MicroRNA-93-5p promotes epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer by repressing tumor suppressor AHNAK expression

doi:10.1186/s12935-019-1092-7

.2020年3月12日20:76。

doi:10.1186/s12935-019-1092-7。 eCollection 2020。

MicroRNA-93-5p通过抑制肿瘤抑制因子AHNAK的表达促进胃癌上皮间质转化

沈尔东^1 2, 王欣（Xin Wang）¹, 刘欣（Xin Liu）¹, 吕明月¹, 梁张^三, 朱国莲⁴, 孙哲¹

附属公司

¹1中华人民共和国辽宁省沈阳市和平区南京北路155号中国医科大学第一附属医院教育部消化道肿瘤精确诊断与治疗重点实验室肿瘤外科与普外科。
²中国岳阳市第一人民医院肿瘤科，岳阳，414000。
^三中国医科大学肿瘤医院胸外科/辽宁省肿瘤医院，沈阳，110001。
⁴4沈阳市第五人民医院肿瘤科，沈阳，110001。

PMID： 32190000
预防性维修识别码：项目管理委员会7066804
内政部： 10.1186年/12935-019-1092-7年

MicroRNA-93-5p通过抑制肿瘤抑制因子AHNAK的表达促进胃癌上皮间质转化

沈二东等。癌细胞Int. 2020.

.2020年3月12日20:76。

doi:10.1186/s12935-019-1092-7。 eCollection 2020。

作者

沈二东^1 2, 王欣（Xin Wang）¹, 刘欣（Xin Liu）¹, 吕明月¹, 梁张^三, 朱国莲⁴, 孙哲¹

附属公司

¹1中华人民共和国辽宁省沈阳市和平区南京北路155号中国医科大学第一附属医院教育部消化道肿瘤精确诊断与治疗重点实验室肿瘤外科与普外科。
²中国岳阳市第一人民医院肿瘤科，邮编414000。
^三中国医科大学肿瘤医院胸外科/辽宁省肿瘤医院，沈阳，110001。
⁴4沈阳市第五人民医院肿瘤科，沈阳，110001。

PMID： 32190000
预防性维修识别码：采购订单7066804
内政部： 10.1186/s12935-019-1092-7

摘要

背景：胃癌（GC）是全世界癌症相关死亡的常见原因，而microRNAs（miRNAs）已被证明在GC的发展中起着重要作用。本研究旨在通过AHNAK和Wnt信号通路，探讨microRNA-93-5p（miR-93-5p）对GC中上皮-间充质转化（EMT）的影响。

方法：基于微阵列的基因表达分析用于识别与GC相关的差异表达miRNAs和基因。然后检测miR-93-5p在GC组织和GC细胞系中的表达。miR-93-5p和AHNAK之间的靶向关系通过双荧光素酶报告基因分析得到验证。为了确定miR-93-5p在GC中的作用，将miR-93-5 p模拟物或抑制剂以及AHNAK过表达载体引入HGC-27细胞。采用Transwell法和western blot法检测HGC-27细胞迁移和侵袭能力以及EMT。还使用TOP/FOP闪光荧光素酶分析评估Wnt信号通路的调节。

结果：miR-93-5p在GC组织样品和细胞中高度表达。值得注意的是，miR-93-5p可以靶向并负向调节AHNAK。miR-93-5p的下调或AHNAK的过度表达，除了通过Wnt信号通路的失活抑制GC细胞中的EMT外，还可以抑制迁移和侵袭能力。

结论：总之，miR-93-5p的下调通过靶向AHNAK的Wnt信号通路减弱GC的发展。这些发现增强了对miR-93-5p作为GC治疗靶点的认识。

关键词：阿纳克；上皮-间充质转化；胃癌；入侵；微小核糖核酸-93-5p；移民；Wnt信号通路。

©作者2020。

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竞争性利益作者声明他们没有竞争性利益。

数字

图1
微阵列分析确定了本研究中GC相关样本中高表达的miR-93-5p。一GC-related expression dataset中差异表达miRNAs的交叉。左圆圈是GSE93415表达数据集中前20个差异表达的miRNAs。右圆圈是GSE78091表达数据集中前20个差异表达的miRNAs。中间部分表示两个表达式数据集的交集。b条GSE93415表达数据集中差异表达miRNA的热图。横坐标表示样本数，纵坐标表示miRNA名称，左树状图表示差异表达的miRNA表达簇。图中的每个小方框表示一个样本中一个基因的表达。右上角的直方图是颜色分级。**c（c）**GSE78091表达数据集中miR-93-5p的表达，横坐标表示样本类型，纵坐标表示表达数据集中的miR-93-5 p表达第页值位于左上角，左方框图表示正常样本中miR-93-5p的表达，右方框图表示肿瘤组中miR-93-5p的表示

图2
在GC组织和GC细胞系中测定上调的miR-93-5p表达。一miR-93-5p在胃癌组织及癌旁组织中的表达（n = 95).b条,**c（c）**miR-93-5p在不同病理阶段GC组织中的表达。d日,**e（电子）**GC患者总生存率和DFS的Kaplan–meier生存率分析。绿色代表miR-93-5p高表达患者，蓝色代表miR-93-5p低表达患者。**（f）**miR-93-5p在永生化人胃粘膜上皮细胞系和GC细胞系中的表达。数据是测量数据，表示为平均值 ± 标准偏差。学生的t吨-试验用于两组之间的比较。多组间比较采用单因素方差分析。细胞实验重复3次*第页 < 0.05, **第页 < 0.01, ***第页 < 0.001，以及****第页 < 0.0001

