TET2 directs mammary luminal cell differentiation and endocrine response

doi:10.1038/s41467-020-18129-w

.2020年9月15日；11(1):4642.

doi:10.1038/s41467-020-18129-w。

TET2指导乳腺管腔细胞分化和内分泌反应

Mi Ran Kim（米冉·金）^#¹, 吴梦菊^#^2 三, 张英生^4 5, Jer-Yen Yang（杨洁篪）^6 7 8, Chun Ju Chang先生^9 10 11

附属公司

¹美国印第安纳州拉斐特常春藤技术社区学院科学、艺术与教育学院。
²美国马萨诸塞州波士顿市马萨诸塞总医院癌症研究中心。
^三哈佛医学院医学系，美国马萨诸塞州波士顿。
⁴美国加利福尼亚州洛杉矶Cedars-Sinai医疗中心医学和生物科学部。
⁵Cedars-Sinai Samuel Oschin综合癌症研究所，美国加利福尼亚州洛杉矶。
⁶中国医科大学医学院生物医学研究生院，台中，40402，台湾。jyyang@mail.cmu.edu.tw。
⁷中国医科大学癌症生物学研究中心，台中，40402，台湾。jyyang@mail.cmu.edu.tw。
⁸美国纽约州布法罗市罗斯韦尔公园综合癌症中心医学部，19263年。jyyang@mail.cmu.edu.tw发送。
⁹中国医科大学医学院生物医学研究生院，台中，40402，台湾。achang68@mail.cmu.edu.tw。
¹⁰中国医科大学癌症生物学研究中心，台中，40402，台湾。achang68@mail.cmu.edu.tw。
¹¹美国纽约州布法罗市罗斯威尔公园综合癌症中心医学部，19263年。achang68@mail.cmu.edu.tw。

^#贡献均等。

PMID： 32934200
预防性维修识别码：项目管理委员会7493981
内政部： 10.1038/s41467-020-18129-w

TET2指导乳腺管腔细胞分化和内分泌反应

Mi Ran Kim（米冉·金）等。国家公社. 2020.

.2020年9月15日；11(1):4642.

doi:10.1038/s41467-020-18129-w。

作者

Mi Ran Kim（米冉·金）^#¹, 吴梦菊^#^2 三, 张英生^4 5, Jer-Yen Yang（杨洁篪）^6 7 8, Chun Ju Chang先生^9 10 11

附属公司

¹美国印第安纳州拉斐特常春藤技术社区学院科学、艺术与教育学院。
²美国马萨诸塞州波士顿市马萨诸塞总医院癌症研究中心。
^三美国马萨诸塞州波士顿哈佛医学院医学系。
⁴美国加利福尼亚州洛杉矶Cedars-Sinai医疗中心医学和生物科学部。
⁵Cedars-Sinai Samuel Oschin综合癌症研究所，美国加利福尼亚州洛杉矶。
⁶中国医科大学医学院生物医学研究生院，台中，40402，台湾。jyyang@mail.cmu.edu.tw。
⁷中国医科大学癌症生物学研究中心，台中，40402，台湾。jyyang@mail.cmu.edu.tw。
⁸美国纽约州布法罗市罗斯韦尔公园综合癌症中心医学部，19263年。jyyang@mail.cmu.edu.tw。
⁹中国医科大学医学院生物医学研究生院，台中，40402，台湾。achang68@mail.cmu.edu.tw发送。
¹⁰中国医科大学癌症生物学研究中心，台中，40402，台湾。achang68@mail.cmu.edu.tw。
¹¹美国纽约州布法罗市罗斯韦尔公园综合癌症中心医学部，19263年。achang68@mail.cmu.edu.tw。

