跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
。2020年1月：28:101364。
doi:10.1016/j.redox.2019.101364。 Epub 2019年10月29日。

核转录因子FoxG1通过调节自噬途径影响模拟老化毛细胞对炎症的敏感性

祖洪河 1, 邹胜宇 1, 李明（音） 1, 廖福玲 2, 夏武 1, 孙海英 1, 赵雪燕 1, 胡玉娟 1, 李丹（Dan Li） 1, 徐晓祥 三, 陈森（Sen Chen） 1, 于孙 4, 仁杰柴 5, 魏家港 6
附属公司

核转录因子FoxG1通过调节自噬途径影响模拟老化毛细胞对炎症的敏感性

祖洪河等。 氧化还原生物。 2020年1月。

摘要

炎症是一种自卫反应，以保护个人免受感染和组织损伤，但过度或持续的炎症会对细胞生存产生不利影响。随着年龄的增长，许多人特别容易受到慢性炎症诱导的感音神经性耳聋的影响，但老年人听力损失风险增加背后的内在分子机制尚不清楚。FoxG1（叉头盒转录因子G1）是一种关键转录因子，通过调节线粒体功能在毛细胞存活中发挥重要作用，但在衰老和炎症条件下FoxG1的功能如何变化尚不清楚。在本研究中，我们首次发现在低浓度脂多糖（LPS）诱导的炎症模型中，FoxG1表达和自噬均逐渐增加，而在高浓度LPS治疗后，FoxG1表达和自吞噬水平均随着LPS浓度的增加而降低。然后我们使用siRNA下调毛细胞样OC-1细胞中Foxg1的表达，发现LPS损伤后细胞死亡和凋亡显著增加。此外，我们使用d-半乳糖（d-gal）建立了毛细胞样OC-1细胞和耳蜗外植体体外培养的衰老模型，发现d-gal和LPS联合治疗后Foxg1的表达和自噬水平均降低。最后，我们在老化炎症条件下下调Foxg1的表达，发现死亡和凋亡细胞数量增加。这些结果共同表明，FoxG1通过调节自噬途径影响模拟老化毛细胞对炎症的敏感性。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有竞争性的经济利益。

