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.2021年1月11日;6(1):10.
doi:10.1038/s41392-020-00437-8。

CREBBP/EP300突变通过FBXW7-NOTCH-CCL2/CSF1轴改变肿瘤相关巨噬细胞极化促进弥漫性大B细胞淋巴瘤的肿瘤进展

附属公司

CREBBP/EP300突变通过FBXW7-NOTCH-CCL2/CSF1轴改变肿瘤相关巨噬细胞极化促进弥漫性大B细胞淋巴瘤的肿瘤进展

黄耀辉等。 信号传输目标热. .

摘要

表观遗传学改变在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的肿瘤进展中起着重要作用。然而,表观遗传基因突变对肿瘤微环境的生物学相关性仍有待确定。通过全基因组/外显子序列测定(WGS/WES),在316名患者的训练队列中检测到与组蛋白甲基化(KMT2D、KMT2C、EZH2)、组蛋白乙酰化(CREBBP、EP300)、DNA甲基化(TET2)和染色质重塑(ARID1A)相关的核心基因集以及在303名通过靶向测序新诊断为DLBCL的患者的验证队列中。评估了它们与外周血免疫细胞和临床结果的相关性。在体外和体内研究了肿瘤微环境的潜在机制。在所有619例DLBCL患者中,KMT2D(19.5%)的体细胞突变最常见,其次是ARID1A(8.7%)、CREBBP(8.4%)、KMT2C(8.2%)、TET2(7.8%)、EP300(6.8%)和EZH2(2.9%)的突变。其中,CREBBP/EP300突变与外周血淋巴细胞与单核细胞绝对比值下降以及无进展和总生存率下降显著相关。在B淋巴瘤细胞中,CREBBP或EP300的突变或敲除抑制H3K27乙酰化,下调FBXW7表达,激活NOTCH通路和下游CCL2/CSF1表达,导致肿瘤相关巨噬细胞极化为M2表型和肿瘤细胞增殖。在B淋巴瘤小鼠模型中,与通过FBXW7-NOTCH-CCL2/CSF1轴进行CREBBP/EP300野生型对照的小鼠相比,含有CREBBP/EP300突变的异种移植瘤表现出更低的H3K27乙酰化、更高的M2巨噬细胞募集和更快的肿瘤生长。因此,我们的工作有助于理解组蛋白乙酰化对肿瘤微环境的异常调节,作为DLBCL肿瘤进展的另一种机制。