^#贡献均等。

PMID： 32934200
预防性维修识别码：项目管理委员会7493981
内政部： 10.1038/s41467-020-18129-w

摘要

表观遗传调控在调控干细胞命运和肿瘤发生中起着重要作用。关键DNA去甲基化酶TET2的缺失表达与人类癌症相关，并与体外干细胞特性相关；然而，TET2是否以及如何在体内调节乳腺干细胞命运和乳腺肿瘤发生仍有待确定。在这里，使用我们最近建立的乳腺特异性Tet2缺失小鼠模型，数据显示Tet2在乳腺发育和管腔谱系承诺中起着关键作用。我们发现TET2和FOXP1形成一个染色质复合体，它介导ESR1、GATA3和FOXA1的去甲基化，这三个关键基因被认为协调了乳腺管腔谱系规范和内分泌反应，并且在侵袭性乳腺癌中经常因DNA甲基化而沉默。此外，Tet2缺失-PyMT乳腺癌小鼠模型显示，ERα表达不足可增强乳腺癌的发展，从而在体内产生三苯氧胺抵抗。因此，本研究阐明了TET2在调节管腔细胞分化和内分泌反应中的作用，这是乳腺癌抗雌激素治疗的基础。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有相互竞争的利益。

数字

**图1。TET2缺失导致小叶肺泡发育失调和管腔谱系承诺受损。**
一免疫印迹显示TET2蛋白在WT、HET和KO乳腺组织中的表达。b条,**c（c）**对7周龄WT、HET和KO处女小鼠的乳腺组织进行全山、H&E和Masson三色染色。箭头表示胶原富集纤维化区域的淡蓝色染色（比例尺：50 微米）。d日,**e（电子）**WT、HET和KO怀孕小鼠乳腺组织的H&E染色（第18.5天，比例尺：50 μm）和哺乳期小鼠（第10天，比例尺：200 微米）。箭头指示怀孕小鼠组织中的脂滴(d日)哺乳期小鼠组织中的牛奶(**e（电子）**)分别是。如果免疫印迹显示β-酪蛋白和雌激素受体-α（ERα）的表达。克流式细胞术分析显示基础MaSC富集细胞群的百分比（MaSCe，Lin⁻CD24型⁺CD29型^你好，用红圈表示）和管腔细胞群（Lum，Lin⁻CD24型⁺CD29型^洛，用绿色圆圈表示），以及小时基础MaSC富集细胞群的百分比（MaSCe，Lin⁻CD24型⁺CD29型^你好CD61型^你好，用红色圆圈表示），管腔祖细胞群（LP，Lin⁻CD24型⁺CD29型^洛第61页^你好和成熟管腔细胞群（ML，Lin⁻CD24型⁺CD29型^洛CD61型^洛，用绿色圆圈表示）与n个 = 7周龄WT、HET和KO雌性小鼠的3个生物学上独立的乳腺上皮细胞样本(n个 = 3只动物/组）。我代表性图像和主要乳房球体的数量（比例尺：50 μm）由WT、HET和KO乳腺上皮细胞每1000个种子细胞产生(n个 = 3个独立实验），以及j个WT和KO细胞产生的连续传代球体的数量(n个 = 3个独立实验）。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-值由双边学生t吨-测试；星号表示第页 < 0.05，双星号表示第页 < 0.01（与WT相比）。k个,我7周龄WT和KO雌性小鼠乳腺中CK8与CK14或MUC1与SMA共染色的典型共焦免疫荧光图像（比例尺：50 微米）。源数据作为源数据文件提供。

**图2。TET2–FOXP1转录复合物介导与管腔细胞分化相关的基因表达。**
一,b条所示基因和蛋白质的表达水平（ERα、GATA3、FOXA1、，n个 = 3只动物/组），**c（c）**斑点杂交显示总5hmc水平和5hmc折叠变化（KO vs.WT），d日5hmc的褶皱富集*高级服务1*,*加塔3*、和*福克斯1*7周龄WT和KO雌性小鼠乳腺上皮细胞的基因(n个 = 3只动物/组）。**e（电子）**热图显示基于差异DNA甲基化的样本可视化和分组，以及如果条形图显示7周龄WT和KO雌性小鼠（WTn个 = 3、KOn个 = 2只动物）。克提供DNA甲基化状态可视化的典型甲基化轨迹*高级服务1*来自7周龄WT和KO雌性小鼠（WTn个 = 3、KOn个 = 2只动物）。小时靶向亚硫酸氢盐甲基化水平分布*高级服务1*分选的MaSC富集细胞（Stem，Lin⁻CD24型⁺CD29型^你好)和亮度细胞（Lum，Lin⁻CD24型⁺CD29型^洛)来自7周龄WT和KO雌性小鼠(n个 = 3只动物/组）。箱线图将第二个四分位数（中间值）显示为黄色线，第一个四分位和第三个四分位分别显示为方框的底界和上界。上部晶须从长方体的上边缘延伸到距离边缘不超过1.5*IQR（四分位范围）的最大值。较低的须状物从盒子的下边缘延伸到距离边缘至多1.5*IQR的最小值。我双向免疫共沉淀显示小鼠乳腺上皮细胞内源性FOXP1和TET2相互作用。j个显示FOXP1–TET2复合体褶皱富集的条形图*高级服务1*,*加塔3*、和*福克斯1*使用连续ChIP-qPCR分析的调节元件（n = 3个独立实验）。k个,我的表达式*高级服务1*,*加塔3*、和*福克斯1*7周龄WT雌性小鼠乳腺上皮细胞中稳定表达shFOXP1或对照载体的基因及其蛋白水平(n个 = 3个独立实验）。米FOXP1的折叠富集*高级服务1*,*加塔3*、和*福克斯1*WT和KO乳腺上皮细胞的调控元件(n个 = 3个独立实验）。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-值由双边学生t吨-测试；星号表示第页 < 0.05，双星号表示第页 < 0.01. 源数据作为源数据文件提供。

