Reappraising the microscopic anatomy of human testis: identification of telocyte networks in the peritubular and intertubular stromal space

doi:10.1038/s41598-018-33126-2

.2018年10月3日；8(1):14780.

doi:10.1038/s41598-018-33126-2。

重新认识人类睾丸的显微解剖：确定管周和管间质间隙中的端粒细胞网络

米尔卡·马里尼¹, 艾琳·罗莎¹, 丹妮尔·瓜斯蒂¹, 毛罗·加奇², Eleonora Sgambati公司³, 利迪娅·伊巴·曼内西¹, 米尔科·马内蒂⁴

附属公司

¹意大利佛罗伦萨大学解剖与组织科实验与临床医学系。
²意大利佛罗伦萨大学微创和机器人泌尿外科及肾脏移植系。
³意大利伊塞尔尼亚佩切莫利斯大学生物科学与领土系。
⁴意大利佛罗伦萨大学解剖与组织科实验与临床医学系。mirko.manetti@unifi.it。

PMID： 30283023
预防性维修识别码：下午6170475
内政部： 10.1038/s41598-018-33126-2

重新认识人类睾丸的显微解剖：确定管周和管间质间隙中的端粒细胞网络

米尔卡·马里尼等。科学代表. 2018.

.2018年10月3日；8(1):14780.

doi:10.1038/s41598-018-33126-2。

作者

米尔卡·马里尼¹, 艾琳·罗莎¹, 丹尼尔·瓜斯蒂¹, 毛罗·加奇², Eleonora Sgambati公司³, 利迪娅·伊巴·曼内西¹, 米尔科·马内蒂⁴

附属公司

¹意大利佛罗伦萨佛罗伦萨大学实验与临床医学系，解剖学和组织学系。
²意大利佛罗伦萨大学微创和机器人泌尿外科及肾脏移植系。
³意大利伊塞尔尼亚佩切莫利斯大学生物科学与领土系。
⁴意大利佛罗伦萨大学解剖与组织科实验与临床医学系。mirko.manetti@unifi.it。

PMID： 30283023
预防性维修识别码： PMC6170475型
内政部： 10.1038/s41598-018-33126-2

摘要

端粒细胞是一种最近被描述的基质细胞类型，广泛分布于各种器官，包括女性和男性生殖系统。本研究旨在首次采用综合形态学方法（免疫组织化学、免疫荧光和透射电镜）研究正常人睾丸中端粒细胞的存在、分布和特征。我们发现，端粒细胞表现出典型的长形和念珠状延长，CD34和PDGFRα共存，在肾小管周围组织的外层以及管间质中Leydig细胞和血管周围形成网络。睾丸端细胞对CD31、c-kit/CD117和α-SMA的免疫表型为阴性，因此可与位于肾小管周围组织内层的肌样细胞/肌成纤维细胞明确区分。透射电子显微镜证实在上述位置存在超微结构上可识别为端粒细胞的细胞（即具有端足交替足细胞和足细胞的细胞）。在整个睾丸间质室中观察到相邻的端细胞和端足之间的细胞间接触。端足类与肾小管周围肌样细胞/肌成纤维细胞、间质细胞和血管紧密接触。在端足类附近也经常发现胞外小泡。总之，我们证明了端粒细胞是人类睾丸中一种以前被忽视的基质成分，其在组织内稳态中的潜在意义值得进一步研究。

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作者声明没有相互竞争的利益。

数字

图1
人类睾丸切片的光学显微镜照片。(A类–C类)苏木精和曙红染色组织切片的代表性显微照片。在不同切面切割的生精小管被管周和管间结缔组织包围(**A、 B类**). 注意最佳保存管周和管间间质，睾酮分泌Leydig细胞的典型簇群的存在证明了这一点，它们在靠近微血管的地方显示出广泛的嗜酸性细胞质（星号），并嵌入细胞外基质中(C类). (D类–**H（H）**)睾丸切片经CD34免疫过氧化物酶免疫组化苏木精复染后的代表性显微照片。CD34阳性间质细胞（红色染色）在管周和管间质空间形成一个连续的网络(**D、 E类**). 高倍镜下，CD34阳性间质细胞呈细长/纺锤形，生精小管周围有细长的曲张细胞质延长（箭头位于F类)以及Leydig细胞（中的星号F类–**H（H）**)和微血管（箭头F类)在管间基质中。血管内皮细胞（BV）也可见CD34免疫反应；插图中显示了血管管腔内壁的CD34阳性内皮细胞（箭头）和血管基底膜（箭头）外胚层侧壁的CD34-阳性间质细胞（箭头(**G公司**). CD34阳性间质细胞在管间质组织中的Leydig细胞（星号）周围构成一个复杂的网状结构(**H（H）**). 比例尺：200 微米(**A、 D类**), 100 微米(**B、 E类**)，50 微米(**C、 F–H（飞行高度）**).

