Polysaccharides extracted from Rheum tanguticum ameliorate radiation-induced enteritis via activation of Nrf2/HO-1

doi:10.1093/jrr/rraa093

.2021年1月1日；62(1):46-57.

doi:10.1093/jrr/rraa093。

唐古特大黄多糖通过激活Nrf2/HO-1改善放射性肠炎

田章¹, 雷氏¹, 阎丽², 魏牧¹, 张浩猛^三, 杨丽¹, 王晓燕⁴, 赵伟和⁵, 于洪琪⁵, 刘琳娜（Linna Liu）¹

附属公司

¹空军医科大学第二附属医院药学部，710038，中国。
²西安北林药业有限公司，710038，中国。
^三西北大学附属医院·西安第三医院甲状腺与乳腺科，710038，中国。
⁴哈尔滨医科大学附属第二医院风湿病免疫科，150001，中国。
⁵空军医科大学第二附属医院放射治疗科，710038。

PMID： 33140083
预防性维修识别码： PMC7779360型
内政部： 2009年10月10日/jrr/rraa093

唐古特大黄多糖通过激活Nrf2/HO-1改善放射性肠炎

田章等。 J辐射研究. 2021.

.2021年1月1日；62(1):46-57.

doi:10.1093/jrr/rraa093。

作者

田章¹, 雷氏¹, 阎丽², 魏木¹, 张浩猛^三, 杨丽¹, 王晓燕⁴, 赵伟和⁵, 于洪琪⁵, Liu林娜¹

附属公司

¹空军医科大学第二附属医院药学部，710038，中国。
²西安北林药业有限公司，710038，中国。
^三西北大学附属医院·西安第三医院甲状腺与乳腺科，710038，中国。
⁴哈尔滨医科大学附属第二医院风湿病免疫科，150001，中国。
⁵空军医科大学附属第二医院放射治疗科，710038，中国。

PMID： 33140083
预防性维修识别码： PMC7779360型
内政部： 2009年10月10日/jrr/rraa093

摘要

放射性肠炎是接受腹盆腔放疗的癌症患者的主要副作用。Nrf2/HO-1途径是一条关键的内源性抗氧化应激途径，但其在辐射诱导的肠炎中的确切作用尚待阐明。唐古特大黄多糖（RTP）能保护肠道细胞免受辐射损伤，但其机制尚不清楚。SD大鼠和IEC-6细胞暴露于12或10Gy X射线辐射。分析不同时间点的大鼠存活率、组织病理学和免疫组织化学特征。还评估了氧化应激和炎症反应的指标。在多个时间点评估细胞活力、细胞凋亡和Nrf2/HO-1的表达。辐射后大鼠的生理生化指标发生显著变化，伴有明显的氧化应激反应。Nrf2的mRNA和蛋白表达在照射后12 h达到峰值，HO-1的表达在照射48 h达到峰值。RTP给药减少了辐射诱导的肠道损伤，上调了Nrf2/HO-1，改善了生理指标，显著降低了细胞凋亡和炎症因子，上调了HO-1，尤其是在照射后48小时。总之，Nrf2在放射性肠损伤的早期被激活，并起到保护作用。RTP通过调节Nrf2及其下游蛋白HO-1显著改善辐射诱导的肠损伤。

关键词：HO-1；Nrf2；辐射性肠炎；多糖。

©作者2020。牛津大学出版社代表日本放射研究学会和日本放射肿瘤学学会出版。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
RTP能显著提高辐射后大鼠的生存指数。(A类)卡普兰-迈耶生存曲线。(B)大鼠体重的动态变化。(C类)辐照前后食物摄入量的动态变化。(D类)辐照前后摄入量的动态变化。(E类)照射前后腹泻评分的变化。(F类)腹泻标准示意图（数字表示腹泻评分，从0到3分）。^**P（P）* < 0.05.

**图2。**
IR组和IR+RTP组大鼠的肠道变化。显示了照射前（0小时）和照射后（1–168小时）大鼠肠道的微观变化。苏木精伊红染色（×100）。黄色双箭头表示粘膜厚度、充血和肿胀，红色方框表示肠腺。

**图3。**
空肠蛋白质和mRNA表达的动态变化。(A类)Western blotting显示细胞核中Nrf2蛋白表达的动态变化。(B)Western blotting显示细胞液中Nrf2和HO-1蛋白表达的动态变化。灰度值计算(C类)细胞核中的Nrf2蛋白(D类)胞浆中的Nrf2蛋白(E类)胞浆中的HO-1蛋白(F类)Nrf2 mRNA和(**G公司**)HO-1 mRNA。^**P（P）* < 0.05.

**图4。**
大鼠氧化应激生化指标及免疫组化分析。确定(A类)MDA、(B)SOD和(C类)谷胱甘肽含量。^**P（P）* < 0.05,^***P（P）* < 0.01,^****P（P）*<0.001，ns=不显著。(D类)Nrf2、Ki-67和caspase-3的免疫组织化学分析。蓝色箭头表示典型的阳性细胞。

**图5。**
RTP能提高照射后细胞的存活率，减少IEC-6细胞的凋亡。(A类)CCK-8细胞活力测试(^**P（P）* < 0.05,^***P（P）* < 0.01,^****P（P）*<0.001，ns=不显著）。(B)细胞凋亡的Hoechst试验（白色箭头表示凋亡小体）。(C类)Annexin V-FITC对细胞凋亡的影响：Q2-1区表示坏死，Q2-2区表示晚期凋亡，Q2-4区表示早期凋亡，Q2-3区表示正常细胞。

**图6。**
IEC-6电池中各种指标的检测。(A类)Western blotting显示细胞核中Nrf2和NF-κB蛋白的表达。(B)Western blotting显示Nrf2、HO-1和caspase-3蛋白在胞浆中的表达。灰度值计算(C类)Nrf2和NF-κB核蛋白和(D类)Nrf2、HO-1和caspase-3细胞溶质蛋白。(E类和我)细胞中的Nrf2免疫荧光：红色荧光表示Nrf2的表达，蓝色荧光表示对细胞核的DAPI反应，Merge后的白色箭头表示细胞核中Nrf2表达。(F类)ROS分析。(**G公司**)ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10。(**H（H）**)Nrf2和HO-1的mRNA表达。^**P（P）* < 0.05,^***P（P）* < 0.01,^****P（P）*<0.001。

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