VOPP1 promotes breast tumorigenesis by interacting with the tumor suppressor WWOX

doi:10.1186/s12915-018-0576-6

.2018年10月2日；16(1):109.

doi:10.1186/s12915-018-0576-6。

VOPP1通过与肿瘤抑制因子WWOX相互作用促进乳腺肿瘤发生

附属公司

¹法国巴黎居里研究所遗传系药物基因组学室，75005。
²现住址：法国巴黎索邦巴黎城巴黎迪德罗大学雅克·莫诺德研究所INSERM U950，邮编：75013。
^三法国巴黎居里研究所遗传系体遗传学室，75005。
⁴病理学，肿瘤生物学系，居里研究所，75005，巴黎，法国。
⁵Hybrigenics Services，75014，法国巴黎。
⁶INSERM U830，居里研究所，75005，法国巴黎。
⁷法国巴黎居里研究所遗传系药物基因组学室，75005。francois.lallemand@curie.fr。

PMID： 30285739
预防性维修识别码： PMC6169085型
内政部： 10.1186/s12915-018-0576-6

VOPP1通过与肿瘤抑制因子WWOX相互作用促进乳腺肿瘤发生

弗洛里安·博宁等。 BMC生物. 2018.

.2018年10月2日；16（1）：109。

doi:10.1186/s12915-018-0576-6。

附属公司

¹法国巴黎居里研究所遗传系药物基因组学室，75005。
²现住址：法国巴黎索邦巴黎城巴黎迪德罗大学雅克·莫诺德研究所INSERM U950，邮编：75013。
^三法国巴黎居里研究所遗传系体遗传学室，75005。
⁴病理学，肿瘤生物学系，居里研究所，75005，巴黎，法国。
⁵Hybrigenics Services，75014，法国巴黎。
⁶INSERM U830，居里研究所，75005，法国巴黎。
⁷法国巴黎居里研究所遗传系药物基因组学室，75005。francois.lallemand@curie.fr。

PMID： 30285739
预防性维修识别码： PMC6169085型
内政部： 10.1186/s12915-018-0576-6

摘要

背景：含有WW结构域的氧化还原酶（WWOX）基因在乳腺癌中经常发生改变，它编码一种肿瘤抑制因子，其功能是通过与癌相关蛋白（如促凋亡蛋白p73α）的相互作用来介导的。

结果：为了更好地了解WWOX在乳腺肿瘤发生中的作用，我们进行了酵母双杂交筛选和联合免疫沉淀分析，以确定该蛋白的新伙伴。我们将肿瘤生存前蛋白1（VOPP1）中的水泡过度表达描述为WWOX的一种新调节因子。在乳腺癌细胞中，VOPP1将WWOX隔离在溶酶体中，削弱其与p73α结合的能力，并抑制WWOX依赖的凋亡。过度表达的VOPP1增强细胞转化并促进体内移植瘤的生长。VOPP1在乳腺肿瘤中过度表达，尤其是在保留WWOX的肿瘤中。此外，VOPP1表达增加与WWOX阳性患者的生存率降低有关，但与WWOX-阴性肿瘤无关。

结论：这些发现强调了VOPP1对WWOX的隔离以及乳腺肿瘤中WWOX丢失的重要性，并将VOPP1定义为通过抑制WWOX抗肿瘤作用促进乳腺癌发生的新癌基因。

关键词：乳腺肿瘤；VOPP1；WWOX公司。

PubMed免责声明

利益冲突声明

道德批准和参与同意

这项研究是根据《法国生物伦理法2004-800》和《法国国家癌症研究所（INCa）伦理宪章》进行的，并得到居里研究所审查委员会和伦理委员会（Comitéde Pilotage du Groupe Sein）的批准，该委员会不需要参与者的书面知情同意。女性被告知其组织的研究用途，并没有宣布任何反对该研究的意见。

出版同意书

不适用。

竞争性利益

作者声明，他们没有相互竞争的利益。

出版商备注

Springer Nature在公布的地图和机构关联中的管辖权主张方面保持中立。

数字

图1
WWOX和VOPP1表达、相互作用和结合域。一Myc-WOX和Flag-VOPP1在HEK-293T细胞中的共免疫沉淀。指出了免疫沉淀（IP）和免疫印迹（IB）分析的抗体。*VOPP1系统*信使核糖核酸(b条)和蛋白质(**c（c）**)在10个乳腺癌细胞系中表达。d日内源性WWOX/VOPP1复合物的共免疫沉淀。用正常兔IgG作为阴性对照（IgG）或抗VOPP1抗体（VOPP1）免疫沉淀MDA-MB-468细胞。用WWOX抗体免疫印迹法检测免疫沉淀物。电子与野生型和突变体形式的WWOX和VOPP1的共免疫沉淀构建WWOX_第33年，第1次投票_Y119A型，VOPP1_157A日元和VOPP1_165日元按照HEK-293T细胞的指示进行。WCL，全细胞裂解物

图2
WWOX、VOPP1和WWOX/VOPP1复合物在Hela细胞中的亚细胞定位。一用WWOX表达载体转染细胞。免疫染色与抗WWOX和抗GM130抗体重叠表明WWOX蛋白在高尔基体中定位。b条用VOPP1转染细胞。VOPP1标记符合LAMP2模式，但不符合GM130或EE1A分布，表明VOPP1蛋白的溶酶体定位。**c（c）**将WWOX和VOPP1（左面板）或WWOX与VOPP1转染Hela细胞_165A日元（右侧面板）如图所示的表达载体。用抗VOPP1、抗WWOX和抗GM130免疫染色后，用DAPI对细胞进行复染。在表达VOPP1的细胞中观察到WWOX和VOPP1共定位（黄色），但没有观察到VOPP1_165A日元所有实验均使用3D反卷积显微镜和图像数字叠加（原始放大倍数× 100)

