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.2018年12月18:9:1807。
doi:10.3389/fphys.2018.01807。 2018年eCollection。

衰老和运动训练对人骨骼肌内皮机械传导蛋白血小板内皮细胞粘附分子-1的影响

附属公司

衰老和运动训练对人骨骼肌内皮机械传导蛋白血小板内皮细胞粘附分子-1的影响

拉塞·格里曼等。 前生理学. .

摘要

目标:目的是确定衰老和运动训练对内皮机械感受器蛋白的作用以及被动腿部运动对剪切应力的充血反应。方法:我们检测了年轻人机械感受蛋白的表达和血管功能(n个=14,25±3岁)及以上(n个=14.72±5岁)健康男性受试者进行8周的有氧运动训练。在训练前后,测定被动腿部运动的充血反应,并在被动腿部活动前后进行大腿肌肉活检,以评估剪切应力增加的急性影响。对活检进行蛋白质含量和机械感受器蛋白质磷酸化分析;血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)、血管内皮钙粘蛋白、血管内皮生长因子受体-2和内皮一氧化氮合酶(eNOS)。结果:在训练前,老年组患者对被动腿部运动的充血反应较低,低35%(P(P)<0.05)PECAM-1的相对基础磷酸化水平,而其他机械感受蛋白没有差异。训练后,两组的eNOS蛋白量、PECAM-1蛋白量和被动腿部运动诱导的PECAM-1磷酸化均较高。仅年轻组在训练后对被动腿部运动的充血反应更高。结论:与年轻人相比,老年人对被动腿部运动的充血反应较低,PECAM-1的相对基础磷酸化水平较低。尽管在训练后观察到老年人的充血水平相似,但PECAM-1磷酸化水平较高,这表明训练提高了这种机械转导蛋白的剪切应力反应性。

关键词:老龄化-老年化-老年人;机械传感器;被动腿部运动;剪切应力;血管功能。

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数字

图1
图1
被动腿部运动期间的股动脉血流。(A)被动腿部运动引起的股动脉血流量峰值,(B)股动脉血流从静止到被动腿部运动的变化,(C)被动腿部运动和(D、E)青壮年受试者训练干预前后股动脉血流的时间诅咒#表示与年轻组的差异,表示组内与训练前的差异。数据为平均值±标准偏差。
图2
图2
训练前后青年和老年男性eNOS和机械感受器蛋白的蛋白表达和相对磷酸化。总蛋白表达,丝氨酸磷酸化1177和相对磷酸化内皮型一氧化氮合酶(eNOS;面板A–C)、和血小板内皮粘附分子1(PECAM-1,面板D–F型)在训练干预前后,年轻和老年受试者在休息时的全肌肉匀浆中#表示与年轻组的差异,表示组内与训练前的差异。数据为平均值±标准偏差。
图3
图3
(A–D)训练前后从休息到被动腿部运动期间,eNOS和机械感受器蛋白相对磷酸化的变化。相对变化(A) 内皮一氧化氮合酶丝氨酸1177磷酸化(eNOS)第117页),(B) 血管内皮生长因子受体2丝氨酸1177(VEGF-R2序列1177),(C) 血管内皮钙粘蛋白酪氨酸731(VE CAD轮胎731)、和(D) 血小板内皮粘附分子1酪氨酸713(PECAM-1)泰尔713)培训干预前后的年轻和老年受试者。$表示从休息到被动腿部运动的显著变化,表示组内与训练前的差异。数据为平均值±标准偏差。(E)机械感受器蛋白的典型蛋白质印迹。一名年轻人和一名老年人在VEGF-R2训练前后的免疫印迹序列1177,VE CAD轮胎731和PECAM-1泰尔713样品在可疑环境中运行,并与装载控制一起呈现3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)。注意,eNOS磷酸化的变化是通过肌肉活检横截面内单个微血管的免疫组织化学染色获得的,而机械感受器蛋白反映了整个肌肉匀浆的变化。请参阅“材料和方法”部分和图5以获取代表性图像。
图4
图4
免疫荧光染色的代表性图像。一名年轻和一名老年受试者在被动腿部运动(Pre/PM)前后以及训练前后(Pre/PT)骨骼肌的典型共焦显微镜图像。骨骼肌微血管内皮用欧洲榆-FITC共轭凝集素(UEA-I凝集素,绿色)。骨骼肌eNOS第1177页使用Alexa Fluor 546结合二级抗体(peNOS颜色,红色)显示磷酸化。比例尺代表25μm。箭头指示内皮特异性Ulex和eNOS的阳性染色位置序列1177磷酸化被鉴定为定量。
图5
图5
血浆和骨骼肌间质亚硝酸盐和硝酸盐水平。等离子(A)和肌肉间质(B)训练干预前后青年和老年受试者休息时一氧化氮、亚硝酸盐和硝酸盐(NOx)稳定代谢物的水平。表示与组内培训前不同。数据为平均值±标准偏差。

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