研究问题：染色体-10磷酸酶同系物（PTEN）抑制激活卵泡是否影响牛卵母细胞和颗粒细胞的DNA损伤和修复？

总结答案：PTEN抑制促进牛非生长卵泡的激活，但会导致体外卵巢卵泡中DNA损伤增加和DNA修复能力受损。

已知内容：众所周知，PTEN的抑制可激活原始卵泡，但可能会损害进一步的发育潜力。在乳腺癌细胞中，PTEN抑制抑制乳腺癌易感性1（BRCA1）和Rad51的核移位；这会损害DNA修复，导致受损DNA的积累，从而导致细胞衰老。

研究设计、规模、持续时间：将牛卵巢组织碎片单独暴露于对照培养基或含有1或10μM bpv（HOpic）（PTEN的一种药理抑制剂）的体外培养基中24 h。暴露bpv（HOpic）后，收集亚组组织碎片进行Western blot分析。剩下的部分在对照培养基中再培养5天，然后进行组织学和免疫组织化学分析，以检测DNA损伤和修复途径。

参与者/材料、设置、方法：牛卵巢取自屠宰场嘲笑的小母牛。将组织碎片暴露于单独的对照培养基或含有1μM或10μM bpv（HOpic）的培养基中24 h。24 h后收集的组织碎片通过Western blotting进行Akt定量（每组6至9个片段）。毛囊的阶段和形态被分类为剩余的片段。免疫组织化学分析包括FOXO3作为卵泡活化标记物的核排斥，γH2AX作为DNA损伤标记物，减数分裂重组11（MRE11），共济失调毛细血管扩张突变（ATM），Rad51，乳腺癌易感性1（BRCA1）和乳腺癌易损性2（BRCA2）作为DNA修复因子。对来自三个独立实验的29550个卵泡进行了分析。

主要结果和机会的作用：暴露于bpv（HOpic）的组织碎片在丝氨酸473处增加了Akt磷酸化（pAkt/Akt比值，与对照组相比，1和10μM bpv（HOpic）分别高2.25和6.23倍，P<0.05）。与对照组相比，这些组织碎片中生长卵泡的比例明显较高（1μM为78.6%，10μM为88.7%，而对照组为70.5%；P<0.001）。形态健康卵泡的比例在1μM bpv（HOpic）和对照组之间没有显著差异（P<0.001），但在所有卵泡类型中，10μM的卵泡健康度低于1μM和对照组（P<0.05）。与对照组（非生长组，30%和初级组，59%）相比，暴露于1μM bpv（HOpic）（非生长，83%；初级卵泡，76%）和10μM（非生长的，77%；初级，84%）后，卵母细胞中的DNA损伤（γH2AX的表达）增加（所有组P<0.05）。在治疗组非生长卵泡和初级卵泡的卵母细胞中观察到DNA修复蛋白MRE11、ATM和Rad51的表达显著降低（对照组初级卵泡对10μM bpv（HOpic）：MRE，68%对47%；ATM，47%对18%；Rad51，48%对24%），所有组均P<0.05。与对照组相比，高剂量的bpv（HOpic）也导致BRCA1的表达降低，在非生长卵泡和初级卵泡中，1μM的bpv（HOpic）的表达降低（P<0.001）。与对照组（20%，P=0.010）相比，1μM bpv（HOpic）（36%）的初级卵泡卵母细胞中BRCA2表达增加，10μM（1%，P≤0.001）显著减少。与对照组相比，bpv（HOpic）组初级和次级卵泡颗粒细胞的DNA损伤更严重（P<0.05）。然而，bpv（HOpic）对次级卵泡颗粒细胞DNA修复能力没有影响，但较高剂量bpv（HOpic）的BRCA1显著下降。

大规模数据：不适用。

限制、谨慎理由：本研究侧重于培养6天后非生长卵泡的激活，可能无法反映卵母细胞和卵泡生长后期的DNA损伤和修复能力。

调查结果的更广泛含义：卵泡生长的体外激活可能会破坏卵母细胞和颗粒细胞之间的双向信号传递，而这是实现最佳卵母细胞与卵泡健康所必需的。这种大型动物模型可能有助于优化卵泡激活方案，以期转移到临床应用中。

研究资金/竞争利益：这项工作得到了印尼教育捐赠基金的支持。没有竞争利益。

试用注册号：不适用。