In the presence of TGF-β1, Asperosaponin VI promotes human mesenchymal stem cell differentiation into nucleus pulposus like- cells

doi:10.1186/s12906-020-03169-y

.2021年1月14日；21(1):32.

doi:10.1186/s12906-020-03169-y。

在TGF-β1存在的情况下，Asperosaponin VI促进人骨髓间充质干细胞分化为髓核样细胞

甬道牛¹, 林雪（Lin Xie）², 荣荣登¹, 张晓宇¹

附属公司

¹南京中医药大学中西医结合附属医院脊柱外科，南京，210028，江苏。
²南京中医药大学中西医结合附属医院脊柱外科，南京，210028，江苏。Xielin6508@163.com。

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内政部： 10.1186/s12906-020-03169-y

在TGF-β1存在的情况下，Asperosaponin VI促进人骨髓间充质干细胞分化为髓核样细胞

甬道牛等。 BMC补体治疗. 2021.

.2021年1月14日；21(1):32.

doi:10.1186/s12906-020-03169-y。

作者

甬道牛¹, 林雪（Lin Xie）², 荣荣登¹, 张晓宇¹

附属公司

¹南京中医药大学中西医结合附属医院脊柱外科，南京，210028，中国江苏。
²南京中医药大学中西医结合附属医院脊柱外科，南京，210028，江苏。Xielin6508@163.com。

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摘要

背景：髓核细胞再生是预防椎间盘退变的有效方法。在本研究中，我们研究了从中药川续断根中分离出的Asperosaponin VI（ASA VI）在促进人类间充质干细胞（HMSC）增殖和分化为NP样细胞中的作用，并探讨了可能的作用机制。

方法：通过XTT法和EDU染色测定ASA VI对HMSC存活和增殖的影响。然后，采用实时定量PCR、免疫细胞化学和免疫荧光分析方法，测定ASA VI对NP细胞中细胞外基质（ECM）组分COL2A1、聚集蛋白聚糖、SOX9、KRT19、PAX1和糖胺聚糖（GAG）表达的影响。此外，Western blot检测p-ERK1/2和p-smad2/3的表达。

结果：ASA VI能够促进HMSCs向NP样细胞的增殖和分化，其最适浓度为1 mg/L。Western blot分析表明，可能的机制与激活p-ERK1/2和p-Smad2/3有关。

结论：ASA VI可以促进HMSCs的增殖和分化为NP样细胞，可能用于IVDD的治疗。

关键词：Asperosaponin VI；分化；ERK1/2；人骨髓间充质干细胞；髓核样细胞；smad2/3。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明，他们没有相互竞争的利益。

数字

图1
ASA VI促进HMSCs的增殖。一不同浓度ASA VI处理HMSCs 1、3或5的细胞活力天。b条不同浓度ASA VI处理后HMSCs的EDU染色（比例尺：200 微米）。**c（c）**各组HMSCs经EDU染色的相对数量*第页<0.05时**第页<0.01

图2
ASA VI浓度对基因表达的影响。在用不同浓度的ASA VI处理细胞3或7天后，通过RT-PCR评估所选基因的表达水平天，并归一化为家政基因GAPDH。对照组被视为“1”。与对照组相比，ASA VI提高了基因的表达，最佳浓度为1 毫克/升*第页<0.05与对照组**第页<0.01与对照组

图3
ASA VI浓度对培养基中GAG数量的影响。ASA VI治疗1 mg/L培养基中GAG分泌量最高**第页<0.01与对照组

图4
通过免疫染色验证聚集蛋白聚糖和PAX1基因的表达水平。实验处理细胞的免疫荧光信号比对照细胞强（绿色染色）（比例尺：200 微米）

图5
ASA VI对p-ERK1/2、p-smad2/3、ERK1/2和smad2/3蛋白表达水平的影响。ASA VI治疗48小时后p-ERK1/2、p-Smad2/3、ERK1/2和Smad2/3表达水平的Western blot分析 h.将p-ERK1/2和p-Smad2/3水平归一化为ERK1/2及Smad2/3的水平（图5b），ERK1/2与Smad2/3的蛋白水平与对照组折叠（图5c）**第页<0.01与对照组

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