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.2019年4月:109:8-16。
doi:10.1016/j.biocel.2019.01.013。 Epub 2019年1月23日。

天麻素通过上调microRNA-21保护大鼠心肌细胞H9c2免受低氧损伤

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天麻素通过上调microRNA-21保护大鼠心肌细胞H9c2免受低氧损伤

余兴等。 国际生物化学杂志-细胞生物学. 2019年4月.

缩回

摘要

背景:天麻素(GSTD)在心肌梗死(MI)中的体内保护作用已有报道。然而,其根本机制仍不清楚。在此,我们旨在探讨GSTD对缺氧损伤的H9c2细胞以及下游microRNAs(miRNAs)和信号级联的影响。

方法:建立模拟MI的缺氧损伤模型。分别通过CCK-8法、Western印迹分析和流式细胞术/Western印迹分析测定GSTD预处理对细胞增殖和凋亡的影响。通过干环RT-PCR测定缺氧或缺氧加GSTD处理的细胞中miR-21的表达。随后验证GSTD是否通过miR-21影响缺氧损伤细胞。通过生物信息学方法和荧光素酶报告物分析研究miR-21的直接靶点。此外,通过Western blot分析证实了PTEN/PI3K/AKT和NF-κB通路中关键激酶的表达水平。

结果:GSTD预处理可减轻低氧诱导的细胞活力下降、p53和p16上调、凋亡细胞增加以及Bax、裂解casapse-3和裂解caspase-9上调。miR-21的表达在低氧时上调,而在GSTD治疗时进一步上调。在转染的H9c2细胞中,GSTD对缺氧处理细胞的作用通过miR-21过度表达而增强,而通过miR-21-抑制而逆转。PDCD4被证实是miR-21的直接靶点,并逆转了miR-21对缺氧损伤细胞的作用。最后,GSTD通过上调miR-21下调PTEN表达并增强PI3K、AKT、p65和IκBα的磷酸化水平。

结论:GSTD通过上调miR-21激活PTEN/PI3K/AKT和NF-κB通路,减轻H9c2细胞缺氧损伤。

关键词:天麻素;缺氧损伤;心肌梗死;PTEN/PI3K/AKT/NF-κB;microRNA-21。

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