RNF168 is highly expressed in esophageal squamous cell carcinoma and contributes to the malignant behaviors in association with the Wnt/β-catenin signaling pathway

doi:10.18632/aging.202471

.2021年1月25日；13(4):5403-5414.

doi:10.18632/aging.202471。 Epub 2021年1月25日。

RNF168在食管鳞状细胞癌中高表达，并与Wnt/β-catenin信号通路相关，导致恶性行为

云九沟¹, 大成金¹, 何圣良（Shengliang He）¹, 韩松晨¹, 祁州白¹

附属公司

PMID： 33493132
预防性维修识别码：项目管理委员会7950303
内政部： 10.18632/aging.202471

RNF168在食管鳞状细胞癌中高表达，并与Wnt/β-catenin信号通路相关，导致恶性行为

云九沟等。老龄化（纽约州奥尔巴尼市）. 2021.

.2021年1月25日；13(4):5403-5414.

doi:10.18632/aging.202471。 Epub 2021年1月25日。

作者

云九沟¹, 大成金¹, 何圣良（Shengliang He）¹, 韩松晨¹, 祁州白¹

附属

¹中华人民共和国兰州市甘肃省医院胸外科。

PMID： 33493132
预防性维修识别码：下午7950303
内政部： 10.18632/页.202471

摘要

E3泛素连接酶环指蛋白168（RNF168）是DNA损伤修复的关键蛋白之一。最近在一些肿瘤中发现RNF168的异常表达。然而，RNF168在食管鳞状细胞癌（ESCC）发生发展中的作用尚未完全阐明。在这里，我们报告了RNF168在食管鳞癌中的表达相对于正常食管上皮组织增加。值得注意的是，在ESCC患者中，RNF168的表达增加与肿瘤分期和浸润深度相关。RNF168基因敲除抑制食管癌细胞增殖，促进细胞凋亡，干扰细胞运动，最终抑制肿瘤异种移植生长。机制研究表明RNF168通过调节Wnt/β-catenin信号通路影响食管癌细胞的恶性行为。此外，RNF168的表达与无翼型MMTV整合位点家族成员3A（WNT3A）的表达呈正相关，且RNF168和WNT2A的高表达预示着低存活率。总之，我们的发现突出了RNF168在ESCC肿瘤发生中的重要作用，并为ESCC的治疗提供了新的生物标记物和治疗靶点。

关键词：RNF168；Wnt/β-catenin；食管鳞癌；泛素。

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利益冲突声明

利益冲突：作者没有利益冲突需要声明。

数字

图1
(A类)RNF168在各种类型的肿瘤中表达改变，在ESCC中表达增加；(B类)RNF168 mRNA在食管鳞癌组织（N=182）和正常食管组织（N=286）中的表达（*p<0.05）；(C类)RNF168在不同临床阶段食管鳞癌组织中的表达水平。

图2
(一)人食管鳞癌RNF168免疫组织化学染色的代表性结果(A类)RNF168高表达癌组织；(B类)RNF168低表达的癌组织）；(b条)食管鳞癌组织和匹配的邻近正常组织的RNF168蛋白表达评分（**P<0.01）。

图3
**RNF168基因敲除对*在体外*食管癌细胞增殖。**(A类)Western blot和(B类)qPCR证实RNF168在ECA-109和EC9706细胞中被成功敲除；(C类,天)通过CCK-8分析测定细胞增殖。数据表示为独立实验的平均值±SD。**P<0.01。

图4
**RNF168敲除抑制食管癌细胞的凋亡和迁移。**(A类)用shCtrl或ShRNF168慢病毒转导后流式细胞仪检测ECA-109和EC9706细胞凋亡；(B类)和(C类)通过划痕试验（宽度单位为μm）和跨阱试验测量细胞的迁移能力；(天)Western blot检测n-钙粘蛋白、纤维连接蛋白和α-连环蛋白的表达水平。数据表示为独立实验的平均值±标准差。*p<0.05、**p<0.01。

图5
(A类)和(B类)TCGA数据库中184例食管癌差异表达基因的富集分析；(C类)路径富集分析；(天)WNT3A和RNF168 mRNA水平的相关性；(E类)转导后ECA-109和EC9706细胞Wnt/β-catenin信号通路蛋白组分水平；(F类)RNF168的PPI网络。(**G公司**)Western blot检测RNF168和ATM的表达。

图6
(A类)将RNF168-silenced和control Eca-109细胞注射到裸鼠体内；(B类)注射ECA-109/shCtrl或ECA-109/RNF168细胞的裸鼠肿瘤的大体外观。重量(C类)和体积(天)移植ECA-109/shCtrl或ECA-109/RNF168细胞的裸鼠体内的肿瘤。**，P<0.01。

图7
(A类)食管鳞癌患者RNF168和WNT3A mRNA表达水平及OS和DSS曲线的TCGA数据库分析；(B类)热图显示184例患者的WNT3A和RNF168表达水平和生存率。

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