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.2018年10月；18（4）：3932-3940。
doi:10.3892/mmr.2018.9401。 Epub 2018年8月20日。

下调Krüppel‑like factor 1抑制宫颈癌细胞的转移和侵袭

朱碧生 1, 刘启生 2, 齐汉 1, 曾伯杭 三, 陈静琦 三, 肖秋菊 1
附属公司

下调Krüppel‑like factor 1抑制宫颈癌细胞的转移和侵袭

朱碧生等。 分子医学代表. 2018年10月.

摘要

宫颈癌是严重威胁妇女健康的最常见恶性肿瘤之一。据报道，KLüppel‑like factors（KLFs）与宫颈癌的进展有关。本研究调查了KLF1在宫颈癌中的作用，目前尚不清楚。通过逆转录定量聚合酶链反应（RT‑qPCR）和western blotting检测KLF1在不同宫颈细胞系中的表达。通过细胞计数试剂盒‑8、伤口愈合和跨孔分析分别检测细胞增殖、转移和侵袭。通过RT‑qPCR和western blotting检测相关因子的表达。此外，通过western blot分析测定磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）和蛋白激酶B（Akt）的磷酸化水平。结果表明，KLF1在SiHa、Caski和C4‑1宫颈癌细胞中表达增强。然而，KLF1敲低抑制了SiHa宫颈癌细胞的增殖、转移和侵袭。KLF1基因敲除还抑制Ki67、转移相关抗原1和基质金属蛋白酶（MMP）-2的表达。KLF1基因敲除促进非转移性克隆23 1型和金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达，MMP‑9的表达也略有促进。此外，KLF1基因敲除抑制PI3K/Akt信号通路。因此，可以得出结论，KLF1通过PI3K/Akt信号通路促进宫颈癌细胞的转移和侵袭。

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数字

图1。
图1。
宫颈癌患者和细胞株中KLF1的表达水平。（A） 在cBioPortal网站上对查询基因有无改变的宫颈癌患者进行在线生存分析。（B） 宫颈癌细胞系（SiHa、Caski和C4-1）中KLF1的mRNA水平显著升高。（C） 宫颈癌细胞系（SiHa、Caski和C4-1）中KLF1的蛋白水平显著升高**与正常细胞相比P<0.01。KLF1，类Krüppel因子1。
图2。
图2。
KLF1-siRNA在SiHa宫颈癌细胞中的转染作用。在KLF1-siRNA组中，KLF1的（A）mRNA和（B）蛋白水平显著降低**与对照组相比P<0.01；^^与模拟组相比，P<0.01。KLF1，Krüppel-like因子1；si-/siRNA，小干扰RNA。
图3。
图3。
KLF1干扰抑制宫颈癌细胞的增殖、转移和侵袭能力。（A） KLF1-siRNA组的细胞增殖能力受到时间依赖性抑制（12、24和48小时）。（B和D）通过伤口愈合试验，发现KLF1-siRNA组宫颈癌细胞的细胞转移能力受到抑制。（C和E）宫颈癌细胞的细胞侵袭能力受到抑制，这是通过跨孔分析确定的。放大倍数，×100*与对照组相比，P<0.05和**P<0.01；^P<0.05和^^与模拟组相比，P<0.01。KLF1，Krüppel-like因子1；si-/siRNA，小干扰RNA；外径，光密度。
图4。
图4。
KLF1干扰影响细胞增殖和转移相关因子的表达水平。（A） 当KLF1沉默时，Ki67的mRNA水平降低，nm23-H1的mRNA水平增加。（B和E）当KLF1沉默时，Ki67蛋白水平降低，nm23-H1蛋白水平升高。（C） 采用逆转录定量聚合酶链反应检测MTA-1、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的mRNA水平。（D和E）western blotting检测MTA-1、MMP-2、MMP-9和TIMP-2蛋白水平*与对照组相比，P<0.05和**P<0.01；^P<0.05和^^与模拟组相比，P<0.01。KLF1，Krüppel-like因子1；si-/siRNA，小干扰RNA；nm23-H1，非定向克隆23类型1；MTA，转移相关抗原；基质金属蛋白酶；TIMP，金属蛋白酶组织抑制剂-2。
图5。
图5。
KLF1干扰抑制PI3K/Akt信号通路的激活。KLF1-siRNA组（A和C）PI3K和（B和C）Akt蛋白的磷酸化水平显著下降**与对照组相比P<0.01；^^与模拟组相比，P<0.01。KLF1，Krüppel-like因子1；si-/siRNA，小干扰RNA；磷脂酰肌醇-3-激酶；蛋白激酶B；p-，磷酸化。
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