跳过主页内容
访问密钥 NCBI主页 MycBi主页 主要内容 主导航
.2019 4月4日;12:24392449。
DOI:102147/OTS196851。 收集2019。

靶向miR216A/LGR5轴和PI3K/Akt信号通路对胶质瘤细胞增殖、迁移和血管生成的拮抗作用

附属
免费PMC文章

靶向miR216A/LGR5轴和PI3K/Akt信号通路对胶质瘤细胞增殖、迁移和血管生成的拮抗作用

王维等。 ONCO目标. .
免费PMC文章

摘要

用途:DANCR在各种类型的癌症中起着重要的作用。然而,其在胶质瘤中的作用尚不清楚。在本研究中,我们旨在探讨在胶质瘤中DANCR的作用机制。方法:RT-PCR检测DANCR表达,Western blot检测LGR5、PI3K、AKT、磷酸化AKT(P -Akt)表达。miR216A和DANCR的组合通过Luciferase报告分析来定量。分别采用MTT法、流式细胞术、TUNWELL法和试管形成法检测胶质瘤细胞的增殖、凋亡和细胞周期、迁移和侵袭、血管生成。结果胶质瘤细胞的DANCR表达明显高于正常人星形胶质细胞。DANCR的沉默抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和血管生成,促进细胞凋亡,阻断G1/S转移的细胞周期,降低LGR5、PI3K和P -Akt的表达。我们确定miR216A是直接的DANCR靶标。沉默胶质瘤细胞中的DANCR增加miR216A的表达。此外,miR216A抑制抑制靶向siRNA转染的胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和血管生成,并抑制胶质瘤细胞的凋亡。此外,miR- 216a抑制抑制了由DANCR沉默引起的G1/S转换的抑制。此外,miR-216a的抑制增加了靶向siRNA转染的胶质瘤细胞中LGR5、PI3K、Akt和P- Akt的积累。结论:DANCR通过靶向miR216A/LGR5轴和PI3K/Akt信号通路调控生长和转移。

