跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

HTTP服务器

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2018年10月20日;15(1):292.
doi:10.1186/s12974-018-1327-x。

减少SIRT1表观遗传学上调NALP1表达并有助于化疗药物硼替佐米诱导的神经病理性疼痛

附属公司

减少SIRT1表观遗传学上调NALP1表达并有助于化疗药物硼替佐米诱导的神经病理性疼痛

陈坤(Kun Chen)等。 J神经炎症. .

摘要

背景:硼替佐米是治疗多发性骨髓瘤和其他非实体恶性肿瘤的常用化疗药物。越来越多的证据表明硼替佐米引起的持续疼痛是停止治疗的最常见原因。

方法:采用von Frey试验评估神经病理性疼痛行为,采用实时定量逆转录聚合酶链反应、染色质免疫沉淀、western blot、免疫组织化学和小干扰RNA研究成年雄性Sprague-Dawley大鼠的分子机制。

结果:我们发现,硼替佐米的应用显著增加了脊髓背角神经元中NALP1蛋白和mRNA的表达,鞘内应用NALP1 siRNA可以减轻硼替佐米诱导的机械性痛觉超敏。此外,硼替佐米还降低了SIRT1的表达,用SIRT1激活剂白藜芦醇治疗可以改善硼替佐米诱导的NALP1上调和机械性痛觉超敏。同时,使用SIRT1 siRNA敲低SIRT1可诱导正常动物背角NALP1上调和机械性痛觉超敏。这些结果表明,SIRT1降低可诱导背角神经元NALP1上调,并参与硼替佐米诱导的机械性痛觉超敏反应。重要的是,我们发现硼替佐米治疗前后SIRT1和NALP1启动子区域的结合没有改变,但SIRT1下调增加了p-STAT3的表达。此外,STAT3的激活增强了p-STAT3向Nalp1基因启动子的募集,从而增加了Nalp1启动子区域组蛋白H3和H4的乙酰化,并在硼替佐米治疗的啮齿动物中表观遗传上调了NALPl的表达。

结论:这些发现提示了NALP1上调的一种新的表观遗传机制,包括SIRT1减少和随后在背角神经元NALP1启动子区STAT3介导的组蛋白超乙酰化,这有助于硼替佐米诱导的机械性痛觉超敏。

关键词:硼替佐米;机械性痛觉超敏;NALP1;SIRT1;统计3。

PubMed免责声明

利益冲突声明

道德审批

所有程序均经中山大学动物护理和使用委员会批准,并根据美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》进行。

