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.2019年2月27日；9(1):2932.
doi:10.1038/s41598-019-39244-9。

阿维那丁胺C对正常人皮肤成纤维细胞氧化和炎症应激的细胞保护作用

王晨萱 1, 克里斯托弗·埃斯奎 2 三
附属公司

阿维那丁胺C对正常人皮肤成纤维细胞氧化和炎症应激的细胞保护作用

王晨萱等。 科学代表. .

摘要

天然多酚不仅具有抗氧化活性，而且能够激活介导衰老过程的特定细胞通路，因此是很有前景的抗衰老化合物。燕麦中特有的Avenantramide C（Avn C）是一种天然抗氧化剂，可清除自由基；然而，这就是这种化合物如何引发其他保护作用。我们研究了暴露于细胞外应激的正常人皮肤成纤维细胞中Avn C的细胞内抗氧化活性和其他细胞保护潜力。Avn C减少H2O（运行）2-通过降低细胞内自由基水平和抗氧化基因转录物诱导氧化应激。Avn C还导致编码促炎细胞因子的基因转录物水平降低，以应对H2O（运行）2或肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。细胞因子基因转录的减少伴随着磷酸化核因子-κB（NF-κB）p65的减少，以及NF-κ子B与DNA结合的减少。Avn C通过增加Nrf2 DNA结合活性进一步诱导血红素氧生成素-1（HO-1）的表达，证明了Avn C减轻细胞应激的第二种机制。总之，我们的研究结果表明，Avn C通过抑制NF-κB和激活Nrf2/HO-1保护正常人皮肤成纤维细胞免受氧化应激和炎症反应。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
图1
Avn A、B和C的化学结构。
图2
图2
Avn C降低H2O（运行）2-诱导2DD成纤维细胞氧化应激和DNA双链损伤。用DMSO（0）或Avn C（100）预处理正常人皮肤成纤维细胞（2DD） μM和200 μM）用于48 h后跟1 暴露于200小时 微米高2O（运行）2. (A类)MitoTracker橙色染色细胞的代表性图像。MitoTracker Orange与细胞内的自由基反应生成橙色荧光。用DAPI（蓝色）对细胞染色质进行复染，以指示细胞核位置。比例尺：50μm。(B类)对cDNA文库进行qRT-PCR谷胱甘肽合成酶（GSS）、血红素氧化酶1（HMOX1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）、谷胱甘苷超氧化物酶1（GPx1）和过氧化氢酶（CAT）基因转录本。数据表示为相对于控件的折叠变化。(C类)γ-H2AX表达的Western blot分析。数据以γ-H2AX与β-肌动蛋白的比率表示。显示了具有代表性的斑点图像。所有图表都显示了三个生物复制的平均值。误差线表示标准偏差*p值 < 0.05，**p值 < 0.01相对于H2O（运行）2单独治疗。
图3
图3
Avn C抑制H2O（运行）2-诱导2DD成纤维细胞中促炎细胞因子mRNA表达和NF-κB活化。用DMSO（0）或Avn C（100）预处理正常人皮肤成纤维细胞（2DD） μM和200 μM）用于48 h后跟1 暴露于200小时 微米高2O（运行）2. (A类)对cDNA文库进行qRT-PCR白介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(白介素-6),白细胞介素8(白介素-8)和肿瘤坏死因子基因转录本。数据表示为相对于控件的折叠变化。(B类)磷酸化-NF的Western blot分析-κB p65（Ser536）（p-p65）表达。数据以p-p65与β-肌动蛋白的比率表示。显示了具有代表性的斑点图像。所有图表都显示了三个生物复制的平均值。误差线表示标准偏差*p值 < 0.05，**p值 < 0.01相对于H2O（运行）2单独治疗。
图4
图4
Avn C抑制TNF-α诱导的2DD成纤维细胞促炎细胞因子mRNA表达和NF-κB活化。用DMSO（0）或Avn C（100）预处理正常人皮肤成纤维细胞（2DD） μM和200 μM）24 h后接4 暴露10小时 纳克/毫升TNF-α。(A类)对cDNA文库进行qRT-PCR白介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(白介素-6),白细胞介素8(白介素-8)和肿瘤坏死因子α基因转录本。数据表示为相对于控件的折叠变化。(B类)磷酸化-NF的Western blot分析-κB p65（Ser536）（p-p65）表达。数据以p-p65与β-肌动蛋白的比率表示。显示了具有代表性的斑点图像。所有图表都显示了三个生物复制的平均值。误差线表示标准偏差*p值 < 0.05，**p值 < 0.01 vs TNF-α单独治疗。
图5
图5
Avn C通过降低2DD成纤维细胞中NF-κB的DNA结合活性来降低促炎细胞因子的转录。(A类)用二甲基亚砜（对照）或Avn C（100）处理2DD人皮肤成纤维细胞 μM和200 μM）用于48 h.对cDNA文库进行qRT-PCR白介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(白介素-6),白细胞介素8(白介素-8)和肿瘤坏死因子基因转录本。数据表示为相对于控件的折叠变化。(B类)DMSO（0）或Avn C（50）处理的2DD细胞中磷酸化-NF-κB p65（p-p65）表达的Western blot分析 100微米 μM和200 μM）用于48 h.数据以p-p65与β-肌动蛋白的比率表示。显示了具有代表性的斑点图像。(C类)磷酸化-NF-κB p65结合活性的ChIP-qPCR分析白介素-1β(IL-1β)和白细胞介素8(白介素-8)在用对照（DMSO）或100处理的2DD细胞中 48μM Avn C h.数据表示为相对于输入%的富集度。所有图表都显示了三个生物复制的平均值。误差线表示标准偏差*p值 < 0.05，**p值 < 0.01 vs对照组。
图6
图6
Avn C通过增加2DD成纤维细胞中Nrf2的DNA结合活性诱导血红素氧合酶-1的表达。(A类)用二甲基亚砜（对照）或Avn C（50 100微米 μM和200 μM）用于48 h.对cDNA文库进行qRT-PCR谷胱甘肽合成酶(GSS公司),血红素加氧酶1(HMOX1型),超氧化物歧化酶1(SOD1标准),谷胱甘肽超氧化物酶1(GPx1型)和过氧化氢酶(猫)基因转录本。数据表示为相对于控件的折叠变化。(B类)二甲基亚砜（对照）或Avn C（100）处理的2DD细胞血红素氧合酶-1（HO-1）表达的Western blot分析 μM和200 μM）用于48 h.数据以HO-1与β-肌动蛋白的比率表示。显示了具有代表性的斑点图像。(C类)基因启动子区Nrf2结合活性的ChIP-qPCR分析血红素加氧酶1(HMOX1型)和NAD（P）H醌脱氢酶1（NQO1）在用二甲基亚砜（对照）或100处理的2DD细胞中 48μM Avn C h.数据表示为相对于输入%的富集度。所有图表都显示了三个生物复制的平均值。误差条表示标准偏差*p值 < 0.05，**p值 < 0.01 vs对照组。
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