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.2019年10月;44(4):1473-1483.
doi:10.3892/ijmm.2019.4316。 Epub 2019年8月19日。

耳蜗背核轴突萌芽对噪声暴露后间隙预脉冲抑制的影响

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耳蜗背核轴突萌芽对噪声暴露后间隙预脉冲抑制的影响

Kyu-Hee Han先生等。 国际分子医学杂志. 2019年10月.

摘要

耳鸣发病机制的主要理论之一涉及耳蜗背核(DCN)的听觉-躯体感觉可塑性失调,这被认为是由于轴突萌芽所致。尽管听觉和体感输入之间的平衡可能在听力损伤后发生,并可能导致耳鸣,但对这一现象的检查采用了听力损伤模型,该模型没有考虑这些变化与耳鸣之间的因果关系。本研究旨在通过比较有耳鸣和无耳鸣动物的结果,研究听觉-躯体感觉神经支配的变化以及轴突萌芽在这一过程中的作用。将大鼠暴露于噪声诱导的暂时阈值偏移中,然后根据间隙预脉冲抑制声惊吓反射的结果将其分为耳鸣组和非耳鸣组。根据噪声暴露后的周数(1、2或3),从分为三个亚组的大鼠中收集DCN,并评估与DCN听觉输入相关的囊泡谷氨酸转运体1(VGLUT1)和主要与躯体感觉输入相关的VGLUT2的蛋白水平。此外,与轴突萌芽有关的因素,包括生长相关蛋白43(GAP43)、突触后密度蛋白95、突触素、α地中海贫血/精神发育迟缓综合征X连锁同源物(ATRX)、生长分化因子10(GDF10)、富含亮氨酸重复序列和包含1的免疫球蛋白域,western-blot分析。与非耳鸣组相比,耳鸣组的VGLUT1在暴露后1周显著下降,VGLUT2在暴露后3周显著增加。此外,耳鸣组大鼠在噪声暴露后3周,其DCN中GAP43和GDF10蛋白表达水平显著增加。本研究的结果进一步证明了DCN神经输入分布的改变可能导致耳鸣,轴突萌芽是这些改变的基础。

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数字

图1
图1
噪声暴露前后的ABR阈值。噪声暴露后1天发生TTS,暴露3周后阈值恢复到近基线阈值;n=7。数据表示为平均值±SD。ABR,听觉脑干反应;SPL,声压级;TTS,临时阈值偏移。
图2
图2
第二部分是噪声暴露前后的ABR阈值。(A) 第1周非先天性组;n=6。(B) 第1周耳鸣组;n=7。(C) 第2周非先天性组;n=6。(D) 第2周耳鸣组;n=7。(E) 第3周非先天性组;n=7。(F) 第3周耳鸣组;n=8。数据表示为平均值±SD,由单向方差分析和Tukey的事后检验确定。*与基线ABR阈值相比P<0.05。听觉脑干反应;SPL,声压级。
图3
图3
耳鸣组和非耳鸣组中VGLUT1和VGLUT2的表达。给出了耳鸣组、非耳鸣组和对照组DCN中VGLUT1和VGLUT2表达水平以及VGLUT2/VGLUT比值的Western blot和量化结果。与非先天性耳鸣组相比,噪声暴露后1周耳鸣组的VGLUT1较早下降,3周时VGLUT2显著增加。数据以平均值±SEM表示,由单向方差分析和Tukey的事后检验确定。*P<0.05;与对照组相比,P<0.05。VGLUT,囊泡谷氨酸转运体。
图4
图4
耳鸣组和非耳鸣组GAP43、突触素和PSD95的表达。本文报道了耳鸣组、非耳鸣组和对照组DCN中GAP43、突触素和PSD95表达水平的Western blot和定量。耳鸣组GAP43水平在噪声暴露后3周显著升高。与对照组相比,耳鸣组在噪声暴露后2周的突触素水平下降,但在3周后升高。数据以平均值±SEM表示,由单向方差分析和Tukey的事后检验确定。*P<0.05;与对照组相比,P<0.05。GAP43,生长相关蛋白43;PSD95,突触后密度蛋白95。
图5
图5
耳鸣组和非耳鸣组ATRX、GDF10和Lingo1的表达。给出了耳鸣组、非耳鸣组和对照组DCN中ATRX、GDF10和Lingo1表达水平的Western blot和定量。耳鸣组在噪声暴露后3周GDF10水平显著升高。数据以平均值±SEM表示,由单向方差分析和Tukey的事后检验确定。*P<0.05;与对照组相比,P<0.05。ATRX,α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X连锁同源物;GDF10,生长分化因子10;Lingo1、富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白域1。
图6
图6
第三部分是噪声暴露前后的ABR阈值。(A) 第1周非幼稚组/第3周非幼年组;n=19。(B) 第1周非先天性耳鸣/第3周耳鸣组;n=4。(C) 第1周耳鸣/第3周非耳鸣组;n=5。(D) 第1周耳鸣/第3周耳鸣组;n=22。数据表示为平均值±SD,由单向方差分析和Tukey的事后检验确定。*与基线ABR阈值相比P<0.05。听觉脑干反应;SPL,声压级。

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