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.2021年3月2日；7(1):5.
doi:10.1038/s41514-021-00057-8。

肾小管上皮精氨酸酶-II在肾脏炎症显像中的作用

吉黄 1 2, 梁秀杰 1 2, 迪奥戈·拉德拉 1 2, Benoit Felley公司 三, 修芬明 1 2, 杨志宏 4 5
附属机构

肾小管上皮精氨酸酶-II在肾脏炎症显像中的作用

吉黄等。 NPJ老化机械疾病. .

摘要

衰老的肾脏会经历复杂的变化，容易受到慢性肾脏病（CKD）的损伤和发展，女性的发病率高于男性。已有证据表明，II型L-精氨酸：尿苷水解酶，精氨酸酶-II（Arg-II）在加速衰老中起作用。精氨酸II在肾脏中高表达。然而，Arg-II在肾老化中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨精氨酸-Ⅱ是否依赖性别参与肾脏衰老过程。野生型（WT）小鼠肾脏中的精氨酸-II水平随着年龄的增长而显著升高，伴随着雄性和雌性小鼠炎症细胞因子/趋化因子、组织巨噬细胞、纤维化相关因子和小管间质纤维化的表达增加。这种肾脏衰老表型在arg-II中被显著抑制-/-小鼠，主要是雌性小鼠，其精氨酸-II水平高于雄性小鼠。重要的是，IL-1β、MCP1、VCAM-1和TGFβ1等多种因子主要定位于衰老肾脏中表达Arg-II的近端肾小管S3段细胞。在人类近端肾小管细胞（HK-2）中，TNF-α依赖于Arg-II的上调而增强粘附分子的表达。Arg-II在细胞中的过度表达可提高TGFβ1水平，而线粒体ROS抑制可阻止TGFβ1。总之，我们的研究揭示了近端肾小管Arg-II在女性肾脏衰老过程中起着重要作用。精氨酸II可能是治疗和预防衰老相关肾脏疾病的一个有希望的治疗靶点。

