierman R、Weissman IL、Shrager JB、Quake SR、Kuo CS、Salzman J、Moerner WE、Kim PS、Blish CA、Krasnow MA。 Wu TT等。 《实验医学杂志》，2024年6月3日；221（6）：e20232192。doi:10.1084/jem.20232192。Epub 2024年4月10日。 《实验医学杂志》，2024年。 PMID：38597954 免费PMC文章。
  • SARS-CoV-2感染的小胶质细胞炎症反应：综合综述。
    Dey R、Bishayi B。 Dey R等人。 细胞分子神经生物学。2023年12月15日；44(1):2. doi:10.1007/s10571-023-0144-3。 细胞分子神经生物学。2023 PMID：38099973 审查。
  • MAFB形成人类单核细胞源性巨噬细胞对SARS-CoV-2的反应，并控制严重的COVID-19生物标记物表达。
    Simón-Fuentes M、Ríos I、Herrero C、Lasala F、Labiod n、Luczkowiak J、Roy-Vallejo E、Fernández de Córdoba-Oñate S、Delgado-Wicke P、Bustos M、Fernéndez-Ruiz E、Colmenares M、Puig-Kröger A、Delgato R、Vega MA、CorbíL、Dom nguez-Sotoá。 Simón-Fuentes M等人。 JCI洞察力。2023年12月22日；8（24）：e172862。doi:10.1172/jci.insight.172862。 JCI洞察力。2023 PMID：37917179 免费PMC文章。
  • 肺巨噬细胞在甲型流感病毒免疫反应中的多种作用。
    李浩、王安、张勇、魏飞。 Li H等人。 前微生物。2023年9月13日；14:1260543. doi:10.3389/fmicb.2023.1260543。eCollection 2023年。 前微生物。2023 PMID：37779697 免费PMC文章。 审查。
  • SARS-CoV-2 Omicron BA.5对致病性的年龄依赖性获取。
    Imbiakha B、Ezzatpour S、Buchholz DW、Sahler J、Ye C、Olarte Castillo XA、Zou A、Kwas C、O'Hare K、Choi A、Adeleke RA、Khomandiak S、Goodman L、Jager MC、Whittaker GR、Martinez Sobrido L、August A、Aguilar HC。 Imbiakha B等人。 科学进展2023年9月22日；9（38）：eadj1736。doi:10.1126/sciadv.adj1736。Epub 2023年9月22日。 科学进展2023。 PMID：37738347 免费PMC文章。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Zhang NN等。抗新型冠状病毒耐高温mRNA疫苗。单元格。2020;182:1271–1283.e1216。doi:10.1016/j.cell.2020.07.024。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Frohman EM等人，第一部分，SARS-CoV-2在严重的新型冠状病毒肺炎中引发“恐慌”发作。神经学杂志。科学。2020;第415:116936页。doi:10.1016/j.jns.2020.116936。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Wiersinga WJ、Rhodes A、Cheng AC、Peacock SJ、Prescott HC。2019年冠状病毒病（COVID-19）的病理生理学、传播、诊断和治疗：综述。JAMA公司。2020;324:782–793. doi:10.1001/jama.2020.12839。-内政部-公共医学
    1. Hoffmann M等人。SARS-CoV-2细胞进入依赖于ACE2和TMPRSS2，并被临床证明的蛋白酶抑制剂阻断。单元格。2020;181:271–280. doi:10.1016/j.cell.2020.02.052。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Fisch H，Gifford GE。兔巨噬细胞肿瘤细胞毒素的体外生产。国际癌症杂志。1983;32:105-112。doi:10.1002/ijc.2910320117。-内政部-公共医学