出版同意书

不适用。

竞争性利益

作者声明,他们没有相互竞争的利益。

出版商备注

施普林格自然公司在公布的地图和机构隶属关系中的管辖权主张保持中立。

数字

图1
图1
脊髓背角NALP1增加与硼替佐米诱导的机械性痛觉超敏有关。腹腔注射硼替佐米(连续5天0.4 mg/kg)显著降低机械停药阈值。n个 = 每组12个**P(P) < 0.01与车辆组相比。NALP1蛋白水平(b条)和信使核糖核酸(c(c))BTZ治疗后,背角的表达显著上调。n个 = 每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比。照片显示BTZ治疗后第10天,大鼠脊髓内神经元标记物(NeuN,红色)或星形胶质细胞标记物(GFAP,红色)或者小胶质细胞标记(OX42,红色)与NALP1(绿色)之间的双重染色。n个 = 每组4个;标尺,50μm。NALP1 mRNA的表达(e(电子))和蛋白质((f))在连续10天鞘内注射NALP1 siRNA后的第10天,背角中的RNA被抑制。n个 =每组5人**P(P) <0.01与相应的干扰siRNA组相比。鞘内注射NALP1 siRNA 10天可减轻BTZ治疗后的机械性超敏反应。n个 =每组12人**P(P) <0.01与车辆组相比,##P(P) <0.01与相应的干扰siRNA组
图2
图2
脊髓背角SIRT1的降低参与了硼替佐米诱导的机械性超敏反应。典型的直方图和印迹显示,BTZ治疗后脊髓后角SIRT1降低。n个=每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比。b条照片显示,BTZ治疗后第10天,大鼠脊髓中神经元标记物(NeuN,绿色)或星形胶质细胞标记物(GFAP,绿色)或者小胶质细胞标记(OX42,绿色)与SIRT1(红色)之间的双重染色。n个 = 每组3只;比例尺,100μm。c(c)连续鞘内注射白藜芦醇(剂量为500μg/10μl或250μg/10µl,但不是50μg/10¦Μl)10天,可以改善BTZ治疗后的机械性痛觉超敏。n个每组=12**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) <0.01相对于相应车辆 + 硼替佐米组。鞘内注射SIRT1 siRNA下调背角SIRT1的表达。n个=每组3人**P(P) < 0.01对照组,##P(P) < 与相应的siRNA组相比为0.01。e(电子)SIRT1 siRNA下调SIRT1可诱导正常大鼠机械性痛觉超敏反应。n个 = 每组8人**P(P) < 0.01对照组
图3
图3
SIRT1在硼替佐米治疗后调节NALP1的表达。照片显示,硼替佐米治疗后第10天,脊髓背角SIRT1(红色)与NALP1(绿色)之间出现双重染色。n个 = 每组4个;标尺,50μm。鞘内注射白藜芦醇(250μg/10μl,持续10天)抑制NALP1 mRNA的上调(b条)和蛋白质(c(c))BTZ治疗后第10天大鼠背角的水平。n个 = 每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) < 0.01与相应的BTZ组相比。鞘内注射SIRT siRNA可增加正常大鼠NALP1的表达。n个 = 每组6人**P(P) < 0.01与对照组
图4
图4
P-STAT3(而非SIRT1)在硼替佐米治疗后直接介导NALP1的表达。照片显示,硼替佐米治疗后第10天,脊髓背角SIRT1(红色)与NALP1(绿色)之间出现双重染色。n个=每组4人;标尺,50μm。b条BTZ治疗后第10天应用白藜芦醇(i.t.)可减少p-STAT3的增加。n个 = 每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) < 0.01与相应的BTZ组相比。BTZ治疗显著增加组蛋白H3(K9)的整体乙酰化(c(c))和H4(K16)()在大鼠脊髓背角。n个 = 每组6个**P(P) < 0.01与车辆组相比。e(电子)ChIP结果显示,BTZ治疗后第10天,p-STAT3向Nalp1基因启动子的募集增强。n个 = 每组5人**P(P) < 0.01与车辆组相比。(f)在接受硼替佐米治疗的大鼠脊髓背角中,SIRT1向Nalp1基因启动子的募集在第10天没有显著变化。n个=每组5人**P(P) < 0.01与车辆组相比。ChIP分析显示,BTZ治疗增加了大鼠Nalp1基因启动子区p-STAT3结合位点旁组蛋白H3和H4的乙酰化。n个 = 每组6人**P(P) < 0.01相对于相应的车辆组,##P(P) < 0.01与相应的车辆组
图5
图5
通过结合p300激活STAT3,增加Nalp1启动子上乙酰化组蛋白H3和H4的水平。持续注射STAT3活性抑制剂S3I-201(100μg/10μl,持续10天,i.t.)抑制NALP1 mRNA的上调()和蛋白质(b条)BTZ治疗后第10天的水平。n个=每组8人**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) < 0.01与相应的BTZ组相比。c(c)注射AAV8-Cre-GFP后第21天,在小鼠背角观察到明显的绿色荧光。鞘内注射AAV-Cre-GFP导致STAT3局部缺失flox/flox公司小鼠显著降低BTZ诱导的脊髓背角NALP1蛋白的上调。n个=每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) < 0.01与相应的AAV-GFP组相比。e(电子)BTZ给药后,大鼠脊髓背角的p-STAT3抗体使p300显著增加。n个=每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比。(f)硼替佐米治疗后不同时间点,P300抗体显著免疫沉淀p-STAT3升高。n个=每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比。在BTZ治疗后的第10天,鞘内注射S3I-201减少了含有p-STAT3结合位点的Nalp1基因启动子区乙酰化H3或H4的增加。n个=每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) < 0.01与相应的BTZ组相比。小时鞘内注射AAV Cre-GFP对STAT3的局部缺乏flox/flox公司小鼠降低BTZ诱导的Nalp1基因启动子H3或H4乙酰化的上调。n个=每组6人**P(P) < 0.01与车辆组相比,##P(P) < 0.01与注射AAV-GFP的相应BTZ组相比

类似文章

引用人

工具书类

    1. Ale A,Bruna J,Navarro X,Udina E.抗肿瘤蛋白酶体抑制剂诱导的神经毒性。神经毒理学。2014;43:28–35. doi:10.1016/j.neuro.2014.02.001。-内政部-公共医学
    1. Miltenburg NC,Boogerd W.化疗引起的神经病变:一项综合调查。《癌症治疗》2014年修订版;40:872–882. doi:10.1016/j.ctrv.2014.04.004。-内政部-公共医学
    1. Strowig T、Henao-Mejia J、Elinav E、Flavell R.《健康与疾病中的炎症体》。自然。2012;481:278–286. doi:10.1038/nature10759。-内政部-公共医学
    1. Tschopp J,Martinon F,Burns K.NALPs:与炎症有关的新蛋白家族。Nat Rev Mol细胞生物学。2003;4:95–104。doi:10.1038/nrm1019。-内政部-公共医学
    1. Shi X、Wang L、Li X、Sahbaie P、Kingery WS、Clark JD。神经肽通过调节角质形成细胞中白细胞介素-1β的产生,促进外周伤害性敏化。Anesth分析。2011;113:175–183. doi:10.1213/ANE0b013e31821a0258。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

MeSH术语