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作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1。精氨酸酶-II蛋白表达的年龄和性别相关差异。
一雄性和雌性WT小鼠肾脏精氨酸酶-II的免疫印迹分析。显示两种扫描强度可以更好地显示Arg II水平的衰老和性别相关差异（低强度图像用于雌性小鼠，高强度图像用于雄性小鼠定量）。肾脏来自参数-II−/−使用小鼠作为阴性对照。Ponceau染色可作为负荷控制，因为肌动蛋白随着年龄的增长有不同的表达。b定量显示在年轻和老年小鼠的图形显示比较中。c（c）雄性和雌性小鼠的定量比较如图所示。雄性年轻小鼠和雄性老年小鼠的值分别用作雌性年轻小鼠和雌性老年小鼠的参考值。Y-WT年轻WT，O-WT旧WT，KO参数-II−/−. ***第页 ≤ 0.001。男：Y-WT，n个 = 6; O-WT、，n个 = 11; 女性：Y-WT，n个 = 6; O-WT、，n个 = 10
图2
图2。女性肾脏中的年龄相关性炎症得到了预防参数-II−/−老鼠。
一–小时mRNA表达水平tnf-α、il-1β、il-6、mcp1、vcam-1、icam-1、f4/80和智能操作系统用qRT-PCR对雌性小鼠肾脏进行了分析。转速12作为参考。Y-WT年轻WT，Y-KO年轻参数-II−/−，O-WT旧WT，O-KO旧参数-II−/−数据表示为Y-WT组的折叠变化*P（P） ≤ 0.05, **P（P） ≤ 0.01***P（P） ≤ 0.001. Y-WT、，n个 = 6; Y-KO、，n个 = 6; O-WT、，n个 = 10; O-KO，n个 = 9
图3
图3。肾脏中ACE-1/IL-1β和ACE-1/MCP1的细胞共定位。
从老野生型（O-WT）雌性小鼠制备中央横切面，并对其进行免疫荧光染色一ACE-1（红色）和IL-1β（绿色）或bACE-1（红色）和MCP1（绿色）。放大图像取自延髓外侧。比例尺 = 0.5 mm（对于上部面板）(一,b)和0.1 mm，用于下面板(一,b).
图4
图4。氩-II缺乏可降低小鼠肾脏中与年龄相关的IL-1β和MCP1。
从年轻和年老野生型（WT）和参数-II−/−雌性小鼠(n个 = 每组4个），并进行免疫荧光染色一分别为Arg-II、IL-1β和MCP1。从延髓外侧选取代表性图像。比例尺 = 0.2 毫米。b使用LAS X软件对整个肾切面的荧光信号强度进行量化*P（P） ≤ 0.05, **P（P） ≤ 0.01***P（P） ≤ 0.001. Y-WT年轻WT，Y-KO年轻参数-II−/−，O-WT旧WT，O-KO旧参数-II−/−.
图5
图5。氩-II缺乏可降低雌性小鼠中年龄相关VCAM-1的表达和巨噬细胞的蓄积。
从年轻和年老的WT和arg二−/−雌性小鼠并接受免疫荧光染色一来自旧WT雌性小鼠的VCAM-1和ACE-1（左侧面板），bVCAM-1（右侧面板），n个 = 4; 和d日80层/四层(n个 = 5） 。ACE-1和VCAM-1的代表性图像选自外髓质。比例尺 = 0.1 F4/80的代表性图像包含皮质和髓质。比例尺 =;0.2 毫米。c（c）,e（电子）使用LAS X软件对整个肾切面的荧光信号强度进行量化*P（P） ≤ 0.05, **P（P） ≤ 0.01，****P ≤ 0.0001. Y-WT年轻WT，Y-KO年轻参数-II−/−，O-WT旧WT，O-KO旧参数-II−/−.
图6
图6。与年龄相关的纤维化增加减少了参数-II雌性小鼠缺乏。
一–c（c）mRNA表达水平I型胶原α1，Ia2、和三a1分别对雌性小鼠进行qRT-PCR分析。转速12用作参考。数据表示为Y-WT组的折叠变化。Y-WT、，n个 = 6; Y-KO、，n个 = 6; O-WT、，n个 = 10; O-KO、，n个 = 9d日年轻和老年WT中Masson三色染色的代表性组织学图像（放大×10）参数-II−/−雌性小鼠。比例尺 = 250 微米。n个 = 每组4人。e（电子）肾小球硬化的量化由肾小球硬化评分（见方法部分）和（f）肾纤维化面积百分比显示间质纤维化。Y-WT年轻WT，Y-KO年轻参数-II−/−，O-WT旧WT，O-KO旧arg二−/−. *P（P） ≤ 0.05, **P（P） ≤ 0.01***P（P） ≤ 0.001.
图7
图7。氩-II缺乏可降低雌性小鼠的年龄相关TGF-β1。
一mRNA水平转化生长因子β1在年轻人和老年人中参数-II−/−小鼠肾脏qRT-PCR分析；n个 = 每组8个；b从年轻和年老的WT和参数-II−/−雌性小鼠，对ACE-1（红色）和TGF-β1（绿色）进行免疫荧光染色。从延髓外侧选取代表性图像。n个 = 每组6人。比例尺 = 0.1 毫米。c（c）TGF-β1荧光信号强度的量化。Y-WT年轻WT，Y-KO年轻参数-II−/−，O-WT旧WT，O-KO旧参数-II−/−. *P（P） ≤ 0.05, **P（P） ≤ 0.01***P（P） ≤ 0.001.
图8
图8。沉默参数-II减少TNF-α诱导的HK-2细胞粘附分子的表达。
一HK-2细胞血清饥饿24小时 h、 然后在不同浓度或不同持续时间的TNF-α存在下培养。制备细胞裂解物，并对VCAM-1、ICAM-1、Arg-II和β-actin进行免疫印迹分析。β-actin作为负荷控制。b用rAd/U6-LacZ转导HK2细胞shRNA作为对照（LacZ）或rAd/U6-Arg IIshRNA沉默arg二基因(参数-II). 转导后2天，细胞血清饥饿24 h、 然后与10 24小时的肿瘤坏死因子-α（ng/ml） h.制备细胞裂解物，并对VCAM-1、ICAM-1、Arg-II和β-actin进行免疫印迹分析。数据以平均值表示 ± 扫描电镜。n个 = 4. *P（P） ≤ 0.05, ***P（P） ≤ 0.001. rAd重组腺病毒。
图9
图9。Arg-II通过线粒体氧化应激诱导HK-2细胞TGF-β1表达。
用鱼藤酮（2）预处理HK-2细胞 μmol/L）1 然后以rAd/CMV空载体作为对照（V5）或rAd/CMV-Arg-II（Arg-II）转导24小时 小时。一TGF-β1、Arg-II和β-actin的免疫印迹分析。右边的图表显示了免疫印迹上信号的量化。n个 = 三。b细胞用MitoSox（红色）进行线粒体超氧化物检测，然后用Hoechst 33342（蓝色）进行细胞核染色。采用Leica TCS SP5共聚焦显微镜通过×40物镜对MitoSox染色进行图像采集。n个 = 4.比例尺 = 20 微米。右侧的曲线图显示了信号的量化。Con控制。数据以平均值表示 ± 扫描电镜*第页 ≤ 0.05, **第页 ≤ 0.01之间。
图10
图10。外髓质外带中与年龄相关的增殖，而非凋亡，通过以下途径得到缓解参数-II缺乏。
从年轻和年老的WT和参数-II−/−雌性小鼠。一肾石蜡切片中凋亡细胞（红色）的TUNEL分析。每毫米TUNEL阳性细胞的定量2在整个肾切片中，相邻肾切片中由ACE-1（近端小管S3段的标记物）阳性区域界定的外髓质外带（OSOM）在右侧面板中以点图形式呈现。比例尺 = 0.1 毫米（mm） = 5bPCNA（绿色，增殖细胞标记物）和ACE-1（红色）的免疫荧光染色。右侧图像是紧挨着左侧的相应图片中所选区域的放大图。比例尺 = 0.5 左侧面板为mm，0.1 在右侧面板上分别为mm。每毫米PCNA阳性细胞的定量2在整个肾脏切片中，由ACE-1阳性区域分隔的OSOM在右侧显示为点图，n个 = 5.Y-WT年轻WT，Y-KO年轻参数-II−/−，O-WT旧WT，O-KO旧参数-II−/−. *P（P） ≤ 0.05, **P（P） ≤ 0.01***P（P） ≤ 0.001.
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    1. Schmitt R，Melk A.肾老化的分子机制。肾脏国际2017；92:569–579。doi:10.1016/j.kint.2017.02.036。-内政部-公共医学
    1. Hommos MS、Glassock RJ、Rule AD。健康衰老时人体肾脏的结构和功能变化。《美国肾脏学会杂志》。2017年；28:2838–2844. doi:10.1681/ASN.2017040421。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 欧洲委员会。2015年老龄化报告。欧洲经济。https://ec.europa.eu/economy_finance/publications/european_economy/2015/。。。(2015)
    1. Carrero JJ、Hecking M、Chesnaye NC、Jager KJ。慢性肾脏疾病流行病学和结果中的性别差异。《自然评论》（Nat.Rev.Nephrol）。2018;14:151–164. doi:10.1038/nrneph.2017.181。-内政部-公共医学