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.2020年1月;121(1):142-151.
doi:10.1002/jcb.28993。 Epub 2019年6月18日。

DNA低甲基化通过调节SP1与CDCA3启动子的结合促进胃癌细胞的侵袭和转移

附属公司

DNA低甲基化通过调节SP1与CDCA3启动子的结合促进胃癌细胞的侵袭和转移

余嘉伟等。 J细胞生物化学. 2020年1月.

摘要

背景:据报道,细胞分裂周期相关蛋白-3(CDCA3)在各种癌症中经常上调。人们逐渐认识到,DNA甲基化改变发生在各种癌症中。然而,CDCA3和DNA甲基化在胃癌中的具体作用仍需进一步阐明。

方法:本研究采用定量逆转录聚合酶链反应(PCR)检测CDCA3在GC和正常组织中的相对表达。采用亚硫酸氢盐序列PCR(BSP)和甲基化特异性PCR(MSP)检测CDCA3的甲基化条件。染色质免疫沉淀(ChIP)分析和荧光素酶活性分析分别用于转录因子与启动子之间的相互作用和结合位点的测定。通过伤口愈合试验、集落形成试验和基质凝胶侵袭试验进一步评估特异性蛋白1(SP1)或CDCA3在体外敲除或过度表达对GC细胞的影响。

结果:与配对正常组织相比,GC组织中CDCA3的表达显著增加。CDCA3表达受DNA甲基化调节,CpG岛低甲基化导致CDCA3 GC上调。ChIP分析证实SP1与CDCA3启动子结合的活性显著增加。当通过敲低SP1下调MKN45细胞中CDCA3的表达时,增殖能力、愈合能力和侵袭能力显著受到抑制。

结论:SP1结合到最近启动子区域的过程在GC细胞中加快,DNA被低甲基化,CDCA3表达被促进。CDCA3对细胞增殖和侵袭的影响受SP1的调控,也受DNA低甲基化的影响。

关键词:DNA甲基化;细胞分裂周期相关蛋白-3;胃癌;增殖;特异性蛋白1。

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