图3
抑制miR-93-5p抑制HGC-27细胞迁移、侵袭和EMT。一Transwell法测定GC细胞的迁移和侵袭能力（×200）。空白组：未转染任何质粒的HGC-27细胞；抑制剂NC组：转染miR-93-5p NC的HGC-27细胞；miR-93-5p抑制剂组：转染miR-93-5抑制剂的HGC-27细胞。b条,**c（c）**通过Transwell分析和定量分析确定GC细胞的迁移和侵袭能力。d日抑制剂NC或miR-93-5p抑制剂（×100）转染HGC-27细胞后的形态学特征。**e（电子）**免疫荧光法测定EMT相关标记物（E-cadherin、Vimentin和蜗牛）的表达（×400）。**（f）**AHNAK、E-cadherin、Vimentin和蜗牛表达的Western blot分析和定量分析。数据是测量数据，表示为平均值 ± 标准偏差。多组间比较采用单因素方差分析。细胞实验重复三次*第页 < 0.05, **第页 < 0.01, ***第页 < 0.001，以及****第页 < 0.0001

图4
AHNAK是miR-93-5p的靶基因。一GSE2685表达数据集中差异表达mRNA的热图。横坐标表示差异第页值，坐标表示logFC。图中的每个小点表示一个基因，其中红色表示GC中表达显著上调的基因，绿色表示GC中的表达显著下调的基因，黑色表示没有差异表达的基因。b条GSE2685表达数据集中miR-93-5p靶向基因预测和下调基因的交叉点。左圆圈表示TargetScan数据库中目标基因的预测，右圆圈表示GSE2685表达数据集中下调的基因，中间部分表示交叉。**c（c）**miR-93-5p与AHNAK 3′UTR和OPCML 3′UTRs的结合位点。d日双荧光素酶报告基因检测以验证miR-93-5p和AHNAK之间的靶向关系。**e（电子）**Western印迹分析以确定AHNAK在永生化的人胃粘膜上皮细胞系和GC细胞系中的表达。**（f）**Western blot分析研究miR-93-5p对AHNAK表达的影响。数据是测量数据，表示为平均值 ± 标准偏差。多组间比较采用单因素方差分析。细胞实验重复三次*第页 < 0.05, **第页 < 0.01, ***第页 < 0.001，以及****第页 < 0.0001

图5
AHNAK上调抑制HGC-27细胞迁移、侵袭和EMT。一Transwell法研究AHNAK对HGC-27细胞侵袭和迁移（×200）的影响。空白组：未转染任何质粒的HGC-27细胞；空载体组：转染空载体的HGC-27细胞；AHNAK组：转染AHNAK过表达质粒的HGC-27细胞。b条定量分析过表达AHNAK在HGC-27细胞迁移和侵袭中的作用。**c（c）**AHNAK过度表达后EMT标记物E-cadherin、Vimentin和蜗牛表达的Western blot分析。d日miR-93-5p模拟和过表达AHNAK在HGC-27细胞侵袭和迁移中的作用的Transwell分析（×200）。模拟NC + 空载体组：HGC-27细胞与模拟NC和空载体共转染；miR-93-5p模拟 + 空载体组：miR-93-5p模拟物与空载体共转染HGC-27细胞；miR-93-5p模拟 + AHNAK组：用miR-93-5p模拟物和AHNAK联合转染HGC-27细胞。**e（电子）**定量分析过表达AHNAK在HGC-27细胞迁移和侵袭中的作用。**（f）**miR-93-5p和AHNAK过度表达后EMT标记物E-cadherin、Vimentin和蜗牛表达的western blot分析。数据是测量数据，表示为平均值 ± 标准偏差。多组间比较采用单因素方差分析。细胞实验重复三次*第页 < 0.05, **第页 < 0.01, ***第页 < 0.001，以及****第页 < 0.0001

图6
抑制miR-93-5p通过上调AHNAK表达抑制Wnt信号通路。一Western印迹分析以测量Wnt信号通路相关因子Wnt-1、β-catenin和p-β-catenin的表达。b条TOP/FOP闪光测定各组的β-catenin-TCF/LEF转录活性。在测量之前，将细胞与TOP flash或FOP flashs和Renilla质粒共转染48小时。计算了萤火虫荧光素酶活性与雷尼拉荧光素酶活性的比值。数据为测量数据，以平均值表示 ± 标准偏差。多组间比较采用单因素方差分析。细胞实验重复三次*第页 < 0.05, **第页 < 0.01, ***第页 < 0.001，以及****第页 < 0.0001

图7
示意图描述了miR-93-5p在GC中的调节机制。miR-93-5p可以靶向AHNAK并激活Wnt信号通路以促进细胞迁移和侵袭能力，以及GC细胞中的EMT

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1. Chen W，Zheng R，Baade PD，Zhang S，Zeng H，Bray F，Jemal A，Yu XQ，He J.《中国癌症统计》，2015年。CA癌症临床杂志。2016;66(2):115–132. doi:10.3322/caac.21338。-内政部-公共医学
1. Tie J，Pan Y，Zhao L，Wu K，Liu J，Sun S，Guo X，Wang B，Gang Y，Zhang Y，et al.MiR-218通过靶向Robo1受体抑制胃癌的侵袭和转移。公共科学图书馆-遗传学。2010;6（3）：e1000879。doi:10.1371/journal.pgen.1000879。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
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[3] Chen W，Zheng R，Baade PD，Zhang S，Zeng H，Bray F，Jemal A，Yu XQ，He J.《中国癌症统计》，2015年。CA癌症临床杂志。2016;66(2):115–132. doi:10.3322/caac.21338。-内政部-公共医学

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