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数字

图1
图1
染色质修饰基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中经常发生突变。通过全基因组/外显子组测序(WGS/WES)在316名患者(上组)的训练队列中确定基因突变,并通过靶向测序在303名DLBCL患者(下组)中验证基因突变。b条在619名DLBCL患者的训练和验证队列中,通过WGS/WES/靶向测序(下面板)确定的非沉默体细胞突变的类型和数量(上面板),以及非沉默体细胞核单核苷酸变体(SNV)的数量。c(c)基因间相关性的圆形图,表示不同基因突变的组合
图2
图2
CREBBP/EP300橡胶在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中,突变与肿瘤进展和异常肿瘤微环境有关。,b条训练队列中DLBCL患者的无进展生存率(PFS)和总生存率(OS)曲线()在验证队列中(b条).c(c),d日淋巴细胞与单核细胞绝对比值(ALC/AMC)和T细胞亚群在以下方面的分布CREBBP公司/EP300型训练队列中的突变状态(c(c))在验证队列中(d日). 数据表示为平均值±标准偏差
图3
图3
CREBBP/EP300橡胶突变抑制H3K27乙酰化并激活NOTCH信号通路。复合体的结构预测CREBBP公司EP300型突变。b条在载体中检测到CREBBP和H3K27ac的蛋白表达,CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱、,CREBBP公司克朗,载体中EP300和H3K27ac的蛋白表达,EP300型重量,EP300型H1377R型、扰乱、,EP300型kd(分子量)western blot检测DB、SUDHL4和LY10细胞。Tubulin和H3被用作负荷控制。显示了CREBBP/微管蛋白、EP300/微管蛋白质和H3K27ac/H3比率。c(c)H3K27ac的免疫荧光检测CREBBP公司1392兰特*EP300型H1377R型DB单元。d日弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者肿瘤标本中H3K27ac的免疫组织化学研究CREBBP公司/EP300型突变。e(电子)有无DLBCL患者的通路富集分析CREBBP公司/EP300型根据京都基因和基因组百科全书(KEGG)和反应组数据库的突变。(f)基因集富集分析(GSEA)富集了NOTCH信号通路中有或无差异表达基因CREBBP公司/EP300型突变。浓缩分数列有P(P)值。NES归一化富集分数、FDR假发现率。DLBCL患者肿瘤标本中NICD(NOTCH1细胞内部分)的免疫组织化学研究CREBBP公司/EP300型突变
图4
图4
CREBBP/EP300橡胶突变抑制FBXW7并激活NOTCH信号通路。NOTCH信号通路相关基因的热图CREBBP公司多用途终端/EP300型多用途终端患者,与CREBBP公司重量/EP300型重量患者。b条弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者肿瘤标本中FBXW7、HEY1和HEY2 mRNA的正常表达CREBBP公司/EP300型RNA测序数据显示的突变。c(c)FBXW7、HEY1和HEY2的相对基因表达CREBBP公司1392兰特*,CREBBP公司克朗,EP300型H1377R型、和EP300型kd(分子量)DB单元,与CREBBP公司重量,EP300型重量或通过定量实时PCR(RT-PCR)扰乱DB细胞。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3).d日在载体中检测到FBXW7和NICD的蛋白表达,CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱、,CREBBP公司kd(分子量)DB、SUDHL4和LY10细胞,在载体中,EP300型重量,EP300型H1377R型、扰乱、,EP300型克朗western blot检测DB、SUDHL4和LY10细胞。使用与图3b相同的裂解物。Tubulin被用作负荷控制。显示FBXW7/管蛋白和NICD/管蛋白比率。e(电子)FBXW7近端启动子区H3K27ac的占有率CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱、,CREBBP公司克朗DB单元,和EP300型重量,EP300型H1377R型、扰乱、,EP300型克朗DB细胞染色质免疫沉淀(ChIP)分析。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3).(f)NICD在中的表达CREBBP公司1392兰特*CREBBP公司克朗DB单元,以及EP300型H1377R型EP300型克朗western blot检测DB细胞是否再次引入FBXW7蛋白
图5
图5
CREBBP/EP300橡胶突变有助于巨噬细胞活化和极化。弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者免疫亚群的分布CREBBP公司/EP300型通过使用Cibersort对转录组学数据进行计算去卷积分析的突变。b条DLBCL患者免疫亚群标准化富集分数的预测CREBBP公司/EP300型使用GSEA进行突变。免疫细胞P(P) < 列出了0.05。c(c)GSEA显示M2巨噬细胞基因特征与CREBBP公司/EP300型DLBCL患者的突变。NES归一化富集分数、FDR假发现率。d日DLBCL患者CD68和CD163的共聚焦分析CREBBP公司/EP300型突变。从五个随机选择的视觉中对细胞进行计数,并进行统计分析。数据表示为平均值±标准偏差。e(电子)DLBCL患者训练和验证队列中IL-10和IL-1β的化学发光免疫分析CREBBP公司/EP300型突变。数据表示为平均值±标准偏差。(f)有或无DLBCL患者免疫抑制剂(B7-H4和CSFR1)的正常mRNA表达CREBBP公司/EP300型RNA测序数据显示的突变
