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.2021年3月;30(6):309-324.
doi:10.1089/scd.2019.0171。 Epub 2021年3月1日。

骨髓间充质基质细胞与外周血单个核细胞体外共培养促进髓系血管生成细胞和周细胞样细胞分化

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骨髓间充质基质细胞与外周血单个核细胞体外共培养促进髓系血管生成细胞和周细胞样细胞分化

Liina Uusitalo-Kylmälä等。 干细胞开发. 2021年3月.

摘要

众所周知,间充质基质细胞(MSCs)通过产生旁分泌信号刺激内皮细胞(EC)的存活和生长,并分化为周细胞,从而支持血管形成和稳定。另一方面,在CD14中发现了具有EC-like表型的细胞+和CD34+外周血(PB)单核细胞(MNCs)的细胞群。本研究的目的是研究人MSC-MNC共培养的促血管生成分化潜能。骨髓源性MSCs(2500个细胞/cm2)与MNC共同培养(50000个细胞/cm2)从健康献血者的PB中分离得到。以相同细胞密度单独培养的MSCs和MNC作为对照。用磁激活细胞分选法分离MNC组分和共培养细胞中的细胞,以检测CD14、CD34和CD31表面标记。通过免疫细胞化学、定量PCR(qPCR)和流式细胞术分析共培养物的细胞增殖和形态,以及各种造血、内皮和周细胞标记物的表达。分别用qPCR和酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达和分泌。我们的结果表明,在与MSCs的共培养中,CD14+CD45型+MNCs分化为表达CD31的纺锤形、非增殖、类内皮细胞、髓样血管生成细胞(MACs),也分化为表达神经/胶质抗原2(NG2)和CD146的周细胞样细胞。在与人脐静脉内皮细胞的共培养中证明了分离的MAC的功能,它们支持管状结构的形成。天然气2+在两个CD34中均发现MNC来源的细胞-CD14号机组+和CD34-CD14号机组-细胞群,表明存在不同亚型的周细胞样细胞。此外,在MSC-MNC共培养中,主要由MSCs分泌VEGF。总之,MSC在MSC-MNC共培养中具有促血管生成能力,因为它们支持功能性MAC的分化以及MNC来源的周胞样细胞的分化。这种现象至少部分通过分泌的VEGF介导。

关键词:共生;间充质基质细胞;单核细胞;髓样血管生成细胞;周细胞;血管内皮生长因子。

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