Establishment of a Mouse Model of Premature Ovarian Failure Using Consecutive Superovulation

doi:10.1159/000495895

.2018;51(5):2341-2358.

doi:10.11159/00495895。 Epub 2018年12月7日。

连续超排卵建立卵巢早衰小鼠模型

聂晓伟¹, 戴友金², 袁正（音）², 丹宝², 秦晨², 袁寅², 和林福², 侯道荣^三

附属公司

¹南京中医药大学附属医院生殖医学系，南京，中国。
²南京医科大学动物核心设施模型动物研究重点实验室，南京医科大，中国南京。
^三南京医科大学动物核心设施模型动物研究重点实验室，中国厚道融@njmu.edu.cn。

PMID： 30537739
内政部： 10.1159/000495895

免费文章

连续超排卵建立卵巢早衰小鼠模型

聂晓伟等。细胞生理生化. 2018.

免费文章

.2018;51(5):2341-2358.

doi:10.1159/000495895。 Epub 2018年12月7日。

作者

聂晓伟¹, 戴友金², 袁正（音）², 丹宝², 秦晨², 袁寅², 和林福², 侯道荣^三

附属公司

¹南京中医药大学附属医院生殖医学系，南京，中国。
²南京医科大学动物核心设施模型动物研究重点实验室，南京医科大，中国南京。
^三南京医科大学动物核心设施模型动物研究重点实验室，Chinahoudaorong@njmu.edu.cn。

PMID： 30537739
内政部： 10.1159/000495895

摘要

背景/目的：本研究研究了连续超排对卵巢的影响，并建立了小鼠卵巢早衰（POF）模型。

方法：用孕马血清促性腺激素（PMSG）、人绒毛膜促性腺素（HCG）和前列腺素F2α（PGF2α）连续5～15次超排卵诱导小鼠POF模型。将正常成年小鼠与卵巢自然衰老小鼠进行比较。测定以下血清生化指标：卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、孕酮（P）、雌二醇（E2）、抑制素B（INH B）、丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。用H&E染色法对卵泡进行计数。免疫组织化学染色检测8-羟基鸟苷（8-OhdG）、4-羟基壬醛（4-HNE）、硝基酪氨酸（NTY）、抗苗勒氏激素（AMH）和CDKN2A/p16（p16）的水平。活性氧（ROS）水平用二氢乙硫铵（DHE）染色测定。采用原位TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡。使用Western blotting检测ROS相关通路和p16蛋白中的蛋白质水平。用定量聚合酶链式反应（Q-PCR）检测Sod1、Sod2和Sod3的mRNA水平。采用体外受精（IVF）和受精卵培养评估卵母细胞质量。

结果：与对照组相比，连续超排组的P、E2、SOD、GSH-Px和INH B水平较低，FSH、LH、MDA和ROS水平显著升高，原始卵泡显著减少。连续超数排卵组表现为Sod2、8-OhdG、4-HNE、NTY水平显著升高，SIRT1和FOXO1蛋白水平显著升高、衰老相关蛋白p16水平显著升高以及AMH水平降低，与对照组相比，Sod1和Sod3水平和颗粒细胞凋亡增加。

结论：连续超排卵显著降低卵巢功能和卵母细胞质量，并通过涉及p16和SIRT1/FOXO1信号通路的机制增加卵巢中的氧化应激和凋亡。这些发现表明，连续超排卵可用于建立卵巢老化小鼠模型。

关键词：细胞凋亡；卵巢衰老；排卵；氧化应激；卵巢早衰。

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