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.2019年4月;17(4):2641-2647.
doi:10.3892/etm.2019.7223。 Epub 2019年1月30日。

肌肽通过MAPK/ERK途径改善糖尿病视网膜病变

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肌肽通过MAPK/ERK途径改善糖尿病视网膜病变

郭勇等。 实验治疗学. 2019年4月.

摘要

糖尿病视网膜病变(DR)是发达国家最常见的致盲原因之一。由于其无症状的发病和进行性疾病过程,DR通常在治疗选择有限的晚期诊断,因此常常导致不可逆转的失明。研究表明,肌肽可以预防和治疗DR。在之前的研究中,肌肽对DR的积极作用已被确定,并揭示肌肽与有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号相关激酶(ERK)信号通路可能存在关联。为了评估肌肽和MAPK/ERK信号通路之间的相互作用,通过逆转录定量聚合酶链反应和western blotting评估肌肽、PD98059或U46619治疗糖尿病大鼠后PKC、ERK和p-ERK表达的变化。结果表明,肌肽治疗后,ERK和p-ERK的表达受到显著抑制,但对PKC的表达没有明显影响,这表明抑制MAPK/ERK信号通路的激活可能在肌肽诱导的DR预防和治疗中发挥重要作用。

关键词:肌肽;糖尿病性视网膜病变;糖尿病视网膜病变大鼠;丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号相关激酶信号通路。

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数字

图1。
图1。
原发性RVEC的典型免疫荧光图像。从正常或糖尿病大鼠中分离和培养RVEC,并用抗CD31抗体进行免疫染色体外细胞核用Hoechst 33258染色。比例尺,20µm。视网膜血管内皮细胞;CD,分化簇;NC,阴性对照;糖尿病。
图2。
图2。
大鼠视网膜的典型免疫荧光图像。糖尿病组、糖尿病+肌肽组和对照组视网膜CD31抗体免疫荧光染色。9周时(Aa)DM大鼠、9周时用肌肽治疗的(Ab)DM大白鼠和9周时使用(Ac)Control Sprague-Dawley大白鼠的代表性图像。红色表示CD31表达。比例尺,200µm(B)CD31表达的定量结果。数据表示为平均值的平均值±标准误差(n=3)**与对照组大鼠相比P<0.01,##与糖尿病大鼠相比,P<0.01。CD,分化簇;糖尿病。
图3。
图3。
肌肽调节RVEC中PKC/ERK mRNA的表达。在使用或不使用PD98059、U46619和肌肽治疗后,通过逆转录定量聚合酶链反应测定(A)PKC和(B)ERK mRNA的表达。表达按GAPDH标准化并量化。所有测量值均表示为三个独立实验平均值的平均值±标准误差*与NC对照组相比P<0.05;#与NC PD98059相比P<0.05;+与U46619相比P<0.05;^与DM对照组相比P<0.05;&与DM PD98059相比P<0.05;@与DM U46619相比,P<0.05。蛋白激酶C;ERK,细胞外信号相关激酶;视网膜血管内皮细胞;NC,阴性对照;糖尿病。
图4。
图4。
肌肽调节RVEC中PKC/ERK/p-ERK蛋白的水平。(A) Western blotting检测在使用或不使用PD98059、U46619和肌肽治疗24小时后PKC、ERK和p-ERK的表达(A)。通过标准化为β-肌动蛋白来测定(B)PKC、(C)ERK、(D)p-ERK和(E)ERK/p-ERK表达的定量。数据表示为来自3个独立实验的平均值的平均值±标准误差*与NC对照组相比P<0.05;#与NC PD98059相比P<0.05;+与U46619相比,P<0.05;^与DM对照组相比P<0.05;&与DM PD98059相比P<0.05;@与DM U46619相比,P<0.05。蛋白激酶C;ERK,细胞外信号相关激酶;p、 磷酸化;视网膜血管内皮细胞;NC,阴性对照;糖尿病。

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