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.2019年5月；23(5):3178-3189.
doi:10.1111/jcmm.14174。 Epub 2019年2月28日。

辐射性皮炎大鼠模型的建立及表征

肖武生 1, 岳州 2 三 4, Hui Wang（王慧） 2 三, 沈永义 5, 廖前进 1, 真饶 6, 邓飞燕 7 8, 谢璐媛（Luyuan Xie） 7 8, 姚朝凌 8, 黄兴茂 8, 刘志燕 8, 彭明静 1, 英龙 1, 曾勇 1, 雷雪 9, 尼娜·高 9, 于刚（Yu Kong） 10, 小周 1 8
附属公司

辐射性皮炎大鼠模型的建立及表征

肖武生等。 细胞与分子医学杂志. 2019年5月.

摘要

辐射性皮炎是放射治疗后常见且严重的副作用。目前的临床治疗不能有效或完全预防放射后皮炎的发生，这仍然是一个重大的临床问题。解决这一挑战需要更好地了解精确的病理生理学，这反过来又需要建立一个合适的动物模型来模拟临床条件，还可以用于研究机制和探索有效的治疗方案。在本研究中，对大鼠进行单次剂量的90Gy照射会导致溃疡、皮肤增厚、炎症、毛囊脱落和皮脂腺脱落，表明该模型已成功建立。少数毛囊细胞迁移形成表皮细胞，照射后皮肤纤维化程度和羟脯氨酸水平均随时间增加。辐射损伤线粒体并诱导皮肤细胞凋亡和自噬。因此，90Gy的照射可以成功建立辐射性皮炎大鼠模型。该模型将有助于开发新的治疗方法，更好地了解辐射性皮炎的病理机制。具体来说，我们的结果表明自噬调节是一个潜在有效的治疗靶点。

关键词：细胞凋亡；自噬；纤维化；放射性皮炎。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1
图1
90Gy辐射诱发大鼠急性和慢性皮肤反应。通过从1（无损伤）到5（严重损伤）的半定量评分来测量皮肤损伤。A、 在辐照后7、28、56和84天，来自90Gy辐照皮肤组织的代表性皮肤图像。B、 对皮肤样本进行辐射损伤目视评分。结果表示为平均值±SEM*P（P）与对照组相比<0.05
图2
图2
溃疡和炎症形成，表皮和真皮增厚，毛囊和皮脂腺脱落。A、 对照组大鼠皮肤的代表性苏木精和曙红染色。B、 照射后4周。C、 照射后12周。D、 测量各组的平均表皮厚度。E、 测量各组的平均真皮厚度。F、 评估各组毛囊密度。G、 评估各组皮脂腺密度。H、 评估各组的迁移毛囊密度。一、 每400×场的淋巴细胞数。J、 每400×场巨噬细胞数量。绿色箭头显示迁移的毛囊。黄色箭头显示角化。黄色圆圈标记浸润的巨噬细胞。绿色圆圈标记浸润的淋巴细胞。结果表示为平均值±SEM*P（P） < 0.05, **P（P）与对照组比较<0.01。H： 毛囊，S：皮脂腺，A：脂肪组织，C：胶原蛋白
图3
图3
90Gy照射后皮肤纤维化随时间增加。A、 对照组、照射后4周和照射后12周大鼠皮肤的典型masson染色。B、 测量各组胶原纤维面积与总面积的比值。C、 测量各组的纤维化相关氨基酸（羟脯氨酸）。结果表示为平均值±SEM*P（P） < 0.05, **P（P）与对照组相比<0.01
图4
图4
辐射损伤线粒体，并诱导细胞凋亡和自噬。在透射电子显微镜下观察皮肤组织的超微结构。（A‐C），对照组。（D‐J），辐射性皮炎组。K、 每100μm自噬空泡数量的量化2细胞质。绿色箭头表示线粒体未受损。红色箭头表示受损线粒体失去了嵴结构。黄色箭头表示自噬空泡。黄色圆圈表示鳞状上皮细胞的桥粒。蓝色圆圈标记凋亡细胞核。N： 鳞状上皮细胞核。结果表示为平均值±SEM*P（P） < 0.05, **P（P）与对照组相比<0.01
图5
图5
皮肤组织中的辐射激活凋亡。A、 TUNEL染色的代表性图像。TUNEL阳性细胞的细胞核呈绿色（原始放大倍数×200）。B、 每个高功率场TUNEL阳性细胞的定量（HPF×200）。C、 BAX、BCL‐2和p53的代表性斑点。D、 蛋白质表达水平分析。结果表示为平均值±SEM*P（P） < 0.05, **P（P）与对照组相比<0.01
图6
图6
皮肤组织中辐射激活的自噬。A、 western blot检测到LC3I/II和Beclin‐1的代表性印迹，β‐actin用作负荷对照。B‐D类。蛋白质表达水平分析。E、 通过LC3B和Beclin‐1染色显示典型的免疫组织化学图像。黄色箭头表示Beclin‐1阳性表达。绿色箭头表示LC3B阳性表达。结果表示为平均值±SEM*P（P） < 0.05, **P（P）与对照组相比<0.01
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