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.2019年8月12日25:6007-6014。
doi:10.12659/MSM.913829。

汉黄芩素通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt通路提高卵巢癌细胞顺铂敏感性

附属公司

汉黄芩素通过抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt通路提高卵巢癌细胞顺铂敏感性

冯星等。 医学科学Monit. .

摘要

背景黄芩黄酮(5,7-二羟基-8-甲氧基黄酮)是黄芩中提取的黄酮类化合物之一,因其对癌细胞的最大疗效而被视为抗癌候选化合物。本研究旨在探讨汉黄芩素提高卵巢癌细胞对顺铂化疗敏感性的可能机制。材料与方法采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测卵巢癌细胞SKOV3/DDP和C13*的生长抑制率。Hoechst染色后在荧光显微镜下评估细胞凋亡。我们通过蛋白质印迹进一步分析了Bcl-2、裂解的胱天蛋白酶-3、裂解的PARP和磷酸化Akt的表达。结果在本研究中,我们发现汉黄芩素以剂量和时间依赖性的方式降低卵巢癌细胞SKOV3、SKOV3/DDP、OV2008和C13*的增殖,并使顺铂诱导的细胞毒性增敏。此外,汉黄芩素治疗也使顺铂耐药SKOV3/DDP和C13*细胞增加到低剂量顺铂诱导的细胞凋亡。此外,这种处理导致磷酸化Akt的显著降低。结论汉黄芩素通过下调PI3K/Akt通路,显著提高卵巢癌顺铂耐药细胞对顺铂的敏感性。

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利益冲突

没有。

数字

图1
图1
汉黄芩素抑制卵巢癌细胞的增殖。(A类)在24、48和72小时,使用CCK-8分析评估汉黄芩素处理的SKOV3和SKOV3/DDP细胞的细胞活力。随着汉黄芩素浓度的增加,细胞活力降低。(B类)在24、48和72小时,使用CCK-8分析评估汉黄芩素处理的OV2008和C13*细胞的细胞活力。随着汉黄芩素浓度的增加,细胞活力降低*P(P)<0.05,与0μM汉黄芩素相比。CCK-8–细胞计数试剂盒-8。
图2
图2
汉黄芩素增加了顺铂耐药卵巢癌细胞的顺铂细胞毒性。(A类)采用CCK-8法评估顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP的IC50值。48小时时,顺铂对SKOV3和SKOV3/DDP细胞的IC50值分别为7.7μg/mL和26.8μg/mL*P(P)与SKOV3相比,<0.05。(B类)通过CCK-8分析评估OV2008和C13*顺铂的IC50值。48小时时,顺铂对OV2008和C13*细胞的IC50值分别为9.8μg/mL和29.6μg/mL。**与OV2008相比,P<0.05。(C类)SKOV3/DDP细胞中汉黄芩素对顺铂的致敏作用。用顺铂(IC30,10.2μg/mL)、顺铂(IC 50,26.8μg/mL。# P(P)与单独顺铂相比,<0.05。(D类)汉黄芩素在C13*细胞中对顺铂的致敏作用。用顺铂(IC30,11.1μg/mL)、顺铂(IC 50,29.6μg/mL。## P(P)与单独顺铂相比,<0.05。CCK-8–细胞计数试剂盒-8。
图3
图3
汉黄芩素促进顺铂诱导的顺铂耐药SKOV3/DDP和C13*细胞凋亡。(A类)不同浓度(10、20和40μM)的汉黄芩素对SKOV3/DDP和C13*细胞凋亡的影响。核细胞经Hoechst 33258染色。荧光显微镜600×。棒40μm*P(P)与对照组相比,<0.05。(B类)汉黄芩素(20μM)对顺铂诱导SKOV3/DDP和C13*细胞凋亡的影响。细胞核用Hoechst 33258染色。荧光显微镜600×。棒材40μm*P(P)与单独使用顺铂(5μg/mL)相比,<0.05。(C类)用PBS、顺铂(10μg/mL)、汉黄芩素(20μM)和顺铂(10mg/mL)+汉黄芩素(20µM)处理SKOV3/DDP和C13*细胞48小时,然后用western blot检测bcl-2、caspase-3、裂解caspase-2、PARP和裂解PARP的蛋白水平。
图4
图4
汉黄芩素通过下调PI3K/Akt通路增强顺铂敏感性。(A类)通过western blot检测SKOV3、SKOV3/DDP、OV2008和C13*细胞中Akt和p-Akt的蛋白水平。western blot检测汉黄芩素对SKOV3/DDP和C13*细胞Akt和p-Akt的影响。(B类)用汉黄芩素(20μM)和/或LY294002(10μM)预处理后,通过western blot测定SKOV3/DDP和C13*细胞中Akt和p-Akt的蛋白水平。数据表示为平均值±标准偏差,n=3*P(P)<0.05.

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引用人

工具书类

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