图6
图6
CREBBP/EP300橡胶在体外,突变通过FBXW7-NOTCH-CCL2/CSF1轴促进巨噬细胞极化。The viability ofCREBBP公司1392兰特*,EP300型H1377R型DB单元(左侧面板),以及CREBBP公司克朗,EP300型克朗与外周血单个核细胞(PBMCs)以1:1或1:5的比例共同培养72个DB细胞(右图)小时。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3). *P(P) < 与载体或扰乱DB单元相比,0.05。b条t分布随机邻居嵌入(tSNE)映射显示的主要子克隆CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、和CREBBP公司克朗DB细胞,与1:5比例的PBMC共同培养72小时。c(c)PBMC亚克隆相对比例的分数。d日使用肿瘤条件培养基进行THP-1分化检测CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱和CREBBP公司克朗DB单元。相对于对照的比率(用320处理nM佛波酯肉豆蔻酸酯(PMA)24h) 如图所示。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3).e(电子)肿瘤条件培养基培养的THP-1细胞中细胞因子IL-10和IL-1β的基因表达CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱和CREBBP公司kd(分子量)DB细胞定量RT-PCR。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3).(f)CCL2和CSF1在CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱和CREBBP公司克朗DB细胞定量RT-PCR。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3).CCL2和CSF1的蛋白表达CREBBP公司重量,CREBBP公司1392兰特*、扰乱和CREBBP公司克朗免疫印迹法检测DB细胞。小时NICD、CCL2和CSF1的蛋白表达CREBBP公司1392兰特*CREBBP公司克朗用western blot法检测DB细胞(含和不含γ-分泌酶抑制剂(GSI-I,50μm)处理48小时。联合培养PBMC中巨噬细胞标记物(CD68和CD163)的流式细胞术分析CREBBP公司1392兰特*CREBBP公司克朗48个经或未经GSI-I处理的DB细胞h.结果汇总在条形图中,表示为平均值±标准偏差(N个 = 3)
图7
图7
CREBBP/EP300橡胶突变促进了小鼠患者异种移植(PDX)模型中巨噬细胞的极化。皮下注射PDX模型的肿瘤体积CREBBP公司问题929*EP300型I997伏弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的肿瘤组织。误差条表示SD(N个 = 7). **P(P) < 0.01; ***P(P) < 0.001与CREBBP公司重量/EP300型重量.b条H3K27ac的免疫组织化学分析CREBBP公司重量/EP300型重量CREBBP公司问题929*/EP300型I997伏PDX模型的肿瘤。c(c)HDAC抑制剂奇达米德(CHID)治疗后PDX模型的肿瘤体积比(第14天与第0天)。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 7).d日含或不含PDX模型的FBXW7、HEY1和HEY2的基因表达CREBBP公司/EP300型通过定量RT-PCR进行突变。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3).e(电子)PDX模型中CCL2、CSF1和IL-10的基因表达CREBBP公司/EP300型通过定量RT-PCR进行突变。数据表示为平均值±标准偏差(N个 = 3)

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引用人

工具书类

    1. Schmitz R等。弥漫性大B细胞淋巴瘤的遗传学和发病机制。北英格兰。《医学杂志》2018;378:1396–1407. doi:10.1056/NEJMoa1801445。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Coiffer B等。LNH-98.5试验中患者的长期预后,这是第一项比较利妥昔单抗-CHOP与标准CHOP化疗对DLBCL患者的疗效的随机研究:一项由成人淋巴小体组进行的研究。鲜血。2010;116:2040–2045. doi:10.1182/血液-2010-03-276246。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Chapuy B等。弥漫性大B细胞淋巴瘤的分子亚型与不同的致病机制和结果相关。《国家医学》2018;24:679–690. doi:10.1038/s41591-018-0016-8。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 王磊等。恶性淋巴瘤靶向治疗进展。信号传输。目标。疗法。2020年;5:1–46. doi:10.1038/s41392-019-0089-y。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Ji M-M等。外周T细胞淋巴瘤组蛋白修饰基因突变,未另行规定。血液学。2018;103:679–687. doi:10.3324/haematol.2017.182444。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

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