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.2018年8月;15(3):228-237.
doi:10.20892/j.issn.2095-341.2017.0150。

长非编码RNA的敲除LCPAT1型抑制肺癌自噬

附属机构

长非编码RNA的敲除LCPAT1型抑制肺癌自噬

小雨等。 癌症生物医学. 2018年8月.

摘要

目标:长非编码RNA(lncRNAs)参与肺癌细胞的许多生物学过程。在我们之前的研究中,我们发现了一种lncRNA,ENST00000439577号机组在肺癌中高度表达,称为肺癌进展相关转录物1(LCPAT1型). 描述LCPAT1型在肺癌方面,我们进行了当前的研究。

方法:的表达式LCPAT1型采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测肿瘤组织和肺癌细胞株中的自噬相关标记物。采用苏木精-伊红(HE)染色、qPCR、Western blot和免疫组织化学方法评估异种移植瘤组织。采用Western blot和免疫荧光法检测雷帕霉素诱导的肺癌细胞自噬。

结果:的表达式LCPAT1型和微管相关蛋白1轻链3β(LC3B公司)与肺癌呈正相关。击倒LCPAT1型抑制肿瘤生长和抑制细胞自噬体内此外,LCPAT1型肺癌细胞系中的敲除导致自噬相关基因表达降低,并减轻雷帕霉素诱导的细胞自噬。

结论:我们推测LCPAT1型在肺癌的自噬调节中起着至关重要的作用。

关键词:ENST00000439577;LCAPT1;肺癌;自噬;长的非编码RNA。

PubMed免责声明

数字

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之间的相关性LCPAT1型LC3B公司在肺癌中的表达。(A) 基因表达LCPAT1型LC3B公司在肺癌患者的肿瘤组织和匹配的邻近正常组织中。数据以平均值±SEM表示**P(P)< 0.01. (B) 正常和肺癌组织中具有代表性的LC3B及其密度(IOD/Aera)免疫组化染色图像(400×)。(C) 之间的相关性LCPAT1型LC3B公司肺癌患者肿瘤组织中的表达。
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LCPAT1型击倒异种移植模型。(A) 上部:LCPAT1型-shRNA(shLCPAT1型)-和对照shRNA(shcontrol)转染的H1975细胞被植入小鼠的侧翼(n个= 6). 红色箭头表示植入了sh的肿瘤LCPAT1型-左侧为转染的H1975细胞,黑色箭头表示右侧为植入shcontrol转染的H2975细胞的肿瘤。下部:肿瘤表达shLCPAT1型或shcontrol。(B) 肿瘤生长曲线。数据表示为平均值±SEM*P(P)< 0.05, **P(P)< 0.01, ***P(P)< 0.001. (C) 异种移植瘤组织的H&E染色LCPAT1型-和shcontrol转染的H1975细胞(左:100×,右:200×)。
三
自噬调节体内LCPAT1.(A)表达的qPCR分析LCPAT1型在稳定转染的H1975细胞系中。数据表示为平均值±SEM**P(P)< 0.01. (B) 表达的qPCR分析LCPAT1型在异种移植的肿瘤组织中。数据以平均值±SEM表示***P(P)< 0.001 (n个= 6). (C) 表达的qPCR分析LC3B公司,自动液位计3,自动液位计5,ATG12型,ATG14型、和BECLIN1公司单位:shLCPAT1型和shcontrol异种移植瘤组织(n个= 6). 数据以平均值±SEM表示*P(P)< 0.05, **P(P)< 0.01, ***P(P)< 0.001. (D) p62、ATG5、BECLIN1和LC3B表达的Western blot分析的代表性图像和定量LCPAT1型和shcontrol异种移植瘤组织(n个= 4). 编号1-4表示小鼠的数量。数据以平均值±SEM表示*P(P)< 0.05. (E) sh中LC3B和ATG5表达的代表性图像(400×)和免疫组织化学定量分析LCPAT1型并使用Image Pro-plus 6.0软件对异种移植瘤组织进行shcontrol(n个= 4). 数据以平均值±SEM表示*P(P)< 0.05, **P(P)< 0.01.
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引用人

工具书类

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赠款和资金

本研究由国家自然科学基金(81401046号和21777099号)、上海交通大学跨学科研究重点基金(YG2015ZD01号)和上海交通大学“新青年教师创业计划”资助