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.2021年2月;23(2):111.
doi:10.3892/mmr.2020.11750。 Epub 2020年12月10日。

NORAD通过miR‑422a调节非小细胞肺癌细胞的上皮-间充质转化

附属公司

NORAD通过miR‑422a调节非小细胞肺癌细胞的上皮-间充质转化

陈志坤等。 分子医学代表. 2021年2月.

中的勘误表

摘要

非小细胞肺癌(NSCLC)预后不良与上皮-间质转化(EMT)有关。最近的研究表明,DNA损伤激活的非编码RNA(NORAD)具有致癌作用,靶向可能参与肿瘤细胞迁移和侵袭的microRNA(miR)‑422a。本研究旨在探讨NORAD对非小细胞肺癌细胞EMT的影响及其机制。采用逆转录定量PCR和western blotting检测长非编码RNA、miRNAs和mRNAs的表达水平。分别通过细胞计数试剂盒‑8、伤口愈合和Transwell分析检测细胞活力、迁移和侵袭。使用starBase预测NORAD的靶点,并通过进行双荧光素酶报告分析进一步确认。结果表明,与邻近的健康组织和细胞相比,肺癌组织和细胞中NORAD的表达显著增加。与对照组相比,NORAD过度表达促进SK‑MES‑1细胞的存活、迁移和侵袭,而NORAD敲除则导致A549细胞的相反作用。此外,miR‑422a被预测为NORAD的靶点,与邻近的健康组织相比,在肺癌组织中的表达水平较低。此外,miR‑422a过表达部分逆转了NORAD过表达诱导的SK‑MES‑1细胞活力、迁移、侵袭和EMT增加。此外,miR‑422a敲除部分逆转了NORAD敲除的作用。本研究表明,NORAD通过调节miR‑422a的表达来调节肺癌细胞EMT,为干预非小细胞肺癌的发展提供了潜在的治疗靶点。

关键词:DNA损伤激活的非编码RNA;microRNA‑422a;非小细胞肺癌;EMT公司。

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数字

图1。
图1。
NORAD对非小细胞肺癌组织和非小细胞癌细胞活力的影响。(A) NORAD在非小细胞肺癌组织中的表达**与邻近组织相比,P<0.001。(B) NORAD在NSCLC细胞系中的表达**与16HBE相比,P<0.001。SK-MES-1中(C)pc-NORAD和A549细胞中(D)si-NORAD的转染效率**P<0.001与pc-对照或si-对照。NORAD对(E)SK-MES-1和(F)A549细胞活力的影响**P<0.001与pc-对照或si-对照。NORAD对(G)SK-MES-1和(H)A549细胞周期分布的影响*与pc-对照组或si-对照组相比,P<0.05和**P<0.001。NORAD,DNA损伤激活的非编码RNA;非小细胞肺癌;si,小干扰RNA。
图2。
图2。
NORAD对NSCLC细胞生物学行为的影响,如迁移和侵袭。NORAD对(A)SK-MES-1和(B)A549细胞迁移的影响。NORAD对(C)SK-MES-1和(D)A549细胞侵袭的影响**P<0.001与pc-对照或si-对照。NORAD,DNA损伤激活的非编码RNA;非小细胞肺癌;si,小干扰RNA。
图3。
图3。
非小细胞肺癌组织中NORAD与miR-422a的相互作用。(A) miR-422a和NORAD之间的结合位点。miR-422a模拟物对(B)SK-MES-1和(C)A549细胞中NORAD-wt和NORAD-mut荧光素酶活性的影响**P<0.001与空白对照。(D) 非小细胞肺癌组织中miR-422a的表达水平**与邻近组织相比,P<0.001。(E) 非小细胞肺癌细胞系中miR-422a的表达水平**与16HBE相比,P<0.001。(F) 非小细胞肺癌组织中miR-422a表达与NORAD表达呈负相关。NORAD,DNA损伤激活的非编码RNA;miR,microRNA;非小细胞肺癌;wt,野生型;mut,突变体。
图4。
图4。
NORAD通过miR-422a调节NSCLC细胞的活性、迁移和侵袭。miR-422a和NORAD对(A)SK-MES-1和(B)A549细胞活力的影响。miR-422a和NORAD对(C)SK-MES-1和(D)A549细胞迁移的影响。miR-422a和NORAD对(E)SK-MES-1和(F)A549细胞侵袭的影响*与模拟控制或抑制剂控制相比,P<0.05和**P<0.001;#P<0.05##与模拟物或抑制剂相比,P<0.001;^P<0.05^^P<0.001 vs.模拟+pc-NORAD或抑制剂+si-NORAD。NORAD,DNA损伤激活的非编码RNA;非小细胞肺癌;miR,microRNA;si,小干扰RNA。
图5。
图5。
NORAD通过调节miR-422a调节EMT。miR422a和NORAD对(A)SK-MES-1和(B)A549细胞中miR422a表达的影响。(C)SK-MES-1和(D)A549细胞中EMT相关蛋白表达水平**P<0.001与模拟控制或抑制剂控制相比;##与模拟物或抑制剂相比,P<0.001;^P<0.05^^P<0.001 vs.模拟+pc-NORAD或抑制剂+si-NORAD。NORAD,DNA损伤激活的非编码RNA;上皮-间充质转化;miR,microRNA;si,小干扰RNA;基质金属肽酶。

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引用人

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  • DNA损伤激活的非编码RNA:其在致癌中的作用综述。
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