跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2019年12月17:10:1445。
doi:10.3389/fphys.2019.0145。 2019年eCollection。

下调miR-34a-5p通过刺激C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9的表达增强脂肪间充质干细胞对缺血性心肌梗死的保护作用

池峰翁 1, 吴青峰 2, 邵慧高 三, 陈真真（Jeen-Chen Chen） 2, 林慧涵 2
附属公司

下调miR-34a-5p通过刺激C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9的表达增强脂肪间充质干细胞对缺血性心肌梗死的保护作用

池峰翁等。 前生理学. .

摘要

脂肪衍生干细胞（ADSC）在心肌梗死（MI）的治疗中显示出巨大的前景，尽管其潜在的治疗机制尚不清楚。越来越多的证据表明，微RNA（miRNAs或miRs）参与了ADSC改善心血管疾病的生物学过程。在本研究中，我们探讨了miR-34a-5p下调对ADSC抗心肌梗死保护作用的贡献生物信息学分析。接下来，我们通过功能获得和丧失测试，测试了miR-34a-5p和CTRP9对细胞外信号调节激酶1（ERK1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、核因子（红系衍生2）样2（NRF2）和抗氧化蛋白[锰超氧化物歧化酶（MnSOD）和血红素加氧酶-1（HO-1）]表达的影响。在其他实验中，我们使用EdU试验、划痕试验、Transwell试验和流式细胞术评估ADSC的增殖、迁移和凋亡。最后，我们研究了miR-34a-5p/CTRP9轴在MI小鼠干细胞移植过程中是否能够调节ADSC对MI的保护作用。miR-34a-5p可靶向并下调心肌细胞中的CTRP9。下调miR-34a-5p增加ERK1、MMP-9、NRF2、MnSOD和HO-1的表达，而下调miR-35a-5p或上调CTRP9在体外促进ADSC增殖和迁移，抑制ADSC凋亡。此外，miR-34a-5p下调或CTRP9上调促进了ADSC对心肌梗死损伤的保护作用体内因此，miR-34a-5p的抑制可能通过刺激CTRP9的表达来促进ADSC对MI损伤的保护功能。