**图3。TET2表达缺失在体外产生内分泌阻力。**
一剂量-反应曲线显示EC50存活细胞的标准化百分比(n个 = 3个独立实验），以及b条 *高级服务1*,*Pgr公司*、和*格雷1*从7周龄WT和KO雌性小鼠分离并用雌二醇（E2，10）处理的乳腺上皮细胞的表达水平⁻⁷ M）或控制车辆72 小时(n个 = 3个独立实验）。**c（c）**剂量-反应曲线显示EC50存活细胞的标准化百分比(n个 = 3个独立实验），以及d日 *高级服务1*,*Pgr公司*、和*格雷1*从7周龄WT和KO雌性小鼠分离并用三苯氧胺处理的乳腺上皮细胞的表达水平（10⁻⁷ M）或24小时控制车辆小时(n个 = 3个独立实验）。**e（电子）**TET2和ERα的蛋白表达，以及如果 *ESR1系列*和*绿色1*稳定表达CRISPR-TET2（CRISPR-KO）或载体（CRISPR-WT）的MCF7细胞中的基因表达水平(n个 = 3个独立实验）。克,小时剂量-反应曲线显示了经克雌二醇（E2）或对照药物(n个 = 3个独立实验），小时三苯氧胺或对照剂在无酚红木炭剥离FBS介质中72 小时(n个 = 3个独立实验）。我用三苯氧胺（5 × 10⁻⁶ M）或控制车辆(n个 = 4个独立实验）。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-值由双边学生t吨-测试；星号表示第页 < 0.05，双星号表示第页 < 0.01. 源数据作为源数据文件提供。

**图4。TET2表达缺失促进体内肿瘤发生和三苯氧胺抵抗。**
一5周龄Tet2小鼠乳腺中H&E、Cre、Ki67和ERα的代表性免疫染色图像^（f）/+；PyMT（WT-PyMT）和MMTV-Core；测试2^（f）/+；PyMT（MUT-PyMT）雌性小鼠。箭头表示癌前增生形态（比例尺：50 微米）。b条流式细胞术分析显示基础MaSC富集人群的百分比（MaSCe，Lin^-CD24型⁺CD29型^你好，由红圈和管腔细胞群表示（Lum，Lin⁻CD24型⁺CD29型^洛（蓝色圆圈表示）从6周龄WT-PyMT和MUT-PyMT雌性小鼠中分离(n个 = 3只动物/组）。**c（c）**显示CK8（红色）和CK14（绿色）在7周龄WT PyMT和MUT PyMT雌性小鼠的乳腺中共染色的代表性免疫荧光图像（比例尺：50 μm），以及d日显示CK14百分比的条形图⁺CK8（CK8）⁻，CK14⁻CK8型⁺和CK14⁺CK8（CK8）⁺细胞。n个 = 从每组两只动物的8个独立组织切片染色图像中分析8个数据点。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-数值由双侧Student’s确定t吨-在指定的两组之间进行测试；星号表示第页 < 0.05.e（电子）从12-13周龄的WT-PyMT和MUT-PyMT雌性小鼠收集的所有肿瘤的肿瘤大小。n个 = 11 WT-PyMT肿瘤和n个 = 每组从三只动物中收集19个MUT-PyMT肿瘤。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-值由双边学生t吨-在指定的两组之间进行测试；星号表示第页 < 0.05.如果5周龄和8周龄WT-PyMT和MUT-PyMT雌性小鼠的肺组织（比例尺：50 微米）。黑色椭圆表示转移灶。克显示每个肺/动物经组织学鉴定的转移位点数量的条形图(n个 = 5只动物/组）。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-值由双边学生t吨-在指定的两组之间进行测试；星号表示第页 < 0.05.小时,我用模拟对照载体、玉米油或三苯氧胺（i.p.25）治疗7周龄WT-PyMT和MUT-PyMT雌性小鼠的肿瘤大小和肿瘤表型 mg/kg）连续4周每周连续5天每天(n个 = 6只动物/组）。箭头表示正常单层导管上皮形态（比例尺：100μm）。数据表示为平均值 ± 标准偏差。第页-值由双边学生t吨-测试；星号表示第页 < 0.05.j个TET2和ERα的代表性免疫染色图像，以及k个83例管腔型乳腺癌和三阴性乳腺癌的人类乳腺肿瘤标本中TET2和ERα表达的卡方分析。（−）：阴性/低染色，（+）：阳性/高染色（比例尺：50 微米）。星号表示第页 < 0.05; 双星号表示第页 < 0.01. 源数据作为源数据文件提供。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