图2
人类睾丸切片的双重免疫染色。(A类)CD34（绿色）和CD31（红色）免疫荧光标记的代表性显微照片，细胞核用4′，6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI；蓝色）复染。CD34阳性间质细胞围绕生精小管（ST）并在管间质组织中形成网状结构，缺乏CD31免疫反应性。微血管管腔内的内皮细胞（箭头所示）为CD34-阳性/CD31-阳性。(B类)CD34（绿色）和c-kit/CD117（红色）免疫荧光标记的代表性显微照片，细胞核DAPI（蓝色）复染。分布在肾小管周围和肾小管间质中的CD34阳性间质细胞对c-kit/CD117呈免疫表型阴性。在卵圆形/圆形细胞中检测到c-kit/CD117的免疫反应性，这些细胞可能是Leydig细胞和/或肥大细胞，周围是CD34阳性间质细胞网络。插图中描绘了被CD34阳性间质细胞的细胞质突起包裹的c-kit/CD117阳性细胞的更高放大倍数。比例尺：50 微米(**A、 B类**).

图3
人类睾丸切片的双重免疫染色。(**A、 B类**)CD34（绿色）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA；红色）免疫荧光标记的代表性显微照片。细胞核用4′，6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI）复染成蓝色。CD34-阴性/α-SMA阳性肌样细胞/肌成纤维细胞位于生精小管周围结缔组织的内层。相反，CD34-阳性/α-SMA阴性间质细胞位于肾小管周围组织的外层。这两种细胞类型在肾小管周围结缔组织中形成不同但紧密相邻的网络；由于细胞延长的并置，可见散在的黄色染色。CD34-阳性/α-SMA阴性间质细胞形成一个连续的网络，从外管周组织延伸至管间质。管间基质中没有CD34-阴性/α-SMA阳性肌样细胞/肌成纤维细胞。血管壁细胞（周细胞和平滑肌细胞）中也检测到α-SMA免疫反应（箭头所示）。比例尺：50 微米(**A、 B类**).

图4
人类睾丸切片的双重免疫染色。(**A–F**)CD34（绿色）和血小板衍生生长因子受体α（PDGFRα；红色）与4′，6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI；蓝色）免疫荧光染色的代表性显微照片对细胞核进行了复染。单幅绿色和红色图像如所示(**A、 D类**)和(**B、 E类**)，而合并图像显示在(**C、 F类**). 所有CD34阳性间质细胞均位于生精小管（ST）周围结缔组织外层和管间质中，共同表达PDGFRα（黄色染色）。位于肾小管周围结缔组织内层的CD34阴性肌样细胞/肌成纤维细胞中也发现PDGFRα免疫反应。比例尺：50 微米(**A-C公司**), 30 微米(**D–F型**).

图5
甲苯胺蓝染色人睾丸半薄切片的光学显微镜照片。(**A–D**)在生精小管（ST）（箭头）周围的结缔组织中观察到大量纺锤状间质细胞，具有非常长和薄的念珠状细胞质突起。这些细胞也广泛分布于管间质空间（箭头所示），在那里可以在中性位置或微血管和类固醇生成性Leydig细胞（星号）周围找到。中的装箱区域(B类)插图中放大倍率较高；注意纺锤形间质细胞的双极形态，其胞体包含大细胞核和极少量细胞质，从中突然产生两个相当卷曲的细长念珠状延伸。比例尺：50 微米(A类), 25 微米(**B–D类**).

图6
人睾丸间质室的超微结构研究。(**A–F**)睾丸超薄切片的典型透射电镜照片，用无铀和亚硝酸铋溶液染色。端粒细胞（TC）的超微结构特征是：（i）纺锤形、卵圆形或梨状细胞体，主要由一个相对较大的常染色细胞核占据，细胞核周围有稀少的细胞质，（ii）端粒细胞的存在（Tp），长的细胞质突起，从细胞体中狭长突起，呈念珠状轮廓，特征是细段（足粒）和扩张部分（足粒”）交替出现。(A类)具有长端足的端粒细胞位于肾小管周围结缔组织的外层，而肌样细胞/肌成纤维细胞（My）位于与生精小管（ST）基底膜紧密接触的内层。(B类)端足类通常是卷曲的，在管间基质中形成网状结构。注意细胞间的接触（如箭头所示B类)在一个末端细胞的细胞体和另一个末端细胞的末端足之间。(**C–E**)端粒细胞的端足与肾小管周围肌样细胞/肌成纤维细胞建立密切接触（如箭头所示C类)管间类固醇生成性Leydig细胞（LC）（箭头所示D类)和血源性单核细胞（MO）（箭头所示E类). 末端足附近存在大量细胞外小泡(E类，插图中以更高的放大倍数显示）。(F类)端粒细胞的长而卷曲的端足细胞紧紧地包围着血管（BV）基底膜的洗涤侧。注意周细胞（P）嵌入血管基底膜。比例尺：5 微米(**A、 C、E、F**), 2 微米(**B、 D类**).

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1. 大卫杜夫MS，Breucker H，Holstein AF，Seidl K。人类生精小管固有层的细胞结构。细胞组织研究1990；262:253–261. doi:10.1007/BF00309880。-内政部-公共医学
1. Holstein AF、Maekawa M、Nagano T、Davidoff MS。人类生精小管固有层的肌成纤维细胞是异质表型的动态结构。架构（architecture）。历史。细胞。1996;59:109–125. doi:10.1679/aohc.59.109。-内政部-公共医学
1. Davidoff MS、Schulze W、Middendorff R、Holstein AF。人类睾丸的Leydig细胞——弥散神经内分泌系统的新成员。《细胞组织研究》1993；271:429–439。doi:10.1007/BF02913725。-内政部-公共医学
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