关键词：C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；脂肪干细胞；细胞凋亡；microRNA-34a-5p；迁移；心肌梗死；增殖。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
CTRP9是miR-34a-5p的靶基因。（A）预测CTRP9的miR-34a-5p和3′UTR之间的结合位点。（B）使用双荧光素酶报告基因分析检测荧光素酶活性。*对与模拟-NC组相比，<0.05。（C）western blot分析检测miR-34A-5p抑制剂对CTRP9表达的影响。#对与miR-34a-5p抑制剂-NC组相比，<0.05。两组之间的数据（平均值±标准差）由未配对的t吨-测试。实验重复了三次。CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；miR-34a-5p，microRNA-34a-5p；野生型；MUT，突变型；3′UTR，3′非翻译区；NC，阴性对照；标准偏差。
图2
图2
miR-34a-5p的下调促进CTRP9的表达。（A）RT-qPCR检测ADSC中ERK1、MMP-9、NRF2、MnSOD和HO-1的表达。（B、C）ADSC中ERK1、MMP-9、NRF2、MnSOD和HO-1蛋白的Western blot分析。*对与载体组相比<0.05；#对与sh-NC组相比<0.05；&对与miR-34a-5p抑制剂NC组相比，<0.05；@对与miR-34a-5p抑制剂组相比，<0.05；$对与DMSO组相比<0.05；%对与miR-34a-5p抑制剂+DMSO组相比，<0.05；采用单因素方差分析法分析多组数据（平均值±标准差），然后采用Tukey's事后（post-hoc）测试。单变量分析采用对数秩法。实验重复了三次。CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；miR-34a-5p、微小RNA-34a-5p；ERK1，细胞外信号调节激酶1；基质金属蛋白酶-9；NRF2，核因子（红细胞衍生2）样2；锰超氧化物歧化酶；血红素氧化酶-1；RT-qPCR，逆转录定量聚合酶链反应；脂肪源性干细胞；sh，短发夹；NC，阴性对照；二甲基亚砜；标准差；方差分析，方差分析。
图3
图3
miR-34a-5p下调通过上调CTRP9促进ADSC增殖在体外.（A、B）通过EdU分析测量各组ADSC增殖（蓝色代表Hoechst阳性细胞，红色代表EdU阳性细胞）（200×）。*对与载体组相比<0.05；#对与sh-NC组相比<0.05；&对与miR-34a-5p抑制剂NC组相比，<0.05；@对与miR-34a-5p抑制剂组相比，<0.05；$对与DMSO组相比<0.05；%对与miR-34a-5p抑制剂+二甲基亚砜组相比，<0.05。采用单因素方差分析法分析多组数据（平均值±标准差），然后采用Tukey's事后（post-hoc）测试。单变量分析采用对数秩法。实验重复了三次。CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；miR-34a-5p、微小RNA-34a-5p；脂肪源性干细胞；sh，短发夹；NC，阴性对照；乙二胺四乙酸，5-乙炔基-2′-脱氧尿苷；二甲基亚砜；标准差；方差分析，方差分析。
图4
图4
抑制miR-34a-5p促进ADSC迁移在体外通过上调CTRP9。（A、B）划痕试验检测转染后细胞迁移。（C、D）Transwell分析检测转染后细胞迁移（200×）。*对与载体组相比<0.05；#对与sh-NC组相比，<0.05；&对与miR-34a-5p抑制剂NC组相比，<0.05；@对与miR-34a-5p抑制剂组相比，<0.05；$对与DMSO组相比<0.05；%对与miR-34a-5p抑制剂+二甲基亚砜组相比，<0.05。采用单因素方差分析法分析多组数据（平均值±标准差），然后采用Tukey's事后（post-hoc）测试。单变量分析采用对数秩法。实验重复了三次。CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；miR-34a-5p，microRNA-34a-5p；脂肪源性干细胞；sh，短发夹；NC，阴性对照；二甲基亚砜；标准差；方差分析，方差分析。
图5
图5
抑制miR-34a-5p抑制ADSC凋亡在体外通过促进CTRP9表达。（A、B）使用流式细胞术测量ADSC周期的分布。（C、D）采用Annexin V-PE/7-ADD染色和流式细胞术检测ADSC凋亡。*对与载体组相比<0.05；#对与sh-NC组相比<0.05；&对与miR-34a-5p抑制剂NC组相比，<0.05；@对与miR-34a-5p抑制剂组相比，<0.05；$对与DMSO组相比<0.05；%对与miR-34a-5p抑制剂+二甲基亚砜组相比，<0.05。采用单因素方差分析法分析多组数据（平均值±标准差），然后采用Tukey's事后（post-hoc）测试。实验重复了三次。CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；miR-34a-5p，microRNA-34a-5p；脂肪来源干细胞；sh，短发夹；NC，阴性对照；二甲基亚砜；标准差；方差分析，方差分析。
图6
图6
下调的miR-34a-5p促进ADSCs对MI损伤的保护作用体内上调CTRP9表达。（A）各组小鼠的LVEF。（B）+各组小鼠的dp/dtmax。（C）各组小鼠LVEDP。（D）TUNEL染色（400×）检测各组小鼠心肌细胞凋亡。（E）各组小鼠心肌组织Masson’s三色染色（400×）。（F）RT-qPCR检测心肌组织中miR-34a、BNP和ANP的表达。*对与假手术组相比<0.05；#对与MI+ADSC组相比<0.05；&对与MI+miR-34a-5p antagomir+ADSC组相比，<0.05。采用单因素方差分析法分析多组数据（平均值±标准差），然后采用Tukey's事后（post-hoc）测试。实验重复了三次。CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；miR-34a-5p，microRNA-34a-5p；脂肪源性干细胞；心肌梗死；LVEF，左室射血分数；左室舒张末期压；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP-生物素缺口末端标记；标准差；方差分析，方差分析。
图7
图7
miR-34a-5p在小鼠心肌梗死模型ADSC功能中的作用示意图。miR-34a-5p靶向并负调控CTRP9的表达。上调CTRP9可通过增加ERK1、MMP-9、NRF2、MnSOD和HO-1的表达，促进ADSC的增殖和迁移。因此，miR-34a-5p的下调通过上调CTRP9在ADSCs对MI损伤的保护作用中发挥促进作用。miR-34a-5p，microRNA-34a-5p；脂肪源性干细胞；心肌梗死；CTRP9、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9；基质金属蛋白酶-9；NRF2，核因子（红细胞衍生2）样2；HO-1，血红素加氧酶-1。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Bernardo B.C.、Gao X.M.、Winbanks C.E.、Boey E.J.、Tham Y.K.、Kiriazis H.等人（2012年）。治疗性抑制miR-34家族可减轻病理性心脏重塑并改善心脏功能。程序。国家。阿卡德。科学。美国10917615–17620。10.1073/pnas.1206432109-内政部-项目管理委员会-公共医学
    1. Boon R.A.、Iekushi K.、Lechner S.、Seeger T.、Fischer A.、Heydt S.等。(2013). MicroRNA-34a调节心脏老化和功能。《自然》495，107–110。10.1038/nature11919，PMID：-内政部-公共医学
    1. Charloux A.、Piquard F.、Doutreleau S.、Brandenberger G.、Geny B.（2003年）。心力衰竭患者肾对心钠素低反应性的机制。欧洲临床杂志。投资。33, 769–778. 10.1046/j.1365-2362.2003.01222.x，PMID：-内政部-公共医学
    1. 范伟、孙丹、刘杰、梁丹、王毅、纳辛·K·H等。(2012). 在小鼠后肢缺血模型中，脂肪基质细胞通过VEGF/mTOR/Akt通路放大血管生成信号：一项3D多模式成像研究。公共科学图书馆One 7:e45621。10.1371/日志.pone.0045621，PMID：-内政部-项目管理委员会-公共医学
    1. 冯毅、王杰、丹刚、上官T、赵杰、赵毅等（2014）。miR-34a通过ERK1/2途径部分逆转CEES暴露角质形成细胞迁移的抑制。百万。医学科学。11, 845–849.