关键词血管生成;胶质瘤;侵袭;miR216A;迁移。

利益冲突陈述

其他作者报告没有兴趣在这项工作中。

数据

图8
图8
不同途径表达和抑制的示意图。
图1
图1
胶质瘤细胞中非蛋白编码RNA(DANCR)的高表达拮抗作用笔记采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测正常人星形胶质细胞(NAS)和胶质瘤细胞系U-87 mg、U-118mg、U-254mg和SG-44细胞中DANCR的mRNA表达水平。胶质瘤细胞中DANCR的内源性表达高于NAS。数据以平均值±SD表示。***<0.001与NFAS。
图2
图2
胶质瘤细胞中非蛋白编码RNA(DANCR)的内源性表达水平笔记用定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)检测不同浓度(20 nm、50 nm、100 nm)的阴性对照(SI-NC)、SI-DANCR-1、SI-DANCR-2和SI-DANCR-3转染的U-251 MG细胞。随后,用qRT-PCR分析转染si-dANCR-2的U251mg和SG-44细胞中DANCR的表达水平。数据以平均值±SD表示。***< 0.001 vs SI NC。
图3
图3
分化抑制非蛋白编码RNA(DANCR)沉默对细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响笔记a)沉默DANCR抑制胶质瘤细胞增殖。沉默DANCR可增加胶质瘤细胞凋亡。条形图代表各组细胞凋亡的定量。C沉默DANCR阻断胶质瘤细胞的G1/S转移。D细胞周期分析的代表性图像。条形图代表各组G1、S和G2细胞的定量。e代表细胞凋亡的图像分析。数据以平均值±SD表示。***< 0.001 vs SI NC。
图4
图4
敲除分化抑制非蛋白编码RNA(DANCR)抑制脑胶质瘤细胞的迁移、侵袭和血管生成。笔记a)抑制DANCR减少胶质瘤细胞迁移(200×)。DANCR抑制可降低胶质瘤细胞侵袭率(200×)。C抑制DANCR可降低胶质瘤细胞的血管生成(100×)。***< 0.001 vs SI NC。
图5
图5
miR216A是胶质瘤细胞非蛋白编码RNA(DANCR)的直接靶向靶向。笔记)miR216A在DANCR中的结合位点和含有DANCR的突变荧光素酶报告物构建体。)含有DANCR的荧光素酶报告结构的示意图。C)用pSICKECK DANCOR WT和阴性对照(NC)MIMICs或miR216A模拟物转染胶质瘤细胞的荧光素酶活性,**< 0.01。D)用pSICKECK DANCR突变体和NC或miR216A模拟物转染胶质瘤细胞中的荧光素酶活性。emiR216A在正常人星形胶质细胞(NAS)和胶质瘤细胞系U-87 mg、U-118mg、U-254mg和SG-44中的表达< 0.01,***<0.001 vs NHA。f沉默DANCR增加miR216A在脑胶质瘤细胞中的表达。***< 0.001。G抑制DANCR降低胶质瘤细胞中LGR5、PI3K和P -Akt的表达水平。
图6
图6
miR216A抑制可抑制分化抑制非蛋白编码RNA(DANCR)沉默对脑胶质瘤细胞迁移、侵袭和血管生成的抑制作用。笔记miR216A在si-DANCR-2和阴性对照(NC)或miR216A抑制剂转染的胶质瘤细胞中的表达。miR216A抑制si-DANCR-2转染的胶质瘤细胞的迁移。CmiR216A抑制si-DANCR-2转染的胶质瘤细胞的侵袭。DmiR216A抑制si-DANCR-2转染的胶质瘤细胞的血管生成。E、miR-216A抑制si-DANCR-2转染的胶质瘤细胞中LGR5、PI3K和P -Akt的表达水平升高。***< 0.001。
图7
图7
miR- 216A抑制抑制分化抑制非编码RNA(DANCR)沉默对增殖、凋亡和细胞周期的影响。笔记miR216A抑制了Si-DANCR-2对胶质瘤细胞增殖的抑制作用。miR216A抑制抑制SI-DANCR-2对细胞凋亡的促进作用。条形图代表各组细胞凋亡的定量。CmiR216A抑制抑制SI-DANCR-2对细胞周期G1/S转换的阻断作用。条形图代表各组G1、S和G2细胞的定量。D代表细胞凋亡的图像。e细胞周期分析的代表性图像。数据以平均值±SD表示。***< 0.001 vs SI NC。

类似文章

看到所有类似的文章

被引用 文章

推荐信

    1. 西格尔RL,Miller KD,JMaal.A癌症统计,2018。癌症杂志2018;68(1):7—30。DOI:10.3322/CAAC 21442。-DOI-PubMed
    1. Cronin KA,AJ湖,史葛S等。全国癌症状况年度报告,第一部分:国家癌症统计。癌症2018;124(13):2785—2800。DOI:10.1002/CNCR 31551-DOI-PMC-PubMed
    1. 李克,吕,Guo Y,等。美国成人弥漫性胶质瘤的发病趋势和模式,1973—2014。癌症医学杂志2018。DOI:10.1002/CAM4.1757-DOI-PMC-PubMed
    1. 奥斯特罗姆QT,科特DJ,Ascha M,克鲁奇科C,Barnholtz Sloan JS。从2000到2014,美国种族或种族的成人胶质瘤发病率和生存率。贾玛。2018;4(9):1254—1262。DOI:10.1001/JAMAOCOL,2018.1789μl-DOI-PMC-PubMed
    1. EC P G,Re M,DA S等。儿童视神经胶质瘤发病率的种族差异评估:来自监测、流行病学和最终结果计划的结果,2000—2014。癌症流行病学2018;54∶90—94。DOI:10.1016/J.CANEP.201.04.00-DOI-PubMed
反馈