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.2021年1月7日；21(1):18.
doi:10.1186/s12906-020-03189-8。

紫草素减轻低氧诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡

林林静 1, 高荣民 1, 张杰（音译） 1, 张冬梅 1, 金绍 1, 贾正平 1, 马惠平 2
附属公司

紫草素减轻低氧诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡

林林静等。 BMC补体治疗. .

摘要

背景：紫草素是一种骨架结构中含有三个酚羟基的天然黄酮，具有良好的抗氧化活性。然而，去卵巢原蛋白的神经保护作用尚不清楚。在这里，我们研究了去甲wogonin对PC12细胞缺氧引起的氧化损伤的保护能力。

方法：MTT法和Annexin V-FITC/PI染色法分别检测细胞活力和凋亡。用DCFH-DA法测定活性氧（ROS）含量。使用商业试剂盒测定乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）和抗氧化酶水平。实时定量PCR和Western blotting分别检测相关基因和蛋白质的表达。

结果：我们发现，去甲汉黄芩素通过提高细胞活力、减少LDH释放和改善细胞形态变化，减轻了PC12细胞缺氧诱导的损伤。Norwogonin还通过清除ROS、降低MDA生成、维持超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活性以及降低HIF-1α和VEGF的表达水平发挥抗氧化作用。此外，去甲汉黄芩素通过抑制caspase-3、细胞色素c和Bax的表达水平，同时增加Bcl-2的表达水平和Bcl-2/Bax的比率，防止细胞凋亡。

结论：Norwogonin通过淬灭ROS、维持抗氧化酶活性和抑制线粒体凋亡途径，减轻PC12细胞缺氧诱导的损伤。

关键词：抗氧化活性；细胞凋亡；缺氧；紫草素；氧化应激。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人声明他们没有利益冲突。

数字

图1
图1
去甲汉黄芩素的化学结构
图2
图2
紫草素抑制PC12细胞缺氧诱导的损伤。MTT分析(一和b条). 用不同浓度的去甲汉黄芩素处理PC12细胞1 h、 然后再孵化24小时 正常情况下h(一)或缺氧(b条)条件。代表性显微镜(c（c）)和LDH泄漏(d日). 细胞与去甲汉黄芩素孵育1 h后暴露于缺氧24小时 h.治疗后，用苏木精和伊红对细胞进行染色，并在光学显微镜下进行检查。通过LDH检测试剂盒分析细胞悬浮液中LDH的释放水平。结果表示为平均值±SD，n个 = 6或3。##对 < 0.01 vs对照组，*对 < 0.05时，**对 < 0.01 vs缺氧组
图3
图3
紫草素抑制PC12细胞缺氧诱导的氧化应激。细胞与去甲汉黄芩素孵育1 h，然后暴露于缺氧24 h.治疗后，ROS水平(一)用DCF荧光法测定细胞内MDA含量(b条)、超氧化物歧化酶(c（c）)、CAT(d日)和GPx(e（电子）)用商业试剂盒进行活性分析。结果表示为平均值±SD，n个 = 三。##对 < 0.01 vs对照组，*对 < 0.05时，**对 < 0.01 vs缺氧组
图4
图4
诺沃戈宁下调HIF-1的表达α缺氧暴露后PC12细胞中的VEGF。细胞与去甲汉黄芩素孵育1 h后暴露于缺氧24小时 h.通过实时qPCR测定mRNA表达(一). Western blot分析检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达(b条). 为了提高演示文稿的清晰度和简洁性，对墨迹进行了裁剪。HIF-1α的统计分析结果(c（c）)和血管内皮生长因子(d日)来自蛋白质印迹分析。结果表示为平均值±SD，n = 三。##对 < 0.01 vs对照组，*对 < 0.05时，**对 < 0.01 vs缺氧组
图5
图5
紫草素减轻缺氧诱导的PC12细胞凋亡，并调节凋亡相关基因的表达。细胞与去甲汉黄芩素孵育1 h，然后暴露于缺氧24小时 h.治疗后，用流式细胞仪分析AnnexinV-FITC和PI标记的染色细胞(一). 通过实时qPCR测定mRNA表达(b条). 结果表示为平均值±SD，n = 三。##对 < 0.01 vs对照组，*对 < 0.05时，**对 < 0.01 vs缺氧组
图6
图6
Norwogonin调节PC12细胞凋亡相关蛋白的表达。细胞与去甲汉黄芩素孵育1 h后暴露于缺氧24小时 h.使用蛋白质印迹分析检测Bax和Bcl-2蛋白的表达(一). 为了提高演示文稿的清晰度和简洁性，对墨迹进行了裁剪。Bax的统计分析结果(b条)，Bcl-2型(c（c）)和Bax/Bcl-2(d日)来自Western blot分析。结果表示为平均值±SD，n = 三。##对 < 与对照组相比0.01，*对 < 0.05时，**对 < 0.01 vs缺氧组
图7
图7
低氧暴露后，紫草素降低PC12细胞中细胞色素c和Caspase-3的表达。细胞与去甲汉黄芩素孵育1 h后暴露于缺氧24小时 h.使用Western blot分析检测细胞色素c和Caspase-3蛋白的表达(一). 为了提高演示文稿的清晰度和简洁性，对墨迹进行了裁剪。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的统计分析结果(b条)和细胞色素c(c（c）)来自Western blot分析。结果表示为平均值±SD，n = 三。##对 < 0.01 vs对照组，*对 < 0.05时，**对 < 0.01 vs缺氧组
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