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.2020年10月；46(4):1367-1376.
doi:10.3892/ijmm.2020.4678。 Epub 2020年7月17日。

隐形眼镜护理液和隐形眼镜佩戴者泪液的微生物组分析：链球菌抗原可能参与与隐形眼镜佩戴相关的过敏症状

福美卡热塔 1, 平口浩史 1, 中山英树（Haruyuki Nakayama-Imaohji） 2, 久原聪美 2, 阿亚诺·塔达 2, 八木博文 2, 下村义幸（Yoshikazu Shimomura） 三, 久坂顺治 1
附属公司

隐形眼镜护理液和隐形眼镜佩戴者泪液的微生物组分析：链球菌抗原可能参与与隐形眼镜佩戴相关的过敏症状

福美卡热塔等。 国际分子医学杂志. 2020年10月.

摘要

本研究通过使用分子生物学技术检测隐形眼镜存放病例和AS患者眼泪中的CL护理液，阐明了与佩戴隐形眼镜（CL）相关的过敏症状（AS）的发病机制。共从AS患者（n=9）和健康、无症状对照CL佩戴者（n=6）收集了15例CL储存病例。通过培养和16S rDNA测序分析CL护理液和眼泪中的细菌种群。用高效液相色谱法测定眼泪中的组胺水平。Western blot分析鉴定AS患者泪液IgE识别的细菌。AS患者与无症状患者的培养结果无显著差异。在2名AS患者中检测到组胺。Meta‑16S rDNA测序确定了4名AS患者的集群，通过主坐标分析将其与其他患者区分开来。详细的人群分析显示，AS受试者使用的CL护理液微生物群中革兰氏阳性菌的丰度高于无症状受试者（42.24±9.47 vs.16.85±22.76%丰度）。其中，链球菌属占优势（丰度12.1‑18.3%）。泪液微生物群分析显示，AS患者的链球菌丰度显著高于其他患者（19.02±5.50 vs.3.08±3.35%，P<0.01）。Western blot分析表明，所有AS患者的泪液IgE与链球菌（100%）发生反应，但与葡萄球菌无反应。总的来说，这些结果为AS的发病机制提供了新的见解，并确定链球菌是AS中与CL磨损相关的重要因素。

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数字

图1
图1
隐形眼镜护理液的微生物组分析。（A） CL护理解决方案的PCoA。黑点表示健康受试者，白点表示AS受试者。PCoA在AS受试人的CL护理溶液中观察到三种污染模式。（B） 每个CL护理液中丰度>5%的代表性细菌属。唯一包含CL-I组的CL护理解决方案链球菌（以洋红色显示）是污染物的主要成分。PCoA，主坐标分析；CL，隐形眼镜；AS，过敏症状；OTU，操作分类单元；一、 CL-I组；二、 CL-II组；三、 CL-III组。（C） 香农-韦弗指数。CL-I组的Shannon-Weaver指数显著高于其他AS患者或健康受试者。*P<0.01。
图2
图2
泪液的微生物组分析。（A） 泪液的PCoA。黑点表示健康受试者，白点表示过敏症状（AS）受试者。根据隐形眼镜（CL）护理液中微生物群模式的分组，AS受试者的泪液明显分离。（B） 每种泪液中丰度>5%的代表性细菌属。所占比例链球菌CL-I组泪液中的含量显著高于其他受试者。（C） CL护理液和泪液中微生物成分的比较。白色圆圈表示AS患者的泪液，黑色圆圈表示健康患者的泪水，白色方块表示AS患者CL护理液，黑色方块表示健康患者CL治疗液。CL-I组的CL护理液和泪液中的微生物通过PCoA紧密聚集。主坐标分析；CL，隐形眼镜；AS，过敏症状；OTU，操作分类单元；一、 CL-I组；二、 CL-II组；三、 CL-III组。
图3
图3
使用泪液进行Western斑点杂交。（A） western斑点杂交的排列。硝化纤维素膜分为12个部分。人IgE阳性对照；SA，细菌细胞悬液金黄色葡萄球菌; 脑心灌注；阴性对照，StrP-sup，培养上清液肺炎链球菌; StrT-sup，培养上清液老虎街; SC sup，培养上清液头状链球菌; SE sup，培养上清液表皮葡萄球菌; StrP，细菌细胞悬液肺炎链球菌; StrT，细菌细胞悬液老虎街; SC，细菌细胞悬液美国国会大厦; SE，细菌细胞悬液表皮葡萄球菌（B）硝化纤维膜的图像。IgE与细菌细胞悬液的结合肺炎链球菌和老虎街在过敏症状（AS）受试者和健康受试者的泪液中检测到。
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