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.2019年3月1日;8(3):91-100.
doi:10.1089/wound.2018.0827。 Epub 2019年3月5日。

类Fidgetin 2 siRNA增强表面活性剂聚合物敷料的伤口愈合能力

附属公司

类Fidgetin 2 siRNA增强表面活性剂聚合物敷料的伤口愈合能力

布莱恩·奥鲁克等。 高级伤口护理(新罗谢尔). .

摘要

微管(MT)是细胞内的聚合物,为细胞提供结构,充当细胞内运输的铁路,并调节许多细胞活动,包括细胞迁移。MT细胞骨架的动态性和功能在很大程度上由其调节蛋白决定,包括最近发现的MT切割酶Fidgetin样2(FL2)。用小干扰RNA(siRNA)下调FL2表达导致细胞迁移率增加两倍以上体外并转化为改善伤口愈合效果体内小鼠模型。在这里,我们利用市售表面活性剂聚合物敷料(SPD)作为载体来传递FL2 siRNA。为此,我们将含有FL2 siRNA的胶原蛋白微粒纳入SPD(SPD-FL2-siRNA)中,以直接应用于损伤部位。与对照组相比,SPD-FL2 siRNA在小鼠全层切除伤口和全层烧伤伤口模型上的局部应用显著提高了伤口愈合的速度和质量。伤口愈合速度更快,保真度更高,导致胶原蛋白亚结构组织合理。综上所述,这些发现表明,将FL2 siRNA纳入现有治疗方案是改善伤口结局的一条有希望的途径。

关键词:类Fidgetin 2;微管;再上皮化;再生;小干扰RNA;伤口愈合。

PubMed免责声明

数字

无
David J.Sharp,博士
<b>图1</b>
图1。
使用SPD-FL2-siRNA治疗的受伤皮肤中FL2水平降低。(A)微粒siRNA并入SPD的示意图。(B)小鼠被烧伤,然后在第0天和第2天用指定的药物治疗。第3天采集烧伤标本,分离RNA进行后续qPCR分析。与SPD-Control-siRNA处理相比,SPD-FL2-siRNA处理显著降低FL2 mRNA。n个 ≥ 8; 非参数Mann-Whitney检验*第页 = 0.026;误差线 = SEM.FL2,类Fidgetin 2;mRNA、信使RNA;qPCR,定量PCR;SEM,平均值标准误差;小干扰RNA;表面活性剂聚合物敷料。在线提供彩色图像。
<b>图2</b>
图2。
SPD-FL2-siRNA治疗刺激小鼠全层切除模型的愈合。(A)应用表面活性剂聚合物治疗BALB/c小鼠后的典型愈合时间过程。(B、C)量化一段时间和第4天剩余伤口面积的图表。红色条是SPD治疗;蓝色条,SPD-Control-siRNA;绿色条,SPD-FL2-siRNA;n个 = 每组22处伤口;学生的t吨-测试***第页 ≤ 0.0008; 误差线 = SEM。在单个时间点和双向方差分析中确认的显著性。方差分析,方差分析。在线提供彩色图像。
<b>图3</b>
图3。
SPD-FL2-siRNA治疗降低小鼠全层切除模型的伤口大小。(A)伤后8天,对分伤口进行代表性H&E染色。对照组的表皮出现上皮增厚,而经FL2-siRNA处理的动物表现出再上皮化,表明伤口进一步进展,愈合良好。箭头指定可观察到的伤口区域。插入这张图片突出显示了伤口区域内角蛋白14阳性的毛囊。(B)量化第8天伤口长度的图表;n个 ≥ 4; 学生的t吨-测试*第页 = 0.0252; **第页 = 0.0079; 误差线 = SEM。彩色图像为在线提供。
<b>图4</b>
图4。
SPD-FL2-siRNA治疗刺激小鼠全层烧伤模型的愈合。(A)烧伤后14天,对分伤口进行代表性H&E染色。经FL2-siRNA处理的动物出现再上皮化,表明烧伤进一步进展,愈合良好。箭头指定可观察到的伤口边缘。(B)量化相对于第0天的伤口面积随时间变化的图表;n个 ≥ 14; 在个别时间点通过双向方差分析确认显著性。(C、D)量化第4天伤口面积和第14天表皮厚度的图表。红色条是SPD治疗;蓝色条,SPD-Control-siRNA;绿色条,SPD-FL2-siRNA;n个 ≥ 8; 学生的t吨-测试*第页 ≤ 0.05; **第页 ≤ 0.005; ***第页 ≤ 0.0005****第页 ≤ 0.00005; 误差线 = SEM。在线提供彩色图像。
<b>图5</b>
图5。
FL2敲除可促进血运重建并减少炎症,但不会影响细胞增殖。(A)分别使用PCNA、PECAM1或CD45抗体对烧伤和治疗后14天的皮肤进行免疫组织化学染色。20岁时对烧伤中心区域进行了成像×或40×放大倍数和染色事件数量量化。(B)PCNA染色各组间无显著差异;n个 ≥ 每种情况4处伤口,每处伤口≥3个场;学生的t吨-测试;不另说明。 = 不重要。(C)PECAM1染色后,对照组和SPD-FL2-siRNA治疗组之间存在显著差异;n个 ≥ 5;学生的t吨-测试**第页 = 0.0092.(D)CD45染色后,对照组和SPD-FL2-siRNA治疗组之间存在显著差异;n个 ≥ 10; 学生的t吨-测试;第页 = **0.0027; ***第页 = 0.0003; 误差线 = SEM。CD45,分化簇45;增殖细胞核抗原;血小板内皮细胞粘附分子-1。在线提供彩色图像。
<b>图6</b>
图6。
SPD-FL2-siRNA治疗增强小鼠全层烧伤模型的胶原重塑。(A)烧伤后14天,对分伤口进行典型的Herovic染色。经FL2-siRNA处理的动物显示胶原蛋白成熟度提高,III型胶原蛋白减少(蓝色)胶原蛋白I(红色)比率。嵌入式显示40×伤口区域放大图。(B)量化伤口内胶原蛋白比例的图表;n个 ≥ 11; 学生的t吨-测试***第页 = 0.001; 误差线 = SEM。在线提供彩色图像。

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引用人

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