TET2通过增强子去甲基化共同激活基因表达。
Wang L、Ozark PA、Smith ER、Zhao Z、Marshall SA、Rendleman EJ、Piunti A、Ryan C、Whelan AL、Helmin KA、Morgan MA、Zou L、Singer BD、Shilatifard A。王磊等。 2018年11月7日科学进展；第4（11）页：第6986页。doi:10.1126/sciadv.aau6986。eCollection 2018年11月。 2018年科学进展。 PMID：30417100 免费PMC文章。
肿瘤抑制因子TET2保护增强子免受ERα阳性乳腺癌细胞中异常DNA甲基化和表观遗传学重编程的影响。
Lyu R、Zhu X、Shen Y、Xiong L、Liu L、Liw H、Wu F、Argueta C、Tan L。 Lyu R等人。表观遗传学。2022年10月；17(10):1180-1194. doi:10.1080/15592294.2021.1997405。Epub 2021年10月30日。表观遗传学。2022 PMID：34689714 免费PMC文章。
维甲酸通过调节TET2-PKCζ通路来指导乳腺癌细胞状态的改变。
Wu MJ、Kim MR、Chen YS、Yang JY、Chang CJ。吴美杰等。致癌物。2017年6月1日；36(22):3193-3206. doi:10.1038/onc.2016.467。Epub 2017年2月20日。致癌物。2017 PMID：28218902 免费PMC文章。
雌激素受体-α信号在产后乳腺发育和乳腺癌中的作用。
RusidzéM、Adlanmérini M、Chantalat E、Raymond-Letron I、Cayre S、Arnal JF、Deugnier MA、Lenfant F。 RusidzéM等人。细胞分子生命科学。2021年8月；78(15):5681-5705. doi:10.1007/s00018-02-03860-4。Epub 2021年6月22日。细胞分子生命科学。2021 PMID：34156490 免费PMC文章。审查。
Ten-Eleven Translocation-2（TET2）基因在造血和造血疾病中的作用。
Solary E、Bernard OA、Tefferi A、Fuks F、Vainchenker W。 Solary E等人。白血病。2014年3月；28(3):485-96. doi:10.1038/leu.2013.337。Epub 2013年11月13日。白血病。2014 PMID：24220273 审查。

