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.2019年5月1日:1710:199-208。
doi:10.1016/j.braines.2018.12.035。 Epub 2018年12月22日。

聚唾液酸掩盖神经细胞粘附分子的抗原性

附属公司

聚唾液酸掩盖神经细胞粘附分子的抗原性

Natacha Coppieters公司等。 大脑研究. .

摘要

神经细胞粘附分子(NCAM)是一种参与主要细胞过程的跨膜蛋白。聚唾液酸(PSA)是一种几乎完全由NCAM进行的翻译后修饰(PTM),其添加会改变NCAM的性质和功能,因此受到严格的调控。NCAM和PSA-NCAM在发育和衰老过程中发生变化,并出现在各种疾病中。PTM的存在会降低抗体对其表位的可及性,并导致假阴性结果。因此,无论是否存在PTM,识别能够特异性检测其目标的抗体至关重要。在本研究中,四种市售NCAM抗体通过western blot和免疫细胞化学进行了表征。通过使用小干扰RNA降低NCAM的表达并随后确定抗体是否仍产生信号来确定抗体特异性。此外,用内神经氨酸酶N消化PSA,以评估去除PSA是否能提高这些抗体的NCAM检测。我们的研究表明,在NCAM上存在PSA降低了抗原表位的抗体可及性,从而掩盖了所研究的两种技术的NCAM抗原性。此外,所测试的四种抗体中有三种是通过免疫印迹和免疫细胞化学检测NCAM的特异性抗体。总之,本研究证明了根据感兴趣的技术选择正确抗体研究NCAM的重要性,并强调了在使用基于抗体的技术研究NCAM时考虑PTM的重要性。

关键词:抗体;内神经氨酸酶;免疫细胞化学;PSA-NCAM;蛋白印迹;内切N。

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