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.2019年8月；20(2):1203-1211.
doi:10.3892/mmr.2019.10346。 Epub 2019年6月5日。

SDF1/CXCR4轴在椎间盘退变过程中的血管生成中起作用

张汉翔 1, 何斌 1
附属公司

SDF1/CXCR4轴在椎间盘退变过程中的血管生成中起作用

张汉翔等。 分子医学代表. 2019年8月.

摘要

腰痛（LBP）是一种普遍存在的影响生活质量的疾病。新生血管的长入是LBP的一个重要病理特征，但其潜在机制尚不清楚。本研究旨在探讨基质细胞衍生因子1（SDF1）对退变椎间盘血管生成的影响及其相关机制。病毒转染可上调和下调髓核细胞（NPC）中SDF1的表达，根据SDF1的表现将NPC分为下调组（Down）、变性组（D）或上调组（Up）。在不同条件下，将不同组的NPC或NPC条件培养基与血管内皮细胞（VEC）共同培养。采用细胞计数试剂盒‑8（CCK‑8）分析、Transwell迁移分析和试管形成分析来评估对血管生成的影响。结果表明，在up和Down组中，SDF1分别显著上调和下调。每组NPC或其条件培养基与VEC共培养；CCK‑8、Transwell迁移和成管实验表明，随着SDF1的增加，VEC的细胞活力、趋化迁移和成管能力增加。上述结果在各组之间有显著差异。在添加CXCR4抑制剂AMD3100后，D组和Up组VEC的存活、迁移和成管受到抑制，与添加抑制剂前相比有显著差异，而唐氏组有下降趋势，加抑制剂后无显著差异。结果表明，SDF1在人NPC中表达，SDF1/CXCR4轴可以影响VEC的存活、迁移和管状形成，并可能在人退变椎间盘的血管生成中起重要作用。

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数字

图1。
图1。
主要NPC的识别。通过II型胶原和聚集蛋白的细胞免疫荧光鉴定NPC。这些细胞同时表达聚集蛋白（绿色荧光）和II型胶原（红色荧光），同时仍显示软骨细胞样表型，被鉴定为NPC。放大倍数，×200。NPCs，髓核细胞。
图2。
图2。
髓核细胞SDF1表达的上调和下调。（A） RT-qPCR显示，与D组和NC组相比，Up组SDF1的mRNA表达水平显著上调。（B） RT-qPCR显示，与D组和NC组相比，唐氏组SDF1的mRNA表达水平显著下调。（C） Western blot分析显示D组、NC组和Up组SDF1表达水平。（D） （C）的统计结果表明，与D组和NC组相比，Up组SDF1的表达显著增加。（E） Western blot分析显示D组、NC组和Down组SDF1的表达水平。（F） （E）的统计结果表明，与D组和NC组相比，唐氏组SDF1的表达显著降低**与相应D组相比，P<0.01，***P<0.001。#P<0.05，###与相应NC组相比，P<0.001。D、 退化；NC，阴性对照；向上，向上调节；下调；RT-qPCR、反转录定量PCR；SDF1，基质细胞衍生因子1。
图3。
图3。
Down、D和Up组髓核细胞SDF1免疫荧光。Down组荧光强度最弱，Up组荧光强度最强。放大倍数，×200。下调；D、 退化；向上，上调；SDF1，基质细胞衍生因子1。
图4。
图4。
髓核细胞对共培养体系中VEC细胞活力的影响。在添加AMD3100之前，Down、D和Up组VEC的细胞活力随着基质细胞衍生因子1的增加而增加，并且各组之间存在显著差异。添加AMD3100后，D组和Up组的细胞活力显著下降。唐氏组在添加AMD3100前后无显著差异*P<0.05，***P<0.001。血管内皮细胞；下调；D、 退化；向上，上调；AMD3100-，未将AMD3100添加到共培养系统中；AMD3100+，将AMD3100添加到共培养系统中。
图5。
图5。
髓核细胞对共培养体系中VEC迁移的影响。（A） 在共培养系统中，在添加AMD3100之前，Down、D和Up组的跨膜VEC数量随着基质细胞衍生因子的增加而增加。添加AMD3100后，三组的跨膜VEC数量均减少。放大倍数，×200。（B） 统计结果表明，在添加AMD3100之前，各组间跨膜VEC的数量存在显著差异。加入AMD3100后，D组和Up组跨膜VEC数量显著减少。唐氏组在添加AMD3100前后无显著差异*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。血管内皮细胞；下调；D、 退化；向上，向上调节；AMD3100-，未将AMD3100添加到共培养系统中；AMD3100+，将AMD3100添加到共培养系统中。
图6。
图6。
髓核细胞对共培养系统中血管内皮细胞成管的影响。（A） 在共培养系统中，在添加AMD3100之前，Down、D和Up组的分支结构随着基质细胞衍生因子1的增加而增加。添加AMD3100后，三组的分支结构均减少。放大倍数，×200。（B） 统计结果表明，在添加AMD3100之前，各组之间的分支结构长度存在差异。在加入AMD3100后，D组和Up组的分支结构长度显著减少。唐氏组在添加AMD3100前后无显著差异**P<0.01，***P<0.001。下调；D、 退化；向上，向上调节；AMD3100-，未将AMD3100添加到共培养系统中；AMD3100+，将AMD3100添加到共培养系统中。
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