数字

图1
图1
15 mg/mL D-gal处理72 h后OC-1细胞的表型变化。（A） TEM分析评估OC1细胞的老化。（B） D-gal治疗后线粒体DNA（mtDNA）共同缺失（CD）的测量。（C） D-gal治疗后流式细胞仪检测细胞凋亡。（D） C.中早期凋亡细胞和死亡细胞的比例（E）D-gal处理后通过流式细胞术进行ROS分析的结果。（F） E中数据的量化。对于所有实验，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图2
图2
D-半乳糖诱导的模拟衰老HCs对LPS诱导的炎症反应的敏感性增加。（A） LPS处理后GFP-LC3B小鼠D-gal诱导的老化耳蜗中Myo7a抗体的免疫荧光染色。（B） 定量A中Myo7a-阳性HCs，n=3。对于所有实验，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图3
图3
D-半乳糖诱导的模拟衰老细胞对脂多糖诱导的炎症反应的敏感性增加。（A） 流式细胞仪检测不同处理后细胞凋亡 = 3.（B）A.中早期凋亡细胞的比例（C）A.（D）TUNEL和DAPI双重染色显示凋亡OC-1 不同处理后的细胞，n = 3.（E）D中TUNEL/DAPI双阳性细胞数量的量化。（F）不同处理后用流式细胞仪分析ROS水平。（G） OC-1中Mito-SOX对F.（H）免疫荧光染色数据的量化 细胞。（一） 不同处理后线粒体DNA CD的测定。（J） OC-1细胞凋亡相关基因表达的qPCR分析 单元格，n = 3.（K）比率Bcl2公司到Bax公司OC-1细胞经不同处理后，n=3。对于qPCR实验，未经处理的对照组的值设置为1*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图4
图4
FoxG1的表达影响OC-1自噬体的形成 1后面的单元格 μg/mL LPS处理48 h.（A）Western blot显示OC-1中SQSTM1/p62和LC3B表达的变化 Rap处理后的细胞，n = 3.（B）A中LC3B水平的量化 下调后的细胞福克斯11μg/mL LPS处理后的表达。（E） 和（F）D中蛋白质印迹的定量。（G）用于评估OC-1细胞中自噬的透射电子显微镜分析。（H） G中自噬空泡的定量（I）G中自溶体的定量。所有实验，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图5
图5
之后HCs中FoxG1表达和自噬被激活反式-鼓室注射LPS。（A） LPS处理后GFP-LC3B小鼠耳蜗HCs中的鬼臼蛋白免疫荧光染色，n=5。（B） HCs中相对GFP-LC3B荧光强度的量化，归一化为控制水平。（C） Western blot显示不同浓度LPS处理后HCs中FoxG1和LC3B表达的变化，n=3。（D） 和（E）C中western blot的定量。对于所有实验，*p<0.05，***p<0.001。
图6
图6
FoxG1的表达影响LPS处理后OC-1细胞的氧化应激和凋亡。（A） 流式细胞术分析不同处理后ROS水平。（B） 通过流式细胞术对不同治疗后的A.（C）细胞凋亡分析中的数据进行量化。（D） C.（E）中早期凋亡细胞的比例C.中死亡细胞的比例*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图7
图7
FoxG1的表达通过调节自噬体的形成，影响D-半乳糖诱导的模拟衰老HCs对LPS诱导的炎症反应的敏感性。（A） Western blot显示不同浓度LPS（0.1μg/mL、0.5μg/mL，1μg/mL和2μg/mL）处理48 h后HCs中FoxG1和LC3B表达的变化。（B） 和（C）定量A.（D）western blot，显示不同浓度D-gal处理（1 mg/mL、5 mg/mL、10 mg/mL、15 mg/mL和20 mg/mL）72 h后HCs中FoxG1和LC3表达的变化。（E） 和（F）在D.（G）western blot中量化western blot，显示LPS治疗后D-gal诱导的老化HCs中FoxG1和LC3表达的变化。（H） （I）用GFP-LC3小鼠耳蜗中的Myo7a抗体进行G（J）免疫荧光染色的western blot定量。（K） J中GFP-LC3斑点数的量化。对于所有实验，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图8
图8
LPS处理后D-gal诱导的模拟衰老细胞自噬和FoxG1表达的变化。（A） Western blot显示不同处理后OC-1细胞中FoxG1和LC3B表达的变化。（B） 和（C）定量A（D）细胞中的western blot。（D）用mRFP-GFP-LC3质粒转染细胞，并用D-gal和LPS处理。黄点表示自噬体，红点表示自溶体，n=3。（E） D.（F）自噬体的定量D.（G）TEM分析中自溶体的定量以评估OC-1细胞的自噬。（H） G中自噬空泡的定量（I）G中自溶体的定量。所有实验，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。（对于本图例中颜色参考的解释，请读者参阅本文的Web版本。）
图9
图9
FoxG1的表达影响D-半乳糖诱导的模拟衰老OC-1中的氧化应激和凋亡 D-gal和LPS处理后的细胞。（A） 细胞凋亡的流式细胞术分析狐狸g1LPS和D-gal处理后的敲除细胞，n=3。（B） A.早期凋亡细胞比例（C）A.死亡细胞比例（D）不同处理后用流式细胞仪分析ROS水平。（E） A.中数据的量化*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Kalinec G.M.、Lomberk G.、Urrutia R.A.、Kalinec F.耳蜗炎症的解决：预防或改善药物、噪音和年龄相关性听力损失的新靶点。前面。单元格。神经科学。2017;11 192-192.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Morales C.R.、Pedrozo Z.、Lavandero S.、Hill J.A.心血管稳态中的氧化应激和自噬。抗氧化剂氧化还原信号。2014;20:507–518.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Calle M.C.、Fernandez M.L.炎症和2型糖尿病。糖尿病Metab。2012;38:183–191.-公共医学
    1. Holmes C.Review：全身炎症和阿尔茨海默病。神经病理学。申请。神经生物学。2013;39:51–68.-公共医学
    1. Watson N.，Ding B.，Zhu X.，Frisina R.D.老化耳蜗中的慢性炎症——炎症成像：未来老年性聋治疗的新靶点。《老龄化研究》，2017年修订版；40:142–148.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

LinkOut-更多资源