图3
VOPP1的耗尽导致WWOX从溶酶体亚细胞重定位到高尔基体。一内源性WWOX和VOPP1在MDA-MB-468中的亚细胞定位。细胞被固定、渗透，并用抗WWOX、抗VOPP1和抗GM130（左面板）或抗LAMP2（右面板）抗体进行免疫染色，如所示，然后用适当的二级荧光结合抗体进行染色。b条VOPP1表达的抑制诱导了WWOX在高尔基体中的重新定域。用对照siRNA（Si-Ctrl）或*VOPP1系统*siRNA（Si-VOPP1）如图所示。转染三天后，细胞固定、渗透，并用抗WWOX和抗GM130抗体进行免疫染色。然后用DAPI对细胞进行复染，并用荧光显微镜（原始放大倍数× 100)

图4
VOPP1抑制WWOX促凋亡活性。一用对照（Si-Ctrl）转染MD-MB-468细胞*VOPP1系统*siRNA（Si-VOPP1）作用3天。用抗VOPP1、抗裂解PARP和抗GAPDH（负荷控制）抗体对细胞提取物进行免疫印迹。b条按照指示的时间进行MTS分析；单元格数表示为平均值+代表性实验的三倍SEM。学生t吨测试(*第页 < 0.05; **第页 < 0.01***第页 < 0.001).c（c）MD-MB-468细胞转染对照组，*VOPP1系统*、和*WWOX公司*如图所示的siRNAs。三天后，收集细胞并用流式细胞术评估凋亡细胞的百分比。d日HEK-293T细胞转染HA-p73α（0.5μg）、Myc-WOX（0.5μg）、Flag-VOPP1（0.5或1μg）和Flag-VOPP1_165A日元（1μg）表达载体，如图所示。共免疫沉淀结果显示，异位VOPP1存在时WWOX-p73复合物水平降低，但VOPP1不存在_165A日元.电子将HA-p73α单独或与WWOX、WWOX和VOPP1或WWOX与VOPP1联合转染细胞_165A日元如图所示的表达载体。转染后24小时，细胞被固定、渗透，并用抗WWOX、抗VOPP1和抗HA抗体进行免疫染色，随后用适当的二级荧光偶联抗体进行染色。免疫染色后，用荧光显微镜对细胞成像，并覆盖图像（原始放大倍数× 100)

图5
VOPP1诱导体外细胞转化和体内肿瘤发生。一用表达VOPP1的对照载体稳定转染NIH3T3细胞。用抗VOPP1和抗GAPDH（负荷控制）抗体对细胞提取物进行免疫印迹。b条稳定表达VOPP1（3T3-VOPP1）或空载体（3T3-ctrl）的NIH3T3细胞的形态。**c（c）**低放大率照片显示了软琼脂集落形成分析的结果，显示了接种3T3-Ctrl和3T3-VOPP1细胞后21天形成的集落数量和大小。d日菌落数的定量结果表示为平均值 ± 典型实验的SEM(n个 = 4).电子2.10⁶将3T3-Ctrl和3T3-VOPP1细胞皮下注射到SCID小鼠的侧翼，并测量肿瘤随时间的增长情况(n个 = 每组10个），最多35天。**（f）**当肿瘤体积达到约2 cm时，处死3T3-Ctrl和3T3-VOPP1小鼠^三; 否则，在实验结束时（第25周，仅对3T3-VOPP1小鼠）将其处死，获得肿瘤的代表性图像（比例尺，1厘米）。克3T3-Ctrl和3T3-VOPP1肿瘤的免疫组织化学染色，显示抗体（比例尺=100μm）。小时肿瘤中Ki67+增殖细胞的定量。通过执行学生t吨测试(*第页 < 0.05; **第页 < 0.01***第页 < 0.001)

图6
VOPP1在人类乳腺肿瘤中的表达。一448例乳腺肿瘤中VOPP1表达的实时PCR分析。显示VOPP1染色体区域的CGH图谱突出显示了两种肿瘤。使用Mann-Whitney进行统计分析单位测试(***第页 < 0.001).b条24例肿瘤中VOPP1蛋白表达的免疫组化分析的代表性图像。箭头表示血管。**c（c）**免疫组化结果的量化显示b条.d日Kaplan-Meier曲线显示肿瘤患者无转移生存率高（红线）与低（蓝线）*VOPP1系统*信使核糖核酸

图7
人类乳腺肿瘤中WWOX和VOPP1的同时表达。一448名乳腺癌患者被分为两组（低WWOX(< 0.6),n个 = 193; 和高WWOX（≥ 0.6),n个 = 255），肿瘤高表达比例（≥ 2.5）或低水平(< 在各组中评估VOPP1的2.5）。通过X平方检验计算统计显著性(b条). Kaplan-Meier曲线显示肿瘤患者的无转移生存率，肿瘤患者在低或高WWOX水平患者的亚群中表达高（红线）与低（蓝线）VOPP1/WWOX比率。**c（c）**多变量Cox比例风险分析显示VOPP1/WWOX表达比率在保留WWOX基因表达的乳腺癌患者预后中的独立性（HR，风险比；CI，置信区间）

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[6] Aldaz CM、Ferguson BW、Abba MC.WWOX处于癌症、代谢综合征相关特征和中枢神经系统疾病的十字路口。Biochim生物物理学报。2014;1846:188–200.-项目管理咨询公司-公共医学

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[10] Baryla I、Styczen-Binkowska E、Bednarek AK。人类癌症中WWOX的改变：临床观点。Exp Biol Med（Maywood）2015年；240:305–314. doi:10.1177/1535370214561953。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

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