查看所有类似文章

引用人

TET酶和5hmC水平在乳腺癌发生和进展中的作用：潜在的治疗靶点。
Salmerón-Bárcenas EG、Zacapla-Gómez AE、Torres-Rojas FI、Antonio-Véjar V、Al vila-López PA、Baños-Hernández CJ、nüñez-Martínez HN、Dircio-Maldonado R、Martínez-Carrillo DN、Ortiz-Ortiz J、Jiménez-Wences H。 Salmerón-Bárcenas EG等人。国际分子科学杂志。2023年12月24日；25(1):272. doi:10.3390/ijms25010272。国际分子科学杂志。2023 PMID：38203443 免费PMC文章。审查。
Mcam通过非规范Wnt信号抑制巨噬细胞介导的乳腺发育。
Yang X、Xu H、Yang X、Wang H、Zou L、Yang Q、Qi X、Li L、Duan H、Yan X、Fu NY、Tan J、Hou Z、Jiao B。 Yang X等人。国家公社。2024年1月2日；15(1):36. doi:10.1038/s41467-023-44338-0。国家公社。2024 PMID：38167296 免费PMC文章。
靶向耐药细胞：克服癌细胞获得性耐药的一种有希望的策略。
Song X、Lan Y、Zheng X、Zhu Q、Liao X、Liu K、Zhang W、Peng Q、Zhu Y、Zhao L、Chen X、Shu Y、Yang K、Hu J。 Song X等人。 MedComm（2020年）。2023年8月24日；4（5）：e342。doi:10.1002/mco2.342。eCollection 2023年10月。 MedComm（2020年）。2023 PMID：37638338 免费PMC文章。审查。
TET（Ten-eleven易位）家族蛋白质：结构、生物学功能和应用。
张X，张Y，王C，王X。张X等。信号传输目标热。2023年8月11日；8(1):297. doi:10.1038/s41392-023-01537-x。信号传输目标热。2023 PMID：37563110 免费PMC文章。审查。
连续哺乳期间小鼠乳腺组织中DNA甲基化和基因表达的变化：第二部分-哺乳等级的影响。
Ivanova E、Hue-Beauvais C、Chaulot-Talmon A、Castille J、Laubier J、De Casanove C、Aubert-Frambourg A、German P、Jammes H、Le Provost F。 Ivanova E等人。表观遗传学。2023年12月；18(1):2215620. doi:10.1080/15592294.2023.2215620。表观遗传学。2023 PMID：37219968 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Reya T、Morrison SJ、Clarke MF、Weissman IL。干细胞、癌症和癌症干细胞。自然。2001;414:105–111.-公共医学
1. Visvader JE。了解乳腺上皮层次结构和乳腺肿瘤发生。基因开发2009；23:2563–2577.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Visvader JE，Stingl J.乳腺干细胞和分化层次：现状和前景。基因开发2014；28:1143–1158.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Martin-Belmonte，F.&Perez-Moreno，M.上皮细胞极性，干细胞与癌症。《Nat.Rev.Cancer12，23-38》（2012年）。-公共医学
1. Lunyak VV，Rosenfeld MG.干细胞命运的表观遗传调控。嗯，分子遗传学。2008;17：R28–R36。-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

赠款和资金

[1] Reya T、Morrison SJ、Clarke MF、Weissman IL。干细胞、癌症和癌症干细胞。自然。2001;414:105–111.-公共医学

[2] Reya T、Morrison SJ、Clarke MF、Weissman IL。干细胞、癌症和癌症干细胞。自然。2001;414:105–111.-公共医学

[3] Visvader JE。了解乳腺上皮层次结构和乳腺肿瘤发生。基因开发2009；23:2563–2577.-项目管理咨询公司-公共医学

[4] Visvader JE。了解乳腺上皮层次结构和乳腺肿瘤发生。基因开发2009；23:2563–2577.-项目管理咨询公司-公共医学

[5] Visvader JE，Stingl J.乳腺干细胞和分化层次：现状和前景。基因开发2014；28:1143–1158.-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Visvader JE，Stingl J.乳腺干细胞和分化层次：现状和前景。基因开发2014；28:1143–1158.-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Martin-Belmonte，F.&Perez-Moreno，M.上皮细胞极性，干细胞与癌症。《Nat.Rev.Cancer12，23-38》（2012年）。-公共医学

[8] Martin-Belmonte，F.&Perez-Moreno，M.上皮细胞极性，干细胞与癌症。《Nat.Rev.Cancer12，23-38》（2012年）。-公共医学

[9] Lunyak VV，Rosenfeld MG.干细胞命运的表观遗传调控。嗯，分子遗传学。2008;17：R28–R36。-公共医学

[10] Lunyak VV，Rosenfeld MG.干细胞命运的表观遗传调控。嗯，分子遗传学。2008;17：R28–R36。-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

TET2指导乳腺管腔细胞分化和内分泌反应

附属公司

TET2指导乳腺管腔细胞分化和内分泌反应

作者

附属公司

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金