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.2019年8月18日:2019:6146942。
doi:10.1155/2019/6146942。 2019年eCollection。

脂肪提取物对UVB诱导的光老化的保护作用体外在体内

附属公司

脂肪提取物对UVB诱导的光老化的保护作用体外在体内

邓明武等。 氧化介质细胞Longev. .

摘要

背景:纳米脂肪可以保护裸鼠免受紫外线B-(UVB-)诱导的损伤。脂肪提取物(FE)是从富含多种生长因子的纳米脂肪中分离出来的无细胞部分。

目标:确定FE是否能在培养的皮肤成纤维细胞和裸鼠中保护UVB诱导的光老化。

方法:对于在体外研究中,在UVB照射前24小时用FE预处理人皮肤成纤维细胞。在照射后立即分析活性氧(ROS)的生成,而在UVB照射后24小时进行细胞周期分析。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-在UVB照射72小时后,研究了gal)的表达、细胞增殖以及谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX-1)、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶1(SOD-1)、SOD-2和胶原蛋白1(COL-1)的表达。对于体内研究中,用UVB照射裸鼠背部皮肤,然后用FE处理裸鼠8周。治疗后观察真皮厚度、毛细血管密度和皮肤组织切片中的凋亡细胞。还测量了组织中GPX-1、过氧化氢酶、SOD-2、SOD-1和COL-1的表达。

结果:FE显著增加细胞增殖,保护细胞免受UVB诱导的细胞死亡和细胞周期阻滞。FE降低了UVB辐射诱导的ROS和老化细胞数量。FE促进培养的真皮成纤维细胞中COL-1和GPX-1的表达。FE处理UVB照射皮肤可增加真皮厚度和毛细血管密度,减少凋亡细胞数量,促进COL-1和GPX-1的表达。

结论:FE通过其抗氧化、抗凋亡和促血管生成活性,保护人类皮肤成纤维细胞和裸鼠皮肤免受UVB诱导的光老化。

PubMed免责声明

利益冲突声明

提交人声明,不存在利益冲突。

数字

图1
图1
FE对人皮肤成纤维细胞增殖和细胞周期的影响。(a) 用不同浓度的FE(0%、1%、5%和10%)处理人皮肤成纤维细胞72小时h.使用CCK-8试验量化细胞增殖。(b) CCK-8测试显示细胞在72细胞经FE(0%、1%、5%和10%)预处理24小时后h,然后暴露在UVB光下。(c) 72岁时人皮肤成纤维细胞的形态学UVB照射后h。比例尺:150μm.(d)进行细胞周期分析24辐照后h。流式细胞术分析细胞周期分布。FE处理显著增加细胞增殖并消除UVB诱导的细胞周期阻滞(*第页< 0.05).
图2
图2
FE对SA的影响-β-人皮肤成纤维细胞的gal染色和形态学。用或不用FE(0%、1%、5%和10%)预处理人皮肤成纤维细胞24小时h、 然后将细胞暴露在总剂量为100的UVB光下毫焦耳/厘米2(a)南非-β-存在gal阳性细胞72UVB照射后h。比例尺:150μm.(b)SA的百分比-β-每场计数200个细胞,测定gal阳性老化细胞。(c) 细胞骨架蛋白的荧光标记。比例尺:100μm.(d)细胞骨架蛋白染色后测定细胞的长宽比。FE治疗显著减少SA的数量-β-紫外线照射诱导的gal阳性细胞并保持正常细胞形态(*第页< 0.05).
图3
图3
FE降低UVB诱导的细胞内ROS,并促进人皮肤成纤维细胞中GPX-1和COL-1的表达。用或不用FE(0%、1%、5%和10%)预处理人皮肤成纤维细胞24小时h、 然后将细胞暴露在总剂量为100的UVB光下毫焦耳/厘米2(a)通过DCFH测量的细胞内ROS2-DA染色20UVB照射后min。比例尺:500μm.(b)使用DCFH检测到细胞内ROS2-DA染色用流式细胞仪定量。(c,d)GPX-1、过氧化氢酶、SOD-2和SOD-1的蛋白质印迹分析72UVB照射后h。给出了三个独立实验的代表性结果。密度值以任意单位表示。(e,f)COL-1水平的Western blot分析72UVB照射后h。给出了三个独立实验的代表性结果。密度值以任意单位表示(*第页< 0.05).
图4
图4
紫外线照射和FE治疗4周后的宏观观察。(a,b)UVB组和FE治疗组的背部皮肤外观没有差异。(c) 在进行注射的背侧区域未观察到FE残留,但FE治疗组的血管数量多于UVB组。
图5
图5
FE对UVB诱导的小鼠表皮和真皮改变的影响。(a) FE治疗8周后进行HE和Masson三色染色。箭头表示皮肤的真皮部分。比例尺:100μm.(b)表皮和真皮厚度的定量分析。FE治疗显著增加皮肤真皮部分的厚度(*第页< 0.05).
图6
图6
FE对小鼠血管生成的影响。(a) FE治疗8周后进行抗CD31染色。箭头表示血管。比例尺:100μm.(b)FE治疗显著增加真皮中的血管密度(*第页< 0.05).
图7
图7
FE降低ROS诱导的小鼠细胞凋亡,并促进GPX-1和COL-1的表达。(a) 荧光显微镜图像和(b)用TUNEL染色试剂盒标记后凋亡细胞的定量(%)。比例尺:100μm.(c,d)FE治疗8周后小鼠GPX-1、过氧化氢酶、SOD-2和SOD-1的蛋白质印迹分析。给出了三个独立实验的代表性结果。密度值以任意单位表示。(e,f)FE治疗8周后小鼠COL-1的蛋白质印迹分析。给出了三个独立实验的代表性结果。密度值以任意单位表示(*第页< 0.05).

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