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.2019年2月21日;14(2):e0201504。
doi:10.1371/journal.pone.201504。 2019年eCollection。

产灵膏对裸鼠移植性结直肠癌增殖和肝转移的抑制作用

附属公司

产灵膏对裸鼠移植性结直肠癌增殖和肝转移的抑制作用

杨冰(Bing Yang)等。 公共科学图书馆一号. .

摘要

本研究旨在探讨中药复方肠灵膏(CLG)治疗结直肠癌(CRC)的疗效和机制。建立裸鼠移植性大肠癌模型。在CRC移植后7天,用卡培他滨或CLG治疗小鼠3周。术后28天,通过形态学观察大肠癌生长和肝转移情况,观察HIF-1α(缺氧诱导因子-1α)、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、CXCR4(C-X-C趋化因子受体4型)、PI3K、,Western blot和免疫组化检测移植瘤中的Akt和肝脏中的SDF-1α和CXCR4。酶联免疫吸附法检测血清和移植瘤中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和IV型胶原的蛋白含量以及肝组织中SDF-1α和CXCR4的蛋白含量。在卡培他滨和高剂量CLG组,CRC的生长和肝转移受到明显抑制,移植瘤中HIF-1α、SDF-1α,CXCR4、MMP-2、VEGF、PI3K、Akt、P-PI3K和P-Akt的蛋白水平低于模型组,而移植瘤中IV型胶原的含量高于模型组。高剂量的CLG抑制裸鼠移植瘤的生长和CRC的肝转移,可能是通过抑制HIF-1α/SDF-1α-CXCR4/PI3K-Akt信号通路,减少VEGF的合成和释放以及IV型胶原的降解。

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提交人声明,不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。CLG对大肠癌生长的抑制作用。
(A)这个体外LoVo-luc的发光。(B)裸鼠模型建立后第7天的图像(n个= 3).(C)术后第7、14、21和28天不同组IVIS系统中的图像。(D)各组裸鼠在相应时间点的肿瘤生长情况。数据为平均值±SEM(n个=3),用总光通量的变化表示。*P(P)<0.05.vs模型。(E)在立体镜下观察各组解剖的移植肿瘤的图像(n个= 6).(F)CLG对CRC裸鼠体重的影响(n个=6),CLGH对CRC裸鼠体重有良好的维持作用。
图2
图2。CLG对移植瘤肝转移的影响。
(A)肝移植瘤的转移;箭头指向转移部位。不同组肝组织的HE染色切片。每个低倍图片中矩形内的图像都被放大并显示在下面。不同组移植瘤在肝脏的转移数量。(B)CLG对CRC裸鼠肝脏SDF-1和CXCR4的抑制作用。不同组肝组织SDF-1α和CXCR4的免疫组化。ELISA法检测裸鼠肝脏SDF-1α和CXCR4蛋白水平。数据为平均值±SEM(n个= 6).*P(P)与模型相比<0.05。
图3
图3。CLG对相关蛋白的调节作用。
(A)免疫组织化学研究CLG对移植瘤HIF-1α、SDF-1α和CXCR4表达的抑制作用。(B)Western blot检测CLG对移植瘤HIF-1α、SDF-1α和CXCR4表达的抑制作用。模型组、卡培他滨组(32.31 g/L)、CLGL组(136.8 g/L)和CLGH组(545.4 g/L)中HIF-1α(92 kDa)、SDF-1α。数据为平均值±SEM(n个= 6).*P(P)<0.05与模型,#与卡培他滨相比P<0.05,P(P)与CLGL相比<0.05。(C)CLG对移植瘤中PI3K、Akt及其磷酸化的抑制作用。模型组、卡培他滨组(32.31 g/L)、CLGL组(136.8 g/L)和CLGH组(545.4 g/L)PI3K(85 kDa)、Akt(60 kDa。数据为平均值±SEM(n个= 6).*P(P)<0.05与模型,#P(P)<0.05 vs卡培他滨,P(P)与CLGL相比<0.05。(D)通过ELISA检测CLG对血清和/或移植瘤中VEGF、MMP-2和IV型胶原蛋白水平的影响。数据为平均值±SEM(n个= 6).*P(P)<0.05与模型,#P(P)<0.05 vs卡培他滨。所有Western blot实验重复三次。

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工具书类

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MeSH术语

赠款和资金

本研究部分得到了国家自然科学基金(DXT批准号81460697和81760814,by批准号81860819)和贵州省中医药现代化项目基金(SY-2014-3008-1,DXT)的支持。资助者在研究设计、数据收集和分析、决定出版或编写手